參數規(guī)格:
產品名稱:新城疫病毒=禽副粘病毒型PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P818
產品規(guī)格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質控 ERC 的制備
根據待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質控 NEG 的制備
根據實驗設置陰性質控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質控 NEG。 注:陰性質控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1,根據所要檢測的標準曲線及待測樣本數量,計算所需反應孔數,一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據反應孔數計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應孔數+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應孔數+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應孔數+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應孔加樣示例
標準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
MSLN Others Human MSLN / Mesothelin 細胞裂解液 (陽性對照) 1-甲基海因(標準品)質量規(guī)格:供鑒別用1-METHYLHYDANTOIN
胰腺星狀細胞完全培養(yǎng)基 100mL古倫賓(標準品)質量規(guī)格:供含量測定用Columbin
BJ細胞,皮膚成纖維細胞系 克柔念珠菌 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B2安五脂素(標準品)質量規(guī)格:鑒別Anwuligan
FAM19A4 Protein Human 重組 FAM19A4 / TAFA4 蛋白 (Fc 標簽)絡石苷(標準品)質量規(guī)格:含量測定tracheloside
MDA-MB-453(癌細胞) 5×106cells/瓶×2 狗 CD2 細胞裂解液 (陽性對照) 柏醇質量規(guī)格:>98%,sigma223735Coniferyl alcohol
新城疫病毒=禽副粘病毒型PCR檢測試劑盒地爾硫卓質量規(guī)格:美國進口Diltiazem ELISAKitsTNFαR人可溶性腫瘤壞死因子α受體規(guī)格:48T/96T 轉氫酶-1 紫外分光光度法 50管/48樣
去乙酰地爾硫卓-d3質量規(guī)格:美國進口Desacetyl Diltiazem-d3 小鼠Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒 ,英文名: HELIX-Ⅱ ELISA Kit RatiggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISA試劑盒大鼠髓系細胞觸發(fā)受體-1(EM-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
O-去甲基地爾硫卓質量規(guī)格:美國進口O-Desmethyl Diltiazem 霉(Aflatoxin)ELISA檢測試劑盒AflatoxinELISAKit 96T/48T HumanLipopolysaccharides,LPSELISA試劑盒人脂多糖/內(LPS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
地美司鈉-d8質量規(guī)格:美國進口Dimesna-d8 人CD147分子(CD147)試劑盒 Human CD147 Elisa Kit Humanorosomucoid,ORMELISAKit人類粘蛋白(ORM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
美他環(huán)素,甲烯土霉素(標準品)Metacycline HCl;Methacycline HCl質量規(guī)格:分析標準品 英文名稱HumanE-SelectinELISAkit人E-SelectinELISAkit規(guī)格:96T/48T 人肌抑素(MSTN)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
美他環(huán)素,甲烯土霉素鹽酸鹽Metacycline HCl;Methacycline HCl質量規(guī)格:potency>877U per mg 豆類纖維素酶解法定量檢測試劑盒10 小鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒 Mouse monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA kit
己二酸二酰Adipic dihydrazide質量規(guī)格:>98% ELISAKitp53兔p53規(guī)格:48T/96T 血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒 ,英文名: BK ELISA Kit
alpha-亞麻酸(標準品)Linolenic 質量規(guī)格:≥98.5%(GC),分析標準品 小鼠凝血因子Ⅺ(FⅪ)ELISA試劑盒 ,英文名: FⅪ ELISA Kit MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISA試劑盒小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
關鍵字: 新城疫病毒=禽副粘病毒型核酸檢測試劑盒;新城疫病毒=禽副粘病毒型PCR試劑盒;新城疫病毒=禽副粘病毒型PCR擴增試劑盒;新城疫病毒=禽副粘病毒型PCR熒光探針試;新城疫病毒=禽副粘病毒型通用型PCR試劑;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領域,運用生物技術和科研試劑,發(fā)展現代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機構、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質的產品,服務生物科技領域的科學研究人員。
公司具有對普通貨物、冷藏及冷凍倉庫的存儲、包裝及運輸能力。
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