中文名稱:草魚呼腸孤病毒毒通用PCR檢測試劑盒 | 品牌: 一研 |
產(chǎn)地: 國產(chǎn) | 保存條件: -20℃ |
產(chǎn)品類別: PCR試劑盒 PCR檢測試劑盒 | |
型號: EY00P531 |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:草魚呼腸孤病毒毒通用PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P531
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質控 NEG 的制備
根據(jù)實驗設置陰性質控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質控 NEG。 注:陰性質控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量,計算所需反應孔數(shù),一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應孔加樣示例
標準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
肺間充質干細胞cDNAHPMSC cDNA脫羧氯雷他定/地氯雷他定(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Desloratadine
豬源細胞 皮膚細胞,CCD-1095Sk細胞 ZM755細胞,615小鼠滑膜肉瘤瘤株地塞米1酸鈉質量規(guī)格:>98%,USPDexamethasone Phosphate
APP-PS1雙基因轉染細胞株(HEK293);APP-PS1地塞米1酸鈉(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Dexamethasone Phosphate
HA Others H5N2 甲型流感 H5N2 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) D-蛋氨酸質量規(guī)格:>98%,BRD-Mine
CL-0292MKN45(胃癌細胞)5×106cells/瓶×2索非布韋質量規(guī)格:>99%,BRSofosbuvir (GS-7977)
草魚呼腸孤病毒毒通用PCR檢測試劑盒鈣羧酸指示劑(Indicator)Calconcarboxylic 質量規(guī)格:Indicator Ratα1-microglobulin,α1-MGELISA試劑盒大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 胰蛋白酶(ypsin)ELISA試劑盒 ,英文名: ypsin ELISA Kit
氯酚紅Chlorophenol red質量規(guī)格:IND 小鼠染色框同源物3(CBX3)ELISA試劑盒 ,英文名: CBX3 ELISA Kit MouseB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISA試劑盒小鼠B細胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鈣鎂試劑Calmagite質量規(guī)格:IND 豬胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit 96T/48T ELISAKitIL-27小鼠白介素27規(guī)格:48T/96T
鎘試劑Cadion質量規(guī)格:AR 大鼠轉移抑制基因KISS1蛋白(KISS1/Kisspeptin 1)試劑盒 Rat Kisspeptin 1,KISS1 ELISA Kit GHELISAKit魚類促性腺激素釋放激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
去[5-(2-二甲氨基)乙基]地爾硫卓質量規(guī)格:美國進口Des[5-(2-dimethylamino)ethyl] Diltiazem HumancoagulationfactorⅦ,FⅦELISA試劑盒人凝血因子Ⅶ(FⅦ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒 ,英文名: BK ELISA Kit
N,N-去二甲基地爾硫卓鹽酸鹽質量規(guī)格:美國進口N,N-Didesmethyl Diltiazem 組蛋白脫乙?;?/span>7(HDAC7)活性比色法定量檢測試劑盒20 人流感病毒抗體IgG(FLU)ELISA檢測試劑盒HumanInfluenzavirusesIgG,FLUELISAKit 96T/48T
O-去乙酰-N-去甲基地爾硫卓質量規(guī)格:美國進口O-Desacetyl-N-desmethyl Diltiazem Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit人視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)試劑盒 Rat FMS-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L ELISA Kit
N-去甲基地爾硫卓鹽酸鹽質量規(guī)格:美國進口N-Desmethyl Diltiazem 小鼠P物質(SP)ELISA試劑盒 ,英文名: SP ELISA Kit CLIAKitforsLOX-1(HumanSolubleLectin-likeoxidizedlowdensitylipoproteieceptor-1)ELISAKit人可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1規(guī)格:48T/96T
成立日期 | 2014-06-05 (11年) | 注冊資本 | 100 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年營業(yè)額 | ¥ 100萬以內 |
主營行業(yè) | 生化試劑,抗體,細胞培養(yǎng),分子生物學,免疫安全 | 經(jīng)營模式 | 工廠,試劑 |
產(chǎn)品名稱 | 價格 | 公司名稱 | 報價日期 | |
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¥3490 |
VIP1年
|
上海晶風生物科技有限公司
|
2025-02-24 | |
¥2990 |
VIP6年
|
上海澤葉生物科技有限公司
|
2025-02-24 | |
¥3980 |
VIP4年
|
上海雅吉生物科技有限公司
|
2025-02-24 | |
¥2899 |
上海撫生實業(yè)有限公司
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2022-08-19 |