| 描述 | Rapamycin (Sirolimus) 是一種特異性的 mTOR 抑制劑，IC50 為 0.1 nM。 |
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| 相關(guān)類別 | 信號(hào)通路 >> 自噬 >> 自噬 信號(hào)通路 >> PI3K/Akt/mTOR 信號(hào)通路 >> mTOR 研究領(lǐng)域 >> 癌癥 天然產(chǎn)物 >> 其他 |
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| 靶點(diǎn) | mTOR:0.1 nM (IC50) Autophagy |
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| 體外研究 | 雷帕霉素抑制HEK293細(xì)胞內(nèi)源性mTOR活性，IC50為0.1 nM，比iRap和AP21967更有效，IC50分別為5 nM和10 nM [1]。雷帕霉素通過誘導(dǎo)自噬發(fā)揮其對(duì)惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的抗腫瘤作用，并且表明在惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞中PI3K / Akt信號(hào)傳導(dǎo)途徑的破壞可以極大地增強(qiáng)mTOR抑制劑的有效性。雷帕霉素以劑量依賴性方式抑制所有三種細(xì)胞系中的細(xì)胞活力，但它們的敏感性不同。 T98G，U87-MG和U373-MG細(xì)胞的IC50水平分別為2 nM，1μM和>25μM[3]。 |
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| 體內(nèi)研究 | 雷帕霉素（ip，1.5 mg / kg）治療幾乎完全可以防止7天和14天跖肌重量和纖維大小的肥大增加[4]。每天用WT或LS / +小鼠雷帕霉素（2mg / kg體重ip）處理4周，然后每周注射相同劑量另外4周。來自雷帕霉素處理的LS / +小鼠的心臟的異常胎兒基因表達(dá)譜顯著逆轉(zhuǎn)[5]。 |
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| 溶解度 | 體外： DMSO：150 mg / mL（164.08 mM;需要超聲波） H 2 O：<0.1 mg / mL（不溶） 體內(nèi)：1。逐個(gè)添加每種溶劑：10％DMSO 90％玉米油溶解度：≥2.5mg / mL（2.73 mM）;澄清溶液2.逐個(gè)加入各溶劑：10％DMSO 90％（20％SBE-β-CD在鹽水中）溶解度：2.5mg / mL（2.73mM）;暫停解決方案;需要超聲波和加熱3.逐個(gè)添加每種溶劑：10％DMSO 40％PEG300 5％吐溫-80 45％鹽水溶解度：≥2.5mg / mL（2.73 mM）;明確解決方案 |
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| 儲(chǔ)備液 | 1 mM1.0939 mL5.4694 mL10.9389 mL5 mM0.2188 mL1.0939 mL2.1878 mL10 mM0.1094 mL0.5469 mL1.0939 mL |
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| 激酶實(shí)驗(yàn) | 將HEK293細(xì)胞以每孔2-2.5×10 5個(gè)細(xì)胞接種于12孔板中，僅在DMEM中血清饑餓24小時(shí)。將細(xì)胞模擬處理或用雷帕霉素（0.05-50nM），iRap（0.5-500nM）或AP21967（0.5-500nM）在37℃處理15分鐘。在37℃下將血清加入終濃度為20％的30分鐘。裂解細(xì)胞并通過SDS-PAGE分離細(xì)胞裂解物。將分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至PVDF膜，并用針對(duì)p70 S6激酶的Thr389的磷酸特異性一抗進(jìn)行免疫印跡。使用ImageQuant和KaleidaGraph [1]分析數(shù)據(jù)。 |
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| 細(xì)胞實(shí)驗(yàn) | HL-60，NB4，U937，KG-1和K562細(xì)胞常規(guī)傳代于RPMI-1640中，補(bǔ)充有10％熱滅活的FBS，2 mM L-谷氨酰胺，50 U / mL青霉素和50μg/ mL鏈霉素。在37°C下，5％CO2加濕的氣氛。對(duì)于實(shí)驗(yàn)，通過離心收獲指數(shù)生長(zhǎng)的細(xì)胞，并重懸于含有10％FBS的新鮮培養(yǎng)基中。在各種濃度的DMSO或1μMATRA存在下，在BD Falcon六孔板中以2×10 5 / mL的初始細(xì)胞密度接種細(xì)胞。在分化劑之前20分鐘加入雷帕霉素（20nM）。在第2天，向每個(gè)孔中加入0.3mL新鮮培養(yǎng)基。通過臺(tái)盼藍(lán)排除法測(cè)定活細(xì)胞，并使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器進(jìn)行定量[2]。 |
