參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒(REV)核酸檢測試劑盒
型號 : EY00P1284
產(chǎn)品規(guī)格:48T/盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標(biāo)記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標(biāo)記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量,計算所需反應(yīng)孔數(shù),一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進(jìn)行加樣:
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
ADAM15 Others Human ADAM15 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1酸三乙酯(TEP)(Standard for GC,>99.7%(GC))質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99.7%(GC)Triethyl phosphate
肺泡上皮細(xì)胞裂解物HPAEpiCL十三烷(Standard for GC,>99%(GC))質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99%(GC)Tridecane
鼬肺上皮細(xì)胞;MV-1-Lu 胰腺癌細(xì)胞,PANC-1細(xì)胞 3T3 clone A31細(xì)胞,小鼠胚胎成纖維細(xì)胞十四醇(Standard for GC, ≥99.5% (GC))質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC, ≥99.5% (GC)1-Tetradecanol
正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1十一烷(standard for GC,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)Undecane
IFNAR1 Others Mouse 小鼠 IFNAR1 / IFNAR 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,1-環(huán)己基二乙酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCDA, 1,1-Cyclohexanediacetic
禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒(REV)核酸檢測試劑盒SC-514;IKK-2抑制劑質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSC514 Humangranulysin,GNLYELISA試劑盒人顆粒溶素(GNLY)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 ,英文名: GFAP ELISA Kit
γ-環(huán)糊精 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRγ-Cyclodextrin 組織短鏈脂酰輔酶A脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試劑盒20 人細(xì)胞功能相關(guān)抗原1(LFA-1/CD11a+CD18)ELISA檢測試劑盒Humanlymphocytefunctionassociatedaigen1,LFA-1ELISAKit 96T/48T
甲基倍他環(huán)糊精,2,6-二甲基-β-環(huán)糊精質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMe-β-CD HumanMethemoglobin,MHBELISAKit人高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大象黃體激素(LH)試劑盒 Elepha Leinizing Hormone,LH ELISA Kit
埃博霉素B;帕土匹龍質(zhì)量規(guī)格:>98%,BREpothilone B(EPO906, Patupilone) 山羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC/OLA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 CLIAKitforPlahormoneabscisic,ABAELISAKit植物激素脫落酸規(guī)格:48T/96T
甲霜靈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%Metalaxyl 大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA檢測試劑盒RatangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 96T/48T HumancyclophilinB,CyPBELISA試劑盒人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲氧?。?biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Metoxuron 人α-內(nèi)肽(α-EP)試劑盒 Human α-Endomorphin,α-EP ELISA Kit HumanGlamatedehydrogenase;GDH/GLDHELISAKit人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
滅草?。?biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Monuron 英文名稱Mouseercellularadhesionmolecular1,ICAM-1,CD54ELISAKIT小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)規(guī)格:96T/48T 雞新城疫病毒(NDV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
煙嘧磺?。?biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Nicosulfuron SiRNA完整表達(dá)文庫構(gòu)建技術(shù)試劑盒5 人孕酮和adipoQ 受體家族成員Ⅶ(PAQR7)試劑盒 human progestin and adipoQ receptor family member Ⅶ,PAQR7 ELISA Kit
關(guān)鍵字: 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒(REV)核酸檢;禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒(REV)PCR;禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒(REV)PCR;禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒(REV)PCR;禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒(REV)通用型;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運(yùn)用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機(jī)構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
公司具有對普通貨物、冷藏及冷凍倉庫的存儲、包裝及運(yùn)輸能力。
公司將始終堅持信譽(yù)立業(yè)、以人為本、質(zhì)量保證、誠信服務(wù)的宗旨,不斷拼搏,開拓進(jìn)取,與各界朋友攜手共創(chuàng)美好未來。