1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡稱 HCC1937
細(xì)胞別稱 HCC-1937
細(xì)胞背景描述 HCC1937細(xì)胞1995年10月13日最初來源于原發(fā)性導(dǎo)管癌,用了11.5個(gè)月建株。腫瘤分類為TNMⅡB期,3級。BRCA1分析表明,HCC1937細(xì)胞是BRCA 15382C突變純合的,而來源于同一病人的類淋巴母細(xì)胞細(xì)胞株在這個(gè)突變位點(diǎn)上是雜合的。另兩個(gè)家庭成員也有這個(gè)突變;一個(gè)同卵雙生姐妹也患有乳腺癌。HCC1937細(xì)胞有一個(gè)后天的Tp53突變,而其野生型等位基因丟失;一個(gè)PTEN基因的后天的純合缺失,以及多個(gè)與乳腺癌發(fā)病機(jī)理相關(guān)的位點(diǎn)上發(fā)生的雜合突變。HCC1937細(xì)胞Her2-neu和p53表達(dá)都呈陰性。HCC1937細(xì)胞的上皮細(xì)胞特異性標(biāo)志上皮細(xì)胞糖蛋2(EGP2)和細(xì)胞角蛋白19都呈陽性;雌激素受體(ER)和孕酮(PR)表達(dá)陰性。
供體年齡 女;23歲
組織來源 乳房;原發(fā)性導(dǎo)管癌;3級,ⅡB期
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 乳腺癌細(xì)胞
生長特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 3~5分鐘
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~50-60 hours
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實(shí)際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。