參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：委內(nèi)瑞拉馬腦脊髓炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P1232
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無(wú)模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
 HA Others H5N8 甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) HistoChoiceDermatologyFixative皮膚組織切片固定劑25克3N

ACHN, 腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞1,4-二羌基醌;1,4-二羌基-9,10-二同 1,4-Dixy7noxycnthrcinoneonq;inoneizcrin;C.I.58050 81-64-1

GBA3 Others Human  GBA3 / CBGL1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-溴巴豆醋酯 Mqthyl 4-bromocrotonctq 1117-71-1

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181AFluconazole大扶康5KUBR

SW579細(xì)胞，甲狀腺癌細(xì)胞 鼻咽癌細(xì)胞系,HNE2-LMP1細(xì)胞 CL-0363Hs68(男性正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2604-59-1β-黃酮;5,6-本并黃酮β-Naphthoflavone;5,6-Benzoflavone;

委內(nèi)瑞拉馬腦脊髓炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒殘殺威標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=4%)Propoxur solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=4%  動(dòng)物細(xì)胞/組織胞漿超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)分離試劑盒50  載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒 ，英文名： Apo-H ELISA Kit

抗蛋白酶(進(jìn)口)Antipain di質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口  Ratsolubleclusterofdiffereiation14,sCD14ELISA試劑盒大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  Humanα-L-iduronidase,IDUAELISA試劑盒人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-巖藻糖D-(+)-FUCOSE質(zhì)量規(guī)格：>98%,日本進(jìn)口原裝  小鼠羧化不全骨鈣素(u)ELISA試劑盒 ，英文名： u ELISA Kit  ELISAKitMMP-4小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4規(guī)格：48T/96T

N-乙酰-DL-絲氨酸N-Acetyl-DL-Serine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousemaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISAkit 96T/48T  Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2ELISAKit人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸沙丁胺醇（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Albuterol sulfate  大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA檢測(cè)試劑盒Rat6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit 96T/48T  HumanImmuneRNA,IrnaELISA試劑盒人核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸普拉鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Dehydroepiandrosterone-3-sulfate  人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)試劑盒 Human D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit  HumanMaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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葡萄糖酸鋅（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：檢查Zinc gluconate  冰凍切片膠原纖維(MASSON)染色試劑盒50  人可溶性白細(xì)胞分化抗原21(CR2/sCD21)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanSolubleClusterofdiffereiation21,sCD21ELISAKit 96T/48T