1.細(xì)胞起源：
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 NCI-H446 [H446]
細(xì)胞別稱 H446; H-446; NCI-446; NCIH446
細(xì)胞背景描述 NCI-H446細(xì)胞是從一位小細(xì)胞肺癌患者的胸水中建立的，NCI-H446細(xì)胞的原始形態(tài)并不具有小細(xì)胞肺癌特征。NCI-H446細(xì)胞是小細(xì)胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種，表達(dá)神經(jīng)元特有的烯醇酶和腦部肌酸激酶同功酶。NCI-H446細(xì)胞內(nèi)左旋多巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達(dá)到可檢測(cè)水平。C-myc DNA序列擴(kuò)增約20倍，c-myc RNA比正常細(xì)胞增加15倍。最初，傳代培養(yǎng)基用RPMI-1640(含5%胎牛血清、10nM氫化可的松、0.005mg/ml胰島素、0.01mg/ml鐵傳遞蛋白、10nM 17-β雌二醇、30nM亞硒酸鈉)。
供體年齡 男；61歲
組織來(lái)源 肺；轉(zhuǎn)移灶：肋膜滲出癌；小細(xì)胞肺癌
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 肺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 半貼半懸
生物安全等級(jí) 1
2.培養(yǎng)及保藏：
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)＋10% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣，95%；CO 2，5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法：
傳代步驟
1、該細(xì)胞為半貼壁半懸浮細(xì)胞，懸浮細(xì)胞是活細(xì)胞，可用離心管收集細(xì)胞懸液后，于1200 rpm（250g左右）離心收集細(xì)胞；
2、部分貼壁不牢的細(xì)胞可直接吹起使之懸浮；
3、貼壁較牢固的細(xì)胞可用PBS潤(rùn)洗后，在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液（含EDTA）置于37℃培養(yǎng)箱中消化，待細(xì)胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化，輕輕吹散細(xì)胞后離心搜集細(xì)胞；
4、將懸浮的細(xì)胞和貼壁的細(xì)胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
消化時(shí)間 1~2分鐘
傳代比例（密度） 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
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