服務(wù)流程：

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

組成及試劑配制:

1、酶標板：一塊（96孔）

2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

實驗外包:

1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉(zhuǎn)錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建

PCR實驗步驟：

①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。

抗GST標簽鼠單克隆抗體（可提供標記服務(wù)）

抗Beta Actin鼠單克隆抗體（可提供標記服務(wù)）

抗Beta Actin兔多克隆抗體（可提供標記服務(wù)）

抗GAPDH鼠單克隆抗體（可提供標記服務(wù)）

抗GAPDH兔多克隆抗體（可提供標記服務(wù)）

Western Blot與IP細胞裂解液（可提供標記服務(wù)）

BCA蛋白定量檢測試劑盒（可提供標記服務(wù)）

彩色預(yù)染蛋白分子量標準(10-180 kDa)（可提供標記服務(wù)）

SDS-PAGE凝膠配制試劑盒（可提供標記服務(wù)）

PBS (Phosphate Buffered Saline, pH7.5, 10x)（可提供標記服務(wù)）

AuraECL化學發(fā)光檢測試劑盒（可提供標記服務(wù)）

RIPA裂解液（強）（可提供標記服務(wù)）

Bradford蛋白定量檢測試劑盒（可提供標記服務(wù)）

彩色預(yù)染蛋白分子量標準(10-250 kDa)（可提供標記服務(wù)）

SDS-PAGE電泳液（粉劑）（可提供標記服務(wù)）

PBST (Phosphate Buffered Saline Tween-20, pH7.5, 10x)（可提供標記服務(wù)）

AuraECL Plus化學發(fā)光檢測試劑盒（可提供標記服務(wù)）

RIPA裂解液（中）（可提供標記服務(wù)）

蛋白標準溶液（BSA）（可提供標記服務(wù)）

彩色預(yù)染蛋白分子量標準(40-300 kDa)（可提供標記服務(wù)）

 小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒

 小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒

 小鼠大內(nèi)皮素(BigET)ELISA試劑盒

 小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒

 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA試劑盒

 小鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒

 小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒

 小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒

 小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒

 小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒

 小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒

 小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒

 小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒

 小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒

 小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒

 小鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒

 小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒

 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa檢測試劑盒

 人α抗胰糜蛋白酶(AACT)elisa檢測試劑盒

 小鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒

 人肺炎衣原體抗體(Cpn-Ab)elisa檢測試劑盒

 人表面活性蛋白A(SP-A)elisa檢測試劑盒

 小鼠內(nèi)皮素(ET-)ELISA試劑盒

溶藻弧菌核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)elisa檢測試劑盒

 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)elisa檢測試劑盒

 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)elisa檢測試劑盒

使用方法：

一、樣品DNA的制備用自選方法提取細菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。

二、制備O157:H7標準曲線（以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

1. 標記6個離心管，分別為6，5，4，3，2和1號。

2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水（*用帶芯槍頭，下同）。

3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。

4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽性對照。

5. 換槍頭，從6號管中取5 μL溶液到5號管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽性對照。6. 換槍頭，從5號管中取5 μL溶液到4號管中，重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。

7. NC管中不加任何陽性對照。

8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR（見下步），每個樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。