1.售前須知:
該細(xì)胞培養(yǎng)難度較高;培養(yǎng)溫度為度:33.5℃-34℃;培養(yǎng)基中添加G418。
2.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡稱 hFOB 1.19
細(xì)胞別稱 hFOB1.19; hFOB
細(xì)胞背景描述 hFOB 1.19細(xì)胞是在0.6mg/mL新霉素G418存在下,用溫度敏感的表達(dá)載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然流產(chǎn)的胎兒四肢組織建立的細(xì)胞系。在許可溫度33.5℃下細(xì)胞分裂很快,而在限制溫度39.5℃下細(xì)胞極少分裂或不分裂。hFOB 1.19細(xì)胞具有分化為表達(dá)造骨細(xì)胞表型的成熟造骨細(xì)胞的能力;hFOB 1.19細(xì)胞提供了一個(gè)同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng),用于研究正常人造骨細(xì)胞的分化、造骨細(xì)胞生理和激素、生長因子和對(duì)造骨細(xì)胞的功能及分化有影響的細(xì)胞因子。
供體年齡 胚胎
組織來源 骨;成骨細(xì)胞;以SV40巨細(xì)胞抗原轉(zhuǎn)染
細(xì)胞形態(tài) 多細(xì)胞形態(tài)
細(xì)胞類型 條件永生化細(xì)胞
生長特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級(jí) 2 [Cells contain SV40 viral sequences]
3.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 DMEM/F12(PM150312)+0.3mg/ml G418(PB180125)+10%FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
34℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
傳代步驟 1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動(dòng)物治療等其它臨床診斷使用!以實(shí)際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。