蔗糖（sucrose）含量試劑盒說明書
分光光度法50管/48樣
注 意 ：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
蔗糖（sucrose）含量試劑盒測(cè)定意義：
蔗糖是植物光合作用的主要產(chǎn)物，也是糖分運(yùn)輸和儲(chǔ)藏的主要形式。因此，測(cè)定蔗糖含量對(duì)于植物糖代謝具有重要意義。此外，蔗糖含量是飲料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等產(chǎn)品質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一。
測(cè)定原理：
先用堿與樣品共熱，破壞其中的還原糖。然后在酸性條件下將蔗糖水解生成葡萄糖和果糖，果糖進(jìn)一步與間苯二酚反應(yīng)，生成有色物質(zhì)，在480nm下有特征吸收峰。
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100ml×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體10mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體3ml×1瓶，4℃保存；
試劑三：液體 40ml×1瓶，4℃保存；
試劑四：液體 15ml×1瓶，4℃避光保存；
試劑五：粉劑0.5g×1瓶，常溫保存。
蔗糖提?。?/span>
稱取0.1~0.2g樣本，常溫研碎，加入1mL提取液，適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到離心管中，置于80℃水浴鍋中10min，振蕩3~5次，冷卻后，4000g，25℃離心10min，取上清，加入2mg試劑五，80℃脫色30min，再加入1mL提取液，4000g，25℃離心10min，取上清液測(cè)定。
測(cè)定操作表（在1.5mL EP管中依次加入下列試劑）：
試劑（μL） | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測(cè)定管 |
樣本 |
|
| 100 |
試劑一 |
| 100 |
|
蒸餾水 | 100 |
|
|
試劑二 | 50 | 50 | 50 |
混勻，沸水浴煮沸5min左右（蓋緊，防止水分散失）
混勻，沸水浴30min，冷卻后480nm處蒸餾水調(diào)零，空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管分別記為A1、A2和A3。
蔗糖（sucrose）含量試劑盒蔗糖含量計(jì)算：
1、按照蛋白質(zhì)含量計(jì)算
蔗糖含量(mg/mg prot)=(C標(biāo)準(zhǔn)管×V1×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷（V1×Cpr）= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr
此法需要自行測(cè)定蛋白濃度。
2、按照樣品質(zhì)量計(jì)算
蔗糖含量(mg/g鮮重)=(C標(biāo)準(zhǔn)×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=2×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W。
C標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，1mg/mL；V1：加入樣本體積，0.1mL；V2：加入提取液體積，2mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。
注意：最低檢測(cè)限為100ng/g鮮重或1ng/mg prot
關(guān)鍵字： 蔗糖（sucrose）含量試劑盒;蔗糖（sucrose）含量試劑盒;
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