中文名稱:雷斯頓埃博拉病毒PCR檢測試劑盒 | 品牌: 一研 |
產(chǎn)地: 國產(chǎn) | 保存條件: -20℃ |
產(chǎn)品類別: PCR試劑盒 PCR檢測試劑盒 | |
型號: EY00P992 |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:雷斯頓埃博拉病毒PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P992
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標(biāo)記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標(biāo)記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量,計算所需反應(yīng)孔數(shù),一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進(jìn)行加樣:
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
caski L-順式-鹽酸地爾硫卓質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口L-cis-Diltiazem ? HCl
Hepa1-6-EGFP(CMV-GFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)小鼠肝癌細(xì)胞 Hepa1-6-EGFP (CMV-GFP leiviral consuct stable sain) of hepatocellular carcinoma cells in mice DMEM+10% FBS地爾硫卓質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Diltiazem
TNFSF11 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)去乙酰地爾硫卓-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Desacetyl Diltiazem-d3
主動脈平滑肌細(xì)胞 (HASMC)( 5×105 ) HK-2, 腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞 HumanO-去甲基地爾硫卓質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口O-Desmethyl Diltiazem
小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH2地美司鈉-d8質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Dimesna-d8
雷斯頓埃博拉病毒PCR檢測試劑盒β-NADH;還原性輔酶I二鈉鹽β-NADH.hydrate質(zhì)量規(guī)格:>90%,羅氏分包 Ratnicotinicacetylcholinereceptor,N-AChRELISAKit大鼠型乙酰膽堿受體(N-AChR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
蘇拉明鈉Suramin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ERBETA蛋白共沉淀分析試劑盒5 小鼠Smad1 試劑盒 Mouse Mothers against decapeaplegic homolog 1,Smad1 ELISA Kit
彈性蛋白酶Elastase, pancreatic from porcine pancreas質(zhì)量規(guī)格:30 units/mg MouseReninELISA試劑盒小鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 細(xì)胞相關(guān)蛋白A(CagA)ELISA試劑盒 ,英文名: CagA ELISA Kit
脂肪酶Lipase質(zhì)量規(guī)格:20000U/g,BR 小鼠細(xì)胞趨化因子(Lptn)ELISA試劑盒 ,英文名: Lptn ELISA Kit Mousemelanocyteaibody,MCAbELISA試劑盒小鼠色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
精喹禾靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)Quizalofop-p-ethyl質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98% 小鼠血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA試劑盒 ,英文名: ANGⅡ ELISA Kit ELISAKitAng-Ⅰ小鼠血管緊張素Ⅰ規(guī)格:48T/96T
酮麝香(標(biāo)準(zhǔn)品)Musk ketone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA檢測試劑盒rabbitplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 96T/48T HumanCarcinoembryonicFerritin,CEFELISAKit人癌胚鐵蛋白(CEF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
苯甲酰基十字孢堿(PKC-412)Midostaurin質(zhì)量規(guī)格:≥96%,美國進(jìn)口 犬CD31分子(CD31)試劑盒 Canine cluster of differeiation 31,CD31 ELISA Kit 人凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
無水鄰菲啰啉;1,10-菲羅啉1,10 –Phenanthroline anhydrous質(zhì)量規(guī)格:AR,>99% 英文名稱HumanHeatShockProtein20ELISAKit人熱休克蛋白20(HSP20)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小鼠細(xì)胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)試劑盒 Mouse cytokeratin fragme aigen 21-1,CYFRA21-1 ELISA Kit
成立日期 | 2014-06-05 (11年) | 注冊資本 | 100 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年營業(yè)額 | ¥ 100萬以內(nèi) |
主營行業(yè) | 生化試劑,抗體,細(xì)胞培養(yǎng),分子生物學(xué),免疫安全 | 經(jīng)營模式 | 工廠,試劑 |
產(chǎn)品名稱 | 價格 | 公司名稱 | 報價日期 | |
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¥3490 |
VIP1年
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上海晶風(fēng)生物科技有限公司
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2024-11-13 | |
¥3490 |
VIP5年
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上海澤葉生物科技有限公司
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2024-11-13 | |
¥2899 |
上海撫生實業(yè)有限公司
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2022-08-19 |