參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：嗉囊食通蟲PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P527
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞HSkMSC二甲基亞砜(多肽合成)質(zhì)量規(guī)格：多肽合成 Dimethyl sulfoxide

HIT-T15細(xì)胞，倉(cāng)鼠beta胰島細(xì)胞 癌細(xì)胞,MCF-7B細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEF二甲基亞砜(藥用級(jí))質(zhì)量規(guī)格：藥用級(jí) Dimethyl sulfoxide

牛胚氣管細(xì)胞;EB (NBL-4)二甲基亞砜(ACS,光譜級(jí))質(zhì)量規(guī)格：ACS,光譜級(jí)Dimethyl sulfoxide

LGMN Others Mouse 小鼠 LGMN 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 乙二醇(光譜 ,≥99%)質(zhì)量規(guī)格：光譜 ,≥99%Ethylene glycol

CM-H108表皮色素細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL甘油(for spectroscopy,≥99.5%)質(zhì)量規(guī)格：for spectroscopy,≥99.5%Glycerol in water for HPLC verification

嗉囊食通蟲PCR檢測(cè)試劑盒甘氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,美侖Glycine  CLIAKitfoSP-1ELISAKit大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1規(guī)格：48T/96T  大鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒 ，英文名： A1c ELISA Kit

甘氨酸(Sigma)質(zhì)量規(guī)格：>98%,sigma分裝Glycine  胚胎干細(xì)胞補(bǔ)充培養(yǎng)基100毫升  人熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit 96T/48T

L-甘氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品L-Glycine  ELISAKitsE-selectin人可溶性E選擇素規(guī)格：48T/96T  驢透明質(zhì)酸(HA)試劑盒 Donkey hyaluronic ,HA ELISA Kit

芐氟噻嗪質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品，用于含量測(cè)定BendrofluMethiazide  小鼠5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒 ，英文名： 5-HIAA ELISA Kit  CLIAKitforPRSS(Humanserineprotease)ELISAKit人絲氨酸蛋白酶規(guī)格：48T/96T

去甲埃羅替尼醋酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Desmethyl Erlotinib Acetate  Rat tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) ELISA Kit 大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒  Humanleukocytecommonaigen,LCA/CD45ELISA試劑盒人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

雙去甲埃羅替尼醋酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Didesmethyl Erlotinib  Salt  HumanBladdeumoraigen,BTAELISAKit 人膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  HumanNuclearmaixprotein22,NMP-22ELISAKit人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

6-羥基地氯雷他定質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口6-Hydroxy Desloratadine  HumanImmunoglobulinG,IgGELISA試劑盒人球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  大鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

3-羥基地氯雷他定質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口3-Hydroxy Desloratadine  組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-10)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20  人肽聚糖識(shí)別蛋白L(PGRP-L)試劑盒 Human peptidoglycan recognition protein L,PGRP-L ELISA Kit