參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：皮諾卡菌PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P823
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 MMP1 Others Human  MMP1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 硬脂酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)Stearic

CM-R044大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL甜蜜素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 Cyclamate

SELP Others Human  SELP / selectin P / P-selectin 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 綠麥隆標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4%Chlortoluron solution

小鼠胎兒成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL敵草隆(99%)質(zhì)量規(guī)格：0.99Diuron

EL4小鼠瘤細(xì)胞 EL4 mouse lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS四螨嗪(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.6%)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.6%Clofentezine

皮諾卡菌PCR檢測(cè)試劑盒敵稗(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%Propanil  英文名稱RatPTHELISAKit大鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISAKit規(guī)格：96T/48T  牛(EPI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

抑霉唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2%Imazalil solution  酵母果膠甲酯酶(pectinmethylesterase;PME)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20  人組蛋白賴氨酸N-甲基轉(zhuǎn)移酶SETD7(SETD7)試劑盒 Human SETD7 ELISA Kit

稻瘟靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2%Isoprothiolane solution  ELISAKitAZU人天青殺素規(guī)格：48T/96T  氯離子胞內(nèi)通道蛋白4(CLIC4)ELISA試劑盒 ，英文名： CLIC4 ELISA Kit

甲基橙(生物染色)質(zhì)量規(guī)格：BSMethyl orange  小鼠低密度脂蛋白受體(LDLR)ELISA試劑盒 ，英文名： LDLR ELISA Kit  Ratai-spermaibody,AsAbELISA試劑盒大鼠抗抗體(AsAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

美拉諾坦II；MTII質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRMelanotan ⅡAcetate  ELISAKitASD人雄烯二同規(guī)格：48T/96T  前列腺素D合成酶(PTGDS)ELISA試劑盒 ，英文名： PTGDS ELISA Kit

美洛昔康質(zhì)量規(guī)格：>99%Meloxicam  小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒 ，英文名： Casp-3 ELISA Kit  rabbitHyaluronic,HAELISA試劑盒兔子透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸吉西他濱（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Gemcitabine HCl  大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測(cè)試劑盒RathighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T  Humanai-presynapticmembraneaibody,PsmAbELISA試劑盒人抗突觸前膜抗體(PsmAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲磺酸吉米沙星質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRGemifioxacin Mesylate  人臂板蛋白4C(Sema 4C)試劑盒 Human Sema 4C ELISA Kit  HumanchemerinELISAKit人chemerinELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T