中文名稱:纖維介素蛋白(FGL2)重組蛋白

英文名稱:Recombinant Fibrinogen Like Protein 2 (FGL2)

英文簡稱:FGL2

規(guī)格:10μg 50μg 200μg 1mg 1g

來源:原核表達(dá)

宿主:E.coli

纖維介素蛋白(FGL2)重組蛋白提取的總原則和注意事項(xiàng):

1. 盡可能提取完全或降低樣本復(fù)雜度,只集中提取目的蛋白;

2. 保持蛋白處于溶解狀態(tài)(通過裂解液的pH鹽濃度,表面活性劑,還原劑等的選擇);

3. 提取過程防止蛋白降解、聚集、沉淀、修飾等(低溫操作,加入合適的蛋白酶和磷酸酶抑制劑);

4:盡量除去核酸、多糖、脂類等干擾分子(通過加入核酸酶或采取不同提取策略);

5:樣品分裝,長期于-80℃保存,避免反復(fù)凍融。

纖維介素蛋白(FGL2)重組蛋白分離純化原則總結(jié):

1 應(yīng)盡可能利用蛋白質(zhì)不同物理特性選擇所用的分離純化技術(shù),而不是利用相同技術(shù)多次純化;

2 不同的蛋白在性質(zhì)上有很大區(qū)別,每一步純化步驟都應(yīng)當(dāng)充分利用目的蛋白和雜質(zhì)成分物理性質(zhì)差異;

3 在純化早期階段要盡量減少處理體積,方便后續(xù)純化;

4 在純化后期階段,再使用造價(jià)高的純化方法,有利于純化材料的重復(fù)使用,減少再生復(fù)雜性。

纖維介素蛋白(FGL2)重組蛋白表達(dá)是指用模式生物如細(xì)菌、酵母、動物細(xì)胞或者植物細(xì)胞表達(dá)外源基因蛋白的一種分子生物學(xué)技術(shù)。在基因工程技術(shù)中占有核心地位。 編輯本段蛋白表達(dá)系統(tǒng)概述蛋白表達(dá)系統(tǒng)是指由宿主、外源基因、載體和輔助成分組成的體系。通過這個(gè)體系可以實(shí)現(xiàn)外源基因在宿主中表達(dá)的目的。一般由以下幾個(gè)部分組成:

1、宿主。表達(dá)蛋白的生物體?？梢詾榧?xì)菌、酵母、植物細(xì)胞、動物細(xì)胞等。由于各種生物的特性不同,適合表達(dá)蛋白的種類也不相同。

2、載體。載體的種類與宿主相匹配。根據(jù)宿主不同,分為原核(細(xì)菌)表達(dá)載體、酵母表達(dá)載體、植物表達(dá)載體、哺乳動物表達(dá)載體、昆蟲表達(dá)載體等。載體中含有外源基因片段。通過載體介導(dǎo),外源基因可以在宿主中表達(dá)。

3、輔助成分。有的表達(dá)系統(tǒng)中還包括了協(xié)助載體進(jìn)入宿主的輔助成分。比如昆蟲-桿狀病毒表達(dá)體系中的桿狀病毒。