"EAC-E2G8:小鼠腹水瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

RLE-6TN細胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞

CFSC-2G細胞類似產(chǎn)品：：H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞

H-1651細胞類似產(chǎn)品：：A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞

Ect1/E6E7細胞類似產(chǎn)品：：NIH-3T3-L1細胞、H-676B細胞、End1/E6E7細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：腹水瘤

EAC-E2G8:小鼠腹水瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

H-661細胞類似產(chǎn)品：：PCI-4M細胞、MKN7細胞、HCC1359細胞

NCI-H920細胞類似產(chǎn)品：：HLEC-B3細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、CORL279細胞

OK-WT細胞類似產(chǎn)品：：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞

細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次ZuiHAO只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握HAO細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性HAO，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應立即采取措施，一般應棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的點，要做HAO建系的維持必須記錄HAO細胞檔案,換液傳代和做HAO細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

EAC-E2G8:小鼠腹水瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：半貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

WM-266-4細胞類似產(chǎn)品：：CCD-966SK細胞、T-HSC細胞、MCF-7/ADR-RES細胞

RKO-AS45-1細胞類似產(chǎn)品：：HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞

HT115細胞類似產(chǎn)品：：OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞

High5細胞類似產(chǎn)品：：C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞

HCC1171細胞類似產(chǎn)品：：Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞類似產(chǎn)品：：AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞

MODE-K細胞類似產(chǎn)品：：RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞

Sc-1細胞類似產(chǎn)品：：RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞

A375mel細胞類似產(chǎn)品：：SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞

HUV-EC-C細胞類似產(chǎn)品：：B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞

OCI-Ly 7細胞類似產(chǎn)品：：H220細胞、253J-BV細胞、Tsup-1細胞

HLF細胞類似產(chǎn)品：：HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞

KGN細胞類似產(chǎn)品：：SO-RB50細胞、HS688AT細胞、SKCO1細胞

Toledo細胞類似產(chǎn)品：：G-361細胞、H-295細胞、KP4細胞

KOSC-2細胞類似產(chǎn)品：：OAW42細胞、Mel-MeWo細胞、T-ALL-1細胞

FLS細胞類似產(chǎn)品：：Hs68細胞、PC10細胞、SNU484細胞

D-341Med細胞類似產(chǎn)品：：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞

PANC 813細胞類似產(chǎn)品：：HCT GEO細胞、MESSADX5細胞、PM6細胞

F-36P細胞類似產(chǎn)品：：Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞

ANA-1細胞類似產(chǎn)品：：RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞

CL40細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞

HOP-92細胞類似產(chǎn)品：：L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞

Be-Wo細胞類似產(chǎn)品：：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞

CCD18Co細胞類似產(chǎn)品：：HLE B-3細胞、NCI-H1385細胞、HBL 100細胞

EAC-E2G8:小鼠腹水瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

HTori:3細胞類似產(chǎn)品：：KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞

DHL5細胞類似產(chǎn)品：：B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞

NCIH510細胞類似產(chǎn)品：：N-9細胞、HCT GEO細胞、SNU-886細胞

LN229細胞類似產(chǎn)品：：Hs 870.T細胞、H647ell細胞、Swiss3T3細胞

T2(174 x CEM.T2)細胞類似產(chǎn)品：：PANC.1細胞、H295R細胞、CNE2Z細胞

SK-ML2細胞類似產(chǎn)品：：COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞

LS1034細胞類似產(chǎn)品：：NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞

EMT-6細胞類似產(chǎn)品：：CTLL2細胞、MCM細胞、GA-10細胞

Tca-8113細胞類似產(chǎn)品：：KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞

NCI-UMC-11細胞類似產(chǎn)品：：WM-115細胞、H1623細胞、NK-92 MI細胞

KATO 3細胞類似產(chǎn)品：：WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞

TGW-nu細胞類似產(chǎn)品：：SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞

H-847細胞類似產(chǎn)品：：Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞

ASH-3細胞類似產(chǎn)品：：H-1703細胞、SW756細胞、NCI-H2342細胞

Hep-G2細胞類似產(chǎn)品：：Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞

A-375細胞類似產(chǎn)品：：H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞

U 266細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞

PL11細胞類似產(chǎn)品：：BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞

PLB985細胞類似產(chǎn)品：：Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞

Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2107細胞、NCI-H1581細胞、NFS-60細胞

Lec1細胞類似產(chǎn)品：：ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞

NG 108-15細胞類似產(chǎn)品：：GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞

NCIADR.RES細胞類似產(chǎn)品：：SUNE 1細胞、SU-DHL-5細胞、3LL細胞

CEM-0細胞類似產(chǎn)品：：33604細胞、NCIH1341細胞、NB1-RGB細胞

IAR20細胞類似產(chǎn)品：：SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞

KATOIII細胞類似產(chǎn)品：：NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞

OCI-AML3細胞類似產(chǎn)品：：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞

NIH:OVCAR4細胞類似產(chǎn)品：：Ly8細胞、CHL-1細胞、DK-MG細胞

H-1882細胞類似產(chǎn)品：：IPECJ2細胞、K7M2細胞、MIA PaCa-2細胞

H1623細胞類似產(chǎn)品：：OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞

AC29細胞類似產(chǎn)品：：HEC-1-B細胞、H8細胞、GM3190細胞

LLC-PK1細胞類似產(chǎn)品：：TR146細胞、RBE4細胞、A549/ATCC細胞

RS4-11細胞類似產(chǎn)品：：H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞

RAW2647細胞類似產(chǎn)品：：P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞

P31/Fujioka細胞類似產(chǎn)品：：B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞

NCIH250細胞類似產(chǎn)品：：NCIH322細胞、NCIH2009細胞、MDA-MB-175VII細胞

BC-028細胞類似產(chǎn)品：：FHC細胞、NALM-6細胞、CL-34細胞

HT-115細胞類似產(chǎn)品：：32D.3細胞、A-375SM細胞、NCI-H1355細胞

P30/Ohkubo細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞

Jurkat77細胞類似產(chǎn)品：：HCEC細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞、H766T細胞

HCE-2 [50.B1]細胞類似產(chǎn)品：：G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞

LTEP-a2細胞類似產(chǎn)品：：S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞

NTERA-2 clone D1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞

WSU-DLCL(2)細胞類似產(chǎn)品：：MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞

MNNG/HOS Clone F-5細胞類似產(chǎn)品：：SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞

Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞類似產(chǎn)品：：H128細胞、HASMC細胞、NCI-H1299細胞

ACT-1細胞類似產(chǎn)品：：LC-2-Ad細胞、SW1990細胞、H1688細胞

CCRF細胞類似產(chǎn)品：：EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞

H1693細胞類似產(chǎn)品：：PC-14細胞、QGY7703細胞、NE1-E6E7細胞

IPAM-WT細胞類似產(chǎn)品：：Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞

FL62891細胞類似產(chǎn)品：：PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞

P3/NS1/Ag4-1細胞類似產(chǎn)品：：2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞

Huