中文名稱:致病性大腸桿菌(EPEC)核酸檢測試劑盒 | 品牌: 一研 |
產地: 國產 | 保存條件: -20℃ |
產品類別: PCR試劑盒 PCR檢測試劑盒 | |
型號: EY00P1407 |
參數規(guī)格:
產品名稱:致病性大腸桿菌(EPEC)核酸檢測試劑盒
型號 : EY00P1407
產品規(guī)格:48T/盒
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質控 ERC 的制備
根據待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質控 NEG 的制備
根據實驗設置陰性質控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質控 NEG。 注:陰性質控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1,根據所要檢測的標準曲線及待測樣本數量,計算所需反應孔數,一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據反應孔數計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應孔數+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應孔數+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應孔數+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應孔加樣示例
標準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 細胞裂解液 (陽性對照) 偏釩酸銀(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BRSilver metavanadate
成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL銀粉(200目)(>99.5%,EP)質量規(guī)格:>99.5%,EPSilver powder
HS-4細胞,皮膚癌細胞系 鼠傷寒沙門氏菌Ta97 雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G125-硝基愈創(chuàng)木酚鈉(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BR 5-nitroguaiacolate
XCL1 Protein Canine 重組狗 XCL1 蛋白 (His 標簽)苯亞磺酸鈉(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BR benzenesulfinate
ME-180(頸表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL1RL1 / ST2 細胞裂解液 (陽性對照) 氯化血紅素;血晶素質量規(guī)格:0.98Hemin
致病性大腸桿菌(EPEC)核酸檢測試劑盒吡羅昔康(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Piroxicam 英文名稱RaesistinElisakit大鼠抵抗素(Resistin)Elisakit規(guī)格:96T/48T 猴抗肝細胞膜抗體(LMA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
泊沙康唑質量規(guī)格:>99%Posaconazole 頡氨霉素溶液(Valinomycin)0.1毫摩爾 人(NO)試劑盒 Human niic oxide,NO ELISA Kit
泊沙康唑(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Posaconazole ELISAKitGAP-43人生長相關蛋白43規(guī)格:48T/96T 人抗軟骨抗體(ai-cailage-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: ai-cailage-Ab ELISA Kit
利福昔明質量規(guī)格:>98.0%,可用于細胞培養(yǎng)Riimin 小鼠補體成分4(C4)ELISA試劑盒 ,英文名: C4 ELISA Kit Ratheatshockprotein20,hSP-20ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1酸氫鈣二水(>98%,BR)質量規(guī)格:>98%,BRCalcium phosphate, dibasic, dihydrate 人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA檢測試劑盒HumanAquaporin1,AQP-1ELISAKit 96T/48T HumanBcellreceptor,BCRELISA試劑盒人B細胞受體(BCR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
碳酸鈰質量規(guī)格:>99.9%,ARCerium(III) carbonate, hydrate 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)試劑盒 Rat Aquaporin 5,AQP-5 ELISA Kit HumanCpGoligodeoxynucleotide,CpG-ODNELISAKit人未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
文多靈質量規(guī)格:>98%,BRVindoline 英文名稱RatCA153ELISAKit大鼠癌標志物(CA153)規(guī)格:96T/48T 人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
羅丹明B;玫瑰紅B質量規(guī)格:BSRhodamine B 活化凝血因子11(FACTORXIa)活性比色法定量檢測試劑盒20 兔白蛋白(Albumin)試劑盒 Rabbit Albumin ELISA Kit
成立日期 | 2014-06-05 (11年) | 注冊資本 | 100 |
員工人數 | 50-100人 | 年營業(yè)額 | ¥ 100萬以內 |
主營行業(yè) | 生化試劑,抗體,細胞培養(yǎng),分子生物學,免疫安全 | 經營模式 | 工廠,試劑 |
產品名稱 | 價格 | 公司名稱 | 報價日期 | |
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¥2990 |
VIP1年
|
上海晶風生物科技有限公司
|
2024-11-08 | |
¥1490 |
VIP5年
|
上海康朗生物科技有限公司
|
2024-11-08 |