NCI-H295R細胞|NCI-H295R人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞來源于尚恩生物自建細胞庫，10年以上細胞研發(fā)經(jīng)驗團隊，保證細胞產(chǎn)品品質(zhì)高、代數(shù)低、發(fā)貨快；在庫人源細胞系提供STR鑒定報告，其他種屬提供種屬鑒定報告，為您提供穩(wěn)定、可靠的細胞產(chǎn)品，滿足您對凍存細胞、復(fù)蘇細胞的需求。尚恩生物提供專業(yè)的細胞培養(yǎng)支持和完善的售后服務(wù)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
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一、細胞基本屬性 |
| 細胞名稱 | NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞) |
| 細胞別稱 | NCI-H295R |
| 細胞貨號 | SNL-391 |
| 細胞種屬 | 人 |
| 培養(yǎng)條件 | H-DMEM+10%FBS+1%雙抗 |
| 培養(yǎng)環(huán)境 | 空氣，95%； 二氧化碳 (CO2)，5% |
二、細胞培養(yǎng)操作 |
| 換液周期 | 2-3天 |
| 培養(yǎng)基體積 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 傳代比例 | 1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定） |
| 傳代方法 | 1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s，吸走潤洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層；
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；
5.消化到細胞間隙變大，但未完全脫落時加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化；
6.混勻細胞，900rpm離心3-5min，棄上清；
7.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；
8.補足完全培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)； |
| 注意事項 | 不同品牌胰酶消化時間差別較大，注意嚴格控制消化時間
消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。 |
三、細胞凍存操作 |
| 凍存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦); |
| 凍存規(guī)格 | 200-300萬/ml，1ml每管 |
| 凍存方法 | 1.消化并離心獲得細胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞；
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管；
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存 |
| 注意事項 | 凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實驗方案 |
提示：
細胞內(nèi)黑色顆粒偏多，傳代會有部分到培養(yǎng)基內(nèi)，注意及時清除細胞外黑色碎片。
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