| 一、細(xì)胞基本屬性 |
| 細(xì)胞名稱 | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 |
| 細(xì)胞別稱 | NIH/3T3; NIH-3T3; NIH3T3; 3T3; 3T3NIH; 3T3-Swiss; Swiss-3T3; Swiss/3T3; Swiss 3T3; Swiss3T3 |
| 細(xì)胞貨號(hào) | SNL-025 |
| 細(xì)胞種屬 | 小鼠 |
| 生長(zhǎng)情況 | 貼壁 |
| 培養(yǎng)條件 | H-DMEM+10%FBS+1%雙抗 |
| 培養(yǎng)環(huán)境 | air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% |
| 二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 |
| 換液周期 | 2-3天 |
| 培養(yǎng)基體積 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 傳代比例 | 1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定） |
| 傳代方法 | 1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s，吸走潤(rùn)洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層；
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；
5.消化到細(xì)胞間隙變大，但未完全脫落時(shí)加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化；
6.混勻細(xì)胞，900rpm離心3-5min，棄上清；
7.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；
8.補(bǔ)足完全培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)； |
| 注意事項(xiàng) | 不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大，注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間
消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。 |
| 三、細(xì)胞凍存操作 |
| 凍存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦); |
| 凍存規(guī)格 | 200-300萬(wàn)/ml，1ml每管 |
| 凍存方法 | 1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞；
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管；
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存 |
| 注意事項(xiàng) | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案 |
Tips：
1.細(xì)胞貼壁較弱，消化時(shí)間偏短，注意控制消化時(shí)間；
2.注意控制細(xì)胞密度，過高或者過低都可能影響細(xì)胞狀態(tài)，不要長(zhǎng)時(shí)間高密度培養(yǎng)；
我們推薦使用尚恩生物NIH/3T3（小鼠胚胎成纖維細(xì)胞）專用完全培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號(hào)：SNLM-025）作為體外培養(yǎng)NIH/3T3（小鼠胚胎成纖維細(xì)胞）的培養(yǎng)基。
············ 武漢尚恩（Sunncell）18507182912 ············
1、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：500多株細(xì)胞，STR鑒定，發(fā)貨代數(shù)低，活性好，無支原體、細(xì)菌、霉菌等污染；
2、質(zhì)量保證：產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，10年以上細(xì)胞研發(fā)經(jīng)驗(yàn) 通過ISO認(rèn)證和CE認(rèn)證；
3、團(tuán)隊(duì)優(yōu)勢(shì)：海內(nèi)外博士、教授組成的研發(fā)和管理團(tuán)隊(duì)，具有十年的技術(shù)經(jīng)驗(yàn)，擁有成熟的分子生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、蛋白表達(dá)純化技術(shù)、抗體篩選及制備等多個(gè)生物學(xué)平臺(tái)；
4、技術(shù)支持：24小時(shí)技術(shù)在線答疑；
5、服務(wù)周到：廠家現(xiàn)貨直發(fā)，3個(gè)工作日順豐快遞，售后無憂，24小時(shí)快速響應(yīng)。
關(guān)鍵字： 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;小鼠胚胎成纖維細(xì)胞鑒定;小鼠胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng);小鼠胚胎成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨;小鼠胚胎成纖維細(xì)胞傳代;
武漢尚恩生物技術(shù)有限公司專注于細(xì)胞產(chǎn)品的研究、生產(chǎn)、銷售和服務(wù)。公司經(jīng)過國(guó)家相關(guān)部門認(rèn)證的“高新技術(shù)企業(yè)”，先后通過了ISO認(rèn)證和部分產(chǎn)品CE認(rèn)證。
我們擁有一套完整的研發(fā)、生產(chǎn)、質(zhì)檢、銷售和運(yùn)營(yíng)團(tuán)隊(duì)；已完成從細(xì)胞輔助器材、細(xì)胞產(chǎn)品到細(xì)胞相關(guān)專業(yè)化服務(wù)的全細(xì)胞產(chǎn)業(yè)鏈發(fā)展布局；具備制造細(xì)胞產(chǎn)品、相關(guān)試劑及代做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的系統(tǒng)化專業(yè)能力。
產(chǎn)品種類包含細(xì)胞系、原代細(xì)胞、胎牛血清、輔助試劑、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基、無血清培養(yǎng)基、無血清非程序凍存液等，細(xì)胞培養(yǎng)配套試劑一站式采購(gòu)；細(xì)胞庫(kù)儲(chǔ)存細(xì)胞品種有500余種，可滿足80%生物實(shí)驗(yàn)室的需求。
我們擁有豐富的市場(chǎng)管理經(jīng)驗(yàn)和渠道管理能力，為產(chǎn)品經(jīng)銷商及終端客戶提供完善的專業(yè)化服務(wù)。 把客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品作為企業(yè)的尊嚴(yán)和責(zé)任，通過不斷的技術(shù)創(chuàng)新，為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)。