1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng) SK-N-BE(2)
細(xì)胞別稱(chēng) SK-N-BE2; SKNBE(2); SKNBE-2; SKNBE2; SK-N-BE; SKNBE
細(xì)胞背景描述 SK-N-BE(2)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株是于1972年11月從一位多次化療及放療的擴(kuò)散性神經(jīng)母細(xì)胞瘤患兒骨髓穿刺物中建立的;SK-N-BE(2)細(xì)胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。有報(bào)道稱(chēng),SK-N-BE(2)細(xì)胞的飽和濃度超過(guò)1×10^6細(xì)胞/cm^2。SK-N-BE(2)細(xì)胞形態(tài)多樣,有的有長(zhǎng)突觸、有的呈上皮細(xì)胞樣;SK-NBE(2)細(xì)胞會(huì)聚集,形成團(tuán)塊并浮起。
供體年齡 男;2歲
組織來(lái)源 腦;神經(jīng)母細(xì)胞瘤,骨髓轉(zhuǎn)移灶
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)母細(xì)胞樣
細(xì)胞類(lèi)型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類(lèi)型 神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 半貼半懸
生物安全等級(jí) 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 MEM/F12+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟 1、該細(xì)胞為半貼壁半懸浮細(xì)胞,懸浮細(xì)胞是活細(xì)胞,可用離心管收集細(xì)胞懸液后,于1200 rpm(250g左右)離心收集細(xì)胞;
2、部分貼壁不牢的細(xì)胞可直接吹起使之懸?。?/p>
3、貼壁較牢固的細(xì)胞可用PBS潤(rùn)洗后,在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培養(yǎng)箱中消化,待細(xì)胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化,輕輕吹散細(xì)胞后離心搜集細(xì)胞;
4、將懸浮的細(xì)胞和貼壁的細(xì)胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
消化時(shí)間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~36-48 hours
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