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| 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) | 將雌性Sprague-Dawley大鼠（250-275g），成年雌性SD大鼠（225-250g）隨機(jī)分配至治療組或媒介物組，使得每組的平均起始體重相等。藥物治療開始于手術(shù)當(dāng)天或14天停藥后重新加載的天。雷帕霉素每天一次通過腹膜內(nèi)注射以1.5mg / kg的劑量遞送，溶于2％羧甲基纖維素中。 CsA每天一次通過皮下注射以15mg / kg的劑量遞送，溶于10％甲醇和橄欖油中。 FK506每天一次通過皮下注射以3mg / kg的劑量遞送，溶于10％乙醇，10％的cremophor和鹽水中。將小鼠[5]雷帕霉素以20 mg / mL的濃度溶解于乙醇中，過濾滅菌，重懸于載體（0.25％PEG，0.25％吐溫-80）中，濃度為1 mg / mL，腹腔注射（2 mg） / kg體重），每天4周或每天4周，然后每周注射另外4周。注射開始于8周（肥大發(fā)作前）或12周（表明確定肥大后）的年齡，并在治療4周后或治療8周后評(píng)估小鼠，詳見結(jié)果和圖例。 。作為對(duì)照，WT和LS / +小鼠僅用載體處理。 |
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| 運(yùn)輸 | 室溫;可能會(huì)有所不同 |
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| SMILES | O=C([C@@]1(O)[C@@H](CC[C@@H](C[C@@H](/C(C)=C/C=C/C=C/[C@H](C[C@@H](C)C([C@@H]([C@@H](/C(C)=C/[C@H]2C)O)OC)=O)C)OC)O1)C)C(N3CCCC[C@H]3C(O[C@@H](CC2=O)[C@@H](C[C@H]4C[C@H]([C@H](O)CC4)OC)C)=O)=O |
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| 參考文獻(xiàn) | [1]. Edwards SR, et al. The rapamycin-binding domain of the protein kinase mammalian target of rapamycin is a destabilizing domain. J Biol Chem, 2007, 282(18), 13395-13401. [2]. Lalic H, et al. Rapamycin enhances dimethyl sulfoxide-mediated growth arrest in human myelogenous leukemia cells. Leuk Lymphoma. 2012 Nov;53(11):2253-61. [3]. Takeuchi H, et al. Synergistic augmentation of rapamycin-induced autophagy in malignant glioma cells by phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B inhibitors. Cancer Res, 2005, 65(8), 3336-3346. [4]. Bodine SC, et al. Akt/mTOR pathway is a crucial regulator of skeletal muscle hypertrophy and can prevent muscle atrophy in vivo. Nat Cell Biol, 2001, 3(11), 1014-1019. [5]. Marin TM, et al. Rapamycin reverses hypertrophic cardiomyopathy in a mouse model of LEOPARD syndrome-associatedPTPN11 mutation. J Clin Invest. 2011 Mar;121(3):1026-43. |
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相關(guān)活性
小分子 | 都靈1 | 4,6-二-4-嗎啉基-N-(4-硝基苯基)-1,3,5-三嗪-2-胺 | 沙帕色替 | AZD-8055 | Dactolisib | 維妥色替 | Torkinib | LY3023414 | 9-(6-氨基-3-吡啶基)-1-[3-(三氟甲基)苯基]苯并[H]-1,6-萘啶-2(1H)-酮 | 奧米利塞 | 雌激素三醇 | 紅景天苷 | Bimiralisib | 反式-4-[4-氨基-5-(7-甲氧基-1H-吲哚-2-基)咪唑并[5,1-F][1,2,4]三嗪-7-基]環(huán)己烷羧酸 | PI-103 抑制劑 |
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