參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：人博卡病毒PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P596
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應孔數(shù)，一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
 大鼠成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL表木栓醇（標準品）質(zhì)量規(guī)格：鑒別FRIEDELAN-3BETA-OL

Lec1倉鼠卵巢細胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS老龍皮酸；網(wǎng)脊衣酸 A（標準品）質(zhì)量規(guī)格：鑒別用(4S)-2α,3β-Dihydroxy-D:C-friedo-B':A'-neogammacer-9(11)-en-23-oic

IGFBP5 Protein Canine 重組狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 標簽)焦性沒食子酸（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Pyrogallol

EB (NBL-4) (牛胚氣管細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠垂體細胞RPC正十九烷（標準品）質(zhì)量規(guī)格：內(nèi)標 N-NONADECANE

胰腺導管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)木蝴蝶苷B（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Oroxin B

人博卡病毒PCR檢測試劑盒蜂Melittin(Mellitin)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  Rathemeoxygenase1,HO-1ELISAKit大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Metamorphosin AMetamorphosin A質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  BJ5183鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細菌5X100微升  小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)試劑盒 Mouse maix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit

新京都肽Neo-Kyotorphin質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  MouseIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISA試劑盒小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒 ，英文名： HPA ELISA Kit

G2(>98%,BR)Aflatoxin G2質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  小鼠生長分化因子15(GDF-15)ELISA試劑盒 ，英文名： GDF-15 ELISA Kit  Mousealpha-L-fucosidase,AFUELISA試劑盒小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

奇任醇(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Kirenol  Rat homocysteic  (Hcy) ELISA Kit 大鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒  HumanH-rasELISA試劑盒人H-rasELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

千層紙素A(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Oroxylin A  HumanEsadiol,E2ELISAKit 人雌二醇(E2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/HLA-ⅡELISAKit人主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品5,15-Diacetyl-3-benzoyllathyrol  humancolicinELISA試劑盒人大腸菌素(colicin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒 ，英文名： VEGF-D ELISA Kit

普魯卡因青霉素G質(zhì)量規(guī)格：美國進口Penicillin G procaine  組織3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)合成酶活性比色法定量檢測試劑盒20  人布魯氏菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)ELISA檢測試劑盒HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgGELISAKit 96T/48T