參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:同馬動脈炎病毒馬病毒性動脈炎病毒PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P458
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量,計算所需反應(yīng)孔數(shù),一般做 3 個重復孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
顱骨造骨細胞RNAHCO miRNA5 μg亞精胺質(zhì)量規(guī)格:>99%,進分Spermidine
HL-60細胞,白血病原髓細胞 非小細胞肺癌細胞,NCI-H23細胞 MSC, 小鼠雪旺細胞亞精胺1酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),進口原裝Spermidine phosphate salt hexahydrate
豚鼠胚胎細胞;104C1白楊素(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,分析標準品Chrysin
CD226 Others Mouse 小鼠 DNAM-1 / CD226 細胞裂解液 (陽性對照) 白楊素質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRChrysin
CL-0459U14(小鼠子細胞)5×106cells/瓶×2刺芒柄花素(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,分析標準品Formononetin
同馬動脈炎病毒馬病毒性動脈炎病毒PCR檢測試劑盒戈米辛D(標準品)Gomisin D質(zhì)量規(guī)格:>98.0% (LC&T),標準品 人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)ELISA檢測試劑盒Human1,5-anhydroglucitol,1,5-AGELISAKit 96T/48T ELISAKitPF-4/CXCL4兔子血小板因子4規(guī)格:48T/96T
1-甲基1-Methyl Xanthine質(zhì)量規(guī)格:>98% 大鼠乙酰輔酶A羧化酶合成酶(ACC)試劑盒 Rat Acetyl-CoA Carboxylase Syhetase,ACC ELISA Kit CamelBeta-Endorphin,β-EPELISAKit駱駝β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
6-羧基-X-羅丹明6-Carboxy-X- rhodamine; 6-ROX 質(zhì)量規(guī)格:>95% 英文名稱HumanCCL1ELISAKit人CCL1規(guī)格:96T/48T 人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
西侖吉肽Cilengitide,EMD121974,NSC 707544質(zhì)量規(guī)格:>97%,integrin抑制劑 非同位素AP化學發(fā)光法RNA北方雜交試劑盒5 小鼠胞外超氧化物歧化酶[Cu-Zn](SOD3)試劑盒 Mouse Exacellular superoxide dismase [Cu-Zn](SOD3) ELISA kit
炔諾酮Norethindrone質(zhì)量規(guī)格:>97% 小鼠糖類抗原125(CA125)ELISA試劑盒 ,英文名: CA125 ELISA Kit ELISAKitbFGF-9小鼠堿性成纖維細胞生長因子9規(guī)格:48T/96T
1(標準品)Cortisone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標準品 小鼠瘦素(LEP)ELISA檢測試劑盒MouseLeptin,LEPELISAkit 96T/48T HumanAngiotensinⅠConveingEnzyme,ACEⅠELISAKit人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酪氨酸脫羧酶Tyrosine decarboxylase質(zhì)量規(guī)格:>0.1 U/mg,BC 人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)試劑盒 Human Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA Kit 人抗突變型瓜酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
維多利亞藍 RVictoria blue R質(zhì)量規(guī)格:染料含量:>80%,BS RatFractalkine/CX3CL1ELISAKit大鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)試劑盒 Mouse soluble myosin heavy chain 2,sMHC-2 ELISA Kit
關(guān)鍵字: 同馬動脈炎病毒馬病毒性動脈炎病毒核酸檢測;同馬動脈炎病毒馬病毒性動脈炎病毒PCR試;同馬動脈炎病毒馬病毒性動脈炎病毒PCR擴;同馬動脈炎病毒馬病毒性動脈炎病毒PCR熒;同馬動脈炎病毒馬病毒性動脈炎病毒通用型P;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學研究人員。
公司具有對普通貨物、冷藏及冷凍倉庫的存儲、包裝及運輸能力。
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