技術(shù)指標(biāo):外觀:黃色無定型凍干粉末;蛋白純度:≥90%;比活性:≥15U/mg酶粉;過氧化氫酶:≤0.03%;肌酐酶:≤0.01%;肌酸酶:≤0.01%;ATP酶:≤0.005%;
酶學(xué)性質(zhì)
來源:微生物,肌氨酸氧化酶;分類:EC1.5.3.1;分子量:45kDa(SDS-PAGE);等電點(diǎn):5.3;Km值:5.6×10-3M(Sarcosine);抑制劑:SDS,Zn2+,Cd2+;最適pH:8.0;最適溫度:50℃;pH穩(wěn)定性:pH7.0-9.5(25℃,16h);熱穩(wěn)定性50℃以下穩(wěn)定(pH7.5,30min);穩(wěn)定性:-20℃靜置保存12個(gè)月保持90%以上活性。
用途:用于酶法肌酐試劑的研發(fā)和大量配制。
酶活定義:?jiǎn)挝幻富疃x為在下述條件下,每分鐘催化生成1μmolH2O2所需的酶量。
試劑準(zhǔn)備
試劑I:0.2MTris-HCl緩沖液,pH8.0。
試劑II:1.0M肌氨酸溶液(8.9g肌氨酸溶解到100mLUP水中)。
試劑III:1kU/mLPOD。
試劑IV:50mM4-AA溶液(1.016g4-AA溶于100mLUP水)。
試劑V:50mMTOOS溶液(1.657gTOOS溶于100mLUP水)。
酶稀釋液:20mMTris-HCl,pH8.0,2mMEDTA。
操作步驟
1.向1mL比色皿中加入1mL反應(yīng)混合物。
2.37℃溫浴5min。
3.向反應(yīng)混合物中加入20μL待測(cè)酶液,混勻。
4.37℃反應(yīng),在555nm檢測(cè)樣品1min內(nèi)的吸光度變化(ΔAs)
關(guān)鍵字: 肌氨酸氧化酶;Sarcosine Oxidase;肌氨酸氧化酶SOX;
瀚海新酶生物科技有限公司成立于2015年,是一家專業(yè)從事生物醫(yī)藥、體外診斷核心原料研發(fā)、生產(chǎn)、應(yīng)用和技術(shù)服務(wù)的高新技術(shù)企業(yè),在上海、武漢、蘇州、青島、宜昌等五地分別設(shè)立研發(fā)生產(chǎn)中心。