應(yīng)用
Pepstatin A 適合用于：熒光基質(zhì)金屬蛋白酶測(cè)定中抑制劑混合物組織勻漿過(guò)程中作為蛋白酶抑制劑提取細(xì)胞過(guò)程中作為蛋白酶抑制劑胃蛋白酶抑制劑 A 滴定法測(cè)定組織蛋白酶 D 的摩爾濃度抑制組織蛋白酶 D它可與E64-d和Leupeptin A合用，用于抑制自噬體內(nèi)自噬底物的降解。對(duì)于該應(yīng)用，工作濃度通常在1-10μM之間。
生化/生理作用
胃酶抑素 A 是酸性蛋白酶（天冬氨?；拿福┑囊种苿?。它可與蛋白酶如胃蛋白酶、腎素、組織蛋白酶 D、牛凝乳酶和蛋白酶 B（黑曲霉）形成 1:1 的復(fù)合物。該抑制劑具有高度的選擇性，不會(huì)抑制硫醇蛋白酶、中性蛋白酶或絲氨酸蛋白酶?？扇苄?γ-分泌酶和逆轉(zhuǎn)錄病毒蛋白酶也可被胃酶抑素 A 抑制。它已用于鑒定多種來(lái)源的蛋白酶。
單位定義
1u 相當(dāng)于使胃蛋白酶活性降低 1u 的抑制劑的量（1u 相當(dāng)于在 pH 2.0 和 37℃ 下每分鐘使 280 nm 處的吸光度增加 0.001 的酶的量（血紅蛋白，貨號(hào) 51290，作為底物的，最終體積 16 mL））；如上所述的10′000吸光度約相當(dāng)于 ~1 Bergmeyer-U（當(dāng) 1 胃蛋白酶-U 為在pH 2.0 和 37℃ 下每分鐘水解 1 μg/l 乙酰-L-苯丙氨酰-3,5-二碘-L-酪氨酸的酶時(shí)）
制備說(shuō)明
胃蛋白酶抑制劑能夠以1 mg/ml溶于含10％（v/v）乙酸的甲醇溶液（甲醇:乙酸比例9:1）中。使用甲醇或DMSO溶解該肽時(shí)，乙酸可能是必需的。它能夠以1-2 mg/ml溶解在乙醇中，但可能需要加熱才能完全溶解。胃蛋白酶抑制劑溶液可以加熱至最高60℃而不會(huì)導(dǎo)致肽分解。1 mg/ml儲(chǔ)備溶液可在4℃下穩(wěn)定保存至少一周。溶劑為甲醇或DMSO的1 mM溶液可在-20℃下穩(wěn)定保存數(shù)月。如果溶液變成深黃色，則表示試劑水解。工作濃度為1μM的溶液可在室溫下穩(wěn)定保存至少一天。
Sigma-Aldrich西格瑪奧德里奇(上海)貿(mào)易有限公司
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