| 一、細(xì)胞基本屬性 |
| 細(xì)胞名稱 | 人肝癌細(xì)胞 |
| 細(xì)胞別稱 | HepG2; HEP-G2; Hep G2; HEP G2; HepG2; HEPG2 |
| 細(xì)胞貨號(hào) | SNL-083 |
| 細(xì)胞種屬 | 人 |
| 生長(zhǎng)情況 | 貼壁 |
| 培養(yǎng)條件 | H-DMEM+10%FBS+1%雙抗 |
| 培養(yǎng)環(huán)境 | air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% |
| 二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 |
| 換液周期 | 2-3天 |
| 培養(yǎng)基體積 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 傳代比例 | 1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定） |
| 傳代方法 | 1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s，吸走潤(rùn)洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層；
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；
5.消化到細(xì)胞間隙變大，但未完全脫落時(shí)加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化；
6.混勻細(xì)胞，900rpm離心3-5min，棄上清；
7.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；
8.補(bǔ)足完全培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)； |
| 注意事項(xiàng) | 不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大，注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間
消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。 |
| 三、細(xì)胞凍存操作 |
| 凍存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦); |
| 凍存規(guī)格 | 200-300萬(wàn)/ml，1ml每管 |
| 凍存方法 | 1. 離心獲得細(xì)胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞；
2. 將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管；
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過(guò)夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒(méi)有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過(guò)夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存 |
| 注意事項(xiàng) | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案 |
Tips：
1.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)黑點(diǎn)可能會(huì)比較多，具體原因參見(jiàn)培養(yǎng)操作說(shuō)明2、3條；
2.細(xì)胞培養(yǎng)形態(tài)多變，與實(shí)際培養(yǎng)條件和操作相關(guān)，注意及時(shí)觀察；
我們推薦使用尚恩生物HepG2（人肝癌細(xì)胞）專用完全培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號(hào)：SNLM-083）作為體外培養(yǎng)HepG2（人肝癌細(xì)胞）的培養(yǎng)基。
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1、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：500多株細(xì)胞，STR鑒定，發(fā)貨代數(shù)低，活性好，無(wú)支原體、細(xì)菌、霉菌等污染；
2、質(zhì)量保證：產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，10年以上細(xì)胞研發(fā)經(jīng)驗(yàn) 通過(guò)ISO認(rèn)證和CE認(rèn)證；
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產(chǎn)品種類包含細(xì)胞系、原代細(xì)胞、胎牛血清、輔助試劑、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基、無(wú)血清培養(yǎng)基、無(wú)血清非程序凍存液等，細(xì)胞培養(yǎng)配套試劑一站式采購(gòu)；細(xì)胞庫(kù)儲(chǔ)存細(xì)胞品種有500余種，可滿足80%生物實(shí)驗(yàn)室的需求。
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