參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:解脲脲原體PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào) : EY00P1223
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標(biāo)記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測(cè)樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標(biāo)記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量,計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù),一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無(wú)模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注:待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進(jìn)行加樣:
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測(cè)樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測(cè)樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
HCC1428細(xì)胞,癌細(xì)胞 小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,LTEP-P細(xì)胞 晶狀體上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)無(wú)水溴化鋰(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRLithium bromide
狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1偏1酸鋰(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRLithium metaphosphate
TNFRSF4 Others Human TNFRSF4 / CD134 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 草酸鋰(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRLithium oxalate
CL-0183PA317(小鼠成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硬脂酸鋰(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRLithium stearate
SELP Others Human SELP / selectin P / P-selectin 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3,4-苯并芘(升華精制品)(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)3,4-Benzopyrene (purified by sublimation)
解脲脲原體PCR檢測(cè)試劑盒草酸鈣一水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCalcium oxalate, monohydrate 大鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 96T/48T HumanBcellgrowthprotein,BCGFELISA試劑盒人B細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BCGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氧化鈣(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCalcium oxide (Lime) powder 人百日咳病毒抗體(IgM)試劑盒 Human bordetella peussis aibody IgM ELISA kit HumanC-PeptideELISAKit人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氧化鈣(塊)(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCalcium oxide lump Ratα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISAKit大鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1酸二氫鈣一水(85%~95%,BR)質(zhì)量規(guī)格:85%~95%,BRCalcium phosphate, monobasic, monohydrate P1噬菌體效價(jià)檢測(cè)試劑盒20 兔補(bǔ)體片斷5a(C5a)試劑盒 Rabbit compleme fragme 5a,C5a ELISA Kit
硫酸妥布霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定Tobramycin Sulfate 英文名稱MouseinhibinBELISAKit小鼠抑制素B(INHB0規(guī)格:96T/48T 牛β乳球蛋白(β-Lg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
托萘酯質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP30,BRTolnaftate PI復(fù)染試劑盒50 人中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)試劑盒 Human ai-neuophil granules aibody,ANGA ELISA Kit
拓?fù)涮婵蝶}酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>99.0%Topotecan HCl Rabbitacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA試劑盒兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒 ,英文名: PaCoA ELISA Kit
拓?fù)涮婵蝶}酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Topotecan HCl 小鼠抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 RatBromodeoxyuridine,BrdUELISA試劑盒大鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
關(guān)鍵字: 解脲脲原體核酸檢測(cè)試劑盒;解脲脲原體PCR試劑盒;解脲脲原體PCR擴(kuò)增試劑盒;解脲脲原體PCR熒光探針試劑盒;解脲脲原體通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來(lái),秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運(yùn)用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機(jī)構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
公司具有對(duì)普通貨物、冷藏及冷凍倉(cāng)庫(kù)的存儲(chǔ)、包裝及運(yùn)輸能力。
公司將始終堅(jiān)持信譽(yù)立業(yè)、以人為本、質(zhì)量保證、誠(chéng)信服務(wù)的宗旨,不斷拼搏,開(kāi)拓進(jìn)取,與各界朋友攜手共創(chuàng)美好未來(lái)。