中文名稱:阪崎腸桿菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 品牌: 一研 |
產地: 國產 | 保存條件: -20℃ |
產品類別: PCR試劑盒 PCR-熒光探針法 | |
型號: EY00P1667 |
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 規(guī)格 | 型號 |
阪崎腸桿菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 48T0.1 PCR管/48T 0.2PCR管 | EY00P1667 |
組成及試劑配制
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
實驗外包
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
鹽酸尼非卡蘭Nifekalant 質量規(guī)格:>98%,BR Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISAKit大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鹽酸尼非卡蘭(標準品)Nifekalant 質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品 DAPI復染試劑盒50 小鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)試劑盒 Mouse high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit
醋酸辛酯(標準品)Octyl acetate質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 MouseorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISA試劑盒小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒 ,英文名: AT2R ELISA Kit
大車前苷(標準品)Plantamajoside質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠尿調蛋白(UMOD)ELISA試劑盒 ,英文名: UMOD ELISA Kit Mousefreefattys,FFAELISA試劑盒小鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
香荊芥酚(標準品)質量規(guī)格:供含量測定用5-Isopropyl-2-methylphenol 大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA檢測試劑盒Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISAkit 96T/48T 人體血小板粗提分離試劑盒10
十七碳酸甲酯(標準品)質量規(guī)格:內標METHYL HEPTADECANOATE 人MAP1酸酶雙特異性1酸酶1(DUSP-1)試劑盒 Human DUSP-1 ELISA Kit ELISAKitEBMZ人抗表皮細胞基底膜抗體規(guī)格:48T/96T
鴨腳樹葉堿(標準品)質量規(guī)格:含量測定2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic methyl ester 英文名稱MouseMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit小鼠巨噬細胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)規(guī)格:96T/48T 大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
6-羥基-7-甲氧基(標準品)質量規(guī)格:含量測定6-HYDROXY-7-METHOXYCOUMARIN 冰凍切片NADH心肌黃酶活性染色試劑盒50 人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)試劑盒 Human cardiac isoform of opnin T,c ELISA Kit
阪崎腸桿菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)小鼠脂蛋白a(Lpa)ELISA試劑盒 ,英文名: Lpa ELISA Kit 13241-33-3新橙皮苷規(guī)格 Neohesperidin
猴抗肝細胞膜抗體(LMA)ELISA檢測試劑盒Monkeyai-livercellmembraneaibody,LMAELISAKit 96T/48T 27210-57-7新丹參酮廠家 miltirone
犬凝聚素(CLU)試劑盒 Dog clusterin,CLU ELISA Kit 906-33-2新綠原酸說明書 Neochlorogenic
英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP2ELISAKIT人胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP2)規(guī)格:96T/48T 64809-67-2新芒果苷品牌 Neomangiferin
化人體RUNX3基因重組表達載體(pCMV5-RUNX3)10微克 93772-31-7新藤黃酸規(guī)格 Neogambogic
使用方法:
一、樣品DNA的制備用自選方法提取細菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
成立日期 | 2014-06-05 (11年) | 注冊資本 | 100 |
員工人數 | 50-100人 | 年營業(yè)額 | ¥ 100萬以內 |
主營行業(yè) | 生化試劑,抗體,細胞培養(yǎng),分子生物學,免疫安全 | 經營模式 | 工廠,試劑 |
產品名稱 | 價格 | 公司名稱 | 報價日期 | |
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¥3490 |
VIP5年
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上海澤葉生物科技有限公司
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2024-11-08 | |
¥3980 |
VIP3年
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上海雅吉生物科技有限公司
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2024-11-08 | |
¥1490 |
VIP5年
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上??道噬锟萍加邢薰?/div>
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2024-11-08 |