1.細胞起源:
細胞簡稱 HBL-100
細胞別稱 HBL 100; HBL100
細胞背景描述 HBL-100細胞是由E·V·Gaffney及其同事從一位沒有乳癌家族史的供者乳汁中建立的一株上皮細胞;培養(yǎng)出來的HBL-100細胞染色體組型在第7代時就不正常。電鏡照片顯示,HBL-100細胞內(nèi)有微絲、張力原纖維和橋粒。Southern轉(zhuǎn)移表明,HBL-100細胞有整合型SV40病毒基因,不可以當作正常細胞。
供體年齡 女;27歲
組織來源 乳腺
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
細胞類型 轉(zhuǎn)化細胞系
生長特性 貼壁細胞
生物安全等級 2
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時間 ~40 hours
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準,網(wǎng)站說明書僅供參考。