磺化Cy5是Cy5(Cyanine 5)的水溶型。它的光譜性質和Cy5類似,在熒光顯微鏡下發(fā)遠紅色熒光。它熒光亮,對pH不敏感,一般可以用633 nm或647 nm的激光束激發(fā)然后用 Cy5或APC濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用?;腔疌y5熒光落在遠紅光區(qū),使用磺化Cy5或者其它遠紅光染料的一個重要優(yōu)勢是在這個長波長光譜范圍內(nèi)樣品背景熒光較低,而在這個區(qū)域CCD相機/檢測器檢測靈敏度最高?;腔疌y5-馬來酰亞胺可以用來標記蛋白,抗體,多肽,核酸分子等。由于它的良好水溶性,它比普通Cy5-馬來酰亞胺更適合標記蛋白。
馬來酰亞胺(maleimide)是生物標記反應中常用的基團,它可以和巰基(-SH)通過親和加成反應生成穩(wěn)定的巰醚(thioester)結構從而實現(xiàn)標記。盡管胺基(比如賴氨酸精氨酸側鏈)也有親和性,但在中性或微酸性緩沖液中,馬來酰亞胺選擇性標記巰基(反應速度比胺基快>1000倍)。標記反應反應迅速,選擇性高,產(chǎn)率好,另外,巰基是一種在生物分子中廣泛存在的官能團,比如蛋白中的半胱氨酸(cysteine)和雙硫鍵等,因此馬來酰亞胺/巰基(maleimide/thiol)標記已成為僅次于NHS/胺基標記的最常用生物連接反應(bioconjugation)。
磺化Cy5-馬來酰亞胺的水溶性非常好,所以可以在水相的標記反應體系中直接使用,不需要有機溶劑助溶,特別適合標記對有機溶劑敏感的生物分子。另外磺化Cy5水溶性極好,并且染料分子本身帶電荷,標記到蛋白表面后不會引發(fā)疏水性聚集,提高熒光標記產(chǎn)物的穩(wěn)定性?;腔疌y5-馬來酰亞胺也溶于甲醇,DMSO,DMF等有機溶劑,標記反應也可以在純有機溶劑中進行。如需脂溶性Cy5染料,可選擇普通花青素(cyanine),即Cy5-馬來酰亞胺 D10036 )。
磺化Cy5-馬來酰亞胺標記后的產(chǎn)物Ex/Em是649/672nm。和它具有相似熒光特性的染料包括Alexa Fluor 647,DyLight 649,ATTO 647等。
英文名稱:Sulfo-Cyanine5 maleimide
Sulfo-Cy5 maleimide
Sulfo-Cy5 Mal
產(chǎn)品名稱:磺酸Cyanine5標記馬來酰亞胺
CAS:2242791-82-6
性狀:深藍粉末
分子量:803
分子式:C38H43KN4O9S2
Abs/Em Maxima:646/662nm
溶解度:溶于水,DMSO,DMF
質量控制:純度>95%
結構式:
儲存條件:在-20°C中24個月
運 輸:室溫下長達3周。避免長時間接觸光線。變干。
注意事項:
天然生物分子中巰基一般于氧化狀態(tài)(如雙硫鍵)存在,在馬來酰亞胺標記前,務必用還原劑(如DTT,TCEP)活化巰基并除去多余還原劑。
馬來酰亞胺也可以和疊氮化合物反應,應避免疊氮官能團。
標記反應不要放在強光下,因為大部分熒光化合物在強光下長時間照射會緩慢光漂泊。
關鍵字: 2242791-82-6;2242791-82-6;
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