反轉(zhuǎn)錄（Reverse Transcription）是以RNA為模板，在反轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下，合成RNA/DNA雜合雙鏈，然后水解雜合雙鏈中的RNA，得到互補的單鏈cDNA的過程。得到的cDNA單鏈可以作為擴增模板合成雙鏈DNA。cDNA的合成可以用與后續(xù)的PCR實驗、qPCR實驗、基因檢測、基因工程等各個領(lǐng)域。
其中反轉(zhuǎn)錄酶的選擇對后續(xù)實驗至關(guān)重要，經(jīng)過改造和優(yōu)化，推出了特別適合后續(xù)qPCR實驗的高精確度Q M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶。 Q M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶具有正常的依賴于RNA或DNA模板的DNA聚合酶活性，能夠以RNA或DNA為模板，在引物存在的情況下進行互補DNA鏈的合成，即可以進行cDNA的鏈合成。同時本反轉(zhuǎn)錄酶還保留了RNase H活性，能選擇性剪切RNA和DNA雜合雙鏈中的RNA，有利于后續(xù)cDNA第二鏈的合成。
采用本反轉(zhuǎn)錄酶，生產(chǎn)了 Q cDNA鏈合成試劑盒，試劑盒包含了進行cDNA鏈合成所需的各種試劑，使用簡單方便快捷。
產(chǎn)品特點：
檢測靈敏度高：和其它反轉(zhuǎn)錄酶相比，本產(chǎn)品的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物用于qPCR時，CT值通常能下降1-2左右，使用本產(chǎn)品能獲得更好的檢測靈敏度，可以使用更少的樣品；
擴增速度快：使用本產(chǎn)品時，僅需反轉(zhuǎn)錄5-10分鐘，即可以用于后續(xù)的qPCR，可以大幅縮短實驗時間。
反轉(zhuǎn)錄性能優(yōu)，擴增特異性強，反應(yīng)穩(wěn)定性好
產(chǎn)品用途：
1. 總RNA或mRNA后cDNA條鏈的合成，特別適合用于常規(guī)RNA樣品的反轉(zhuǎn)錄和qPCR檢測或一步法qRT-PCR檢測，也非常適合于內(nèi)源低豐度RNA、外源病毒RNA等微量RNA的反轉(zhuǎn)錄及后續(xù)的qPCR檢測；
2. 反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物也適合用于常規(guī)PCR、cDNA的第二鏈合成、cDNA文庫構(gòu)建、克??；
3. DNA探針的熒光、生物素、地高辛或同位素標記；
4. 通過引物延伸(primer extension)分析和研究RNA。
產(chǎn)品效果：
圖2.使用 Q cDNA鏈合成試劑盒對總RNA反轉(zhuǎn)錄后，對于不同長度的cDNA進行PCR擴增后的電泳效果圖。圖中可見本產(chǎn)品可以輕松完成長度為8 kb以下基因的反轉(zhuǎn)錄，反轉(zhuǎn)錄的長度可以達到12 kb。圖中的擴增效果僅供參考。
小編貼心為大家整理了不同反轉(zhuǎn)錄酶的特點，大家可根據(jù)實驗需求進行選擇哦~
產(chǎn)品編號反轉(zhuǎn)錄酶名稱擴增長度RNaseH活性高速反轉(zhuǎn)錄活性耐熱性cDNA克隆qPCR
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| M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶 | 13kb | 有 | 無，建議反轉(zhuǎn)錄60分鐘 | 有，耐受42℃-50℃ | ★★★★ | ★★ |
| M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-) | 13kb | 無 | 無，建議反轉(zhuǎn)錄60分鐘 | 有， 42-45℃，耐受55℃ | ★★★★ | ★★ |
| II M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-) | >10kb | 無 | 無，建議反轉(zhuǎn)錄60分鐘 | 有， 42-45℃，耐受50℃ | ★★★★ | ★★ |
| III M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-) | 12kb | 無 | 有，小于3kb建議反轉(zhuǎn)錄10分鐘 | 有， 42℃，耐受50-55℃ | ★★★★★ | ★★★ |
| Q M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶 | >3kb | 有 | 有，建議反轉(zhuǎn)錄5-10分鐘 | 無，42℃ | ★★ | ★★★★★ |
選擇指南：
1. 如果反轉(zhuǎn)錄后的用途是qPCR，先推薦選購Q M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶。對于待檢測的目的RNA的豐度比較高的時候，可以適當優(yōu)先考慮II M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)，通常僅需反轉(zhuǎn)錄10分鐘即可用于qPCR，也可以大幅縮短實驗時間。
2. 如果希望克隆一個目的基因，先推薦III M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)，該酶不僅能反轉(zhuǎn)錄長達12kb的RNA，并且具有快速反轉(zhuǎn)錄能力，小于3kb的目的基因僅需反轉(zhuǎn)錄10分鐘，可以大幅縮短實驗時間。用于克隆目的基因時，II M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)、M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶和 M-MuLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)也是比較好的選擇。
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