產(chǎn)品描述

　　本產(chǎn)品中包含反應(yīng)緩沖液、BstLDNA聚合酶和耐熱型反轉(zhuǎn)錄酶的RT-EnzymesMix、凍干保護劑和熒光染料組分。其中反應(yīng)緩沖液中含Mg2+，dNTP等擴增必須組分，使用時只需要將Buffer、反應(yīng)酶、熒光染料、引物混合并加入模板即可；若添加凍干保護劑可進一步配置可凍干體系。

　　應(yīng)用

　　適用于DNA、RNA等溫擴增。

　　運輸與保存方法

　　干冰運輸，-25～-15℃保存。

　　避免反復(fù)凍融，產(chǎn)品有效期12月。

　　實驗流程

　　1）將Buffer取出解凍，使用前充分渦旋混勻，并短暫離心收集液體至管底。

　　2）反應(yīng)體系按下表配制

　　備注：10×PrimerMix濃度：16μMFIP/BIP，2μMF3/B3，4μMLoopF/B。核酸模板建議使用DEPC水溶解。

　　3）擴增反應(yīng)

　　在熒光PCR儀（如ABI7500等）上設(shè)置如下程序。

　　注意事項

　　1）Buffer融化后可能會有白色沉淀，在室溫下充分混勻即可澄清。

　　2）反應(yīng)溫度可根據(jù)引物情況在62℃-68℃間進行優(yōu)化。

　　3）實驗應(yīng)規(guī)范操作，包括反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣等過程。為避免污染，建議在超凈臺中配制反應(yīng)體系，在其他房間的通風(fēng)櫥中加入模板以免產(chǎn)生假陽性干擾。