參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：豬藍(lán)耳病毒經(jīng)典型/高致病性（PRRSV-C/PRRSV-M）雙重核酸檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P1554
產(chǎn)品規(guī)格：48T/盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個(gè)待測樣本檢測時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 12/7/3493  DL-Methionine methylsulfonium chloride  50mg  Salmonella saintpaul圣保羅沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

12/7/3493  DL-Methionine methylsulfonium chloride  100mg  Salmonella saintpaul圣保羅沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

12/9/5550  5&;-Guanylic  di salt  100mg  Salmonella newport新港沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

120005-55-2  CAY10621  1mg  Salmonella newport新港沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

120005-55-2  CAY10621  5mg  Salmonella montevideo蒙得維的沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

豬藍(lán)耳病毒經(jīng)典型/高致病性（PRRSV-C/PRRSV-M）雙重核酸檢測試劑盒592544-81-5  Mca-Gly-Ser-Pro-Ala-Phe-Leu-Ala-Lys(Dnp)-D-Arg-NH2  5mg  Rhizoma corydalis元胡探針法PCR鑒定試劑盒  中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

193475-71-7  DABCYL-γ-Abu-Pro-Gln-Gly-Leu-Glu(EDANS)-Ala-Lys-NH2  1mg  Rhizoma corydalis元胡探針法PCR鑒定試劑盒  中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

193475-71-7  DABCYL-γ-Abu-Pro-Gln-Gly-Leu-Glu(EDANS)-Ala-Lys-NH2  5mg  Rhizoma polygonati odorati玉竹探針法PCR鑒定試劑盒  中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

145224-98-2  Dnp-Pro-Leu-Gly-Cys(Me)-His-Ala-D-Arg-NH2  5mg  Rhizoma polygonati odorati玉竹探針法PCR鑒定試劑盒  中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

145224-98-2  Dnp-Pro-Leu-Gly-Cys(Me)-His-Ala-D-Arg-NH2  25mg  Herba houttuyniae魚腥草探針法PCR鑒定試劑盒  中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

111470-99-6  Amlodipine Besylate  50mg  Clostridium perfringens types A產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌A型LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

111470-99-6  Amlodipine Besylate  10mM(in1mLDMSO)  Clostridium perfringens產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌通用LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

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1114-81-4  H-Thr(PO?H??-OH  5g  Clostridium novyi諾氏梭狀芽孢桿菌LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

1114-94-9  H-D-Ala-D-Ala-D-Ala-OH  250mg  Clostridium novyi諾氏梭狀芽孢桿菌LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度