1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡稱 HCCLM3
細(xì)胞別稱 LM3; MHCC-LM3; MHCCLM3
細(xì)胞背景描述 HCCLM3細(xì)胞是一株由人肝癌細(xì)胞株MHCC97-H接種裸鼠、進(jìn)行3次肺轉(zhuǎn)移篩選、取肺轉(zhuǎn)移瘤建成皮下接種后高度自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移的肝癌細(xì)胞系。HCCLM3細(xì)胞被廣泛用于人肝癌發(fā)病機理的基礎(chǔ)和臨床研究,也可用于抗腫瘤藥物篩選。
供體年齡 39歲
組織來源 肝;肝癌
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 肝膽癌細(xì)胞
生長特性 貼壁細(xì)胞
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 DMEM(PM150210)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時間 ~35-48 hours
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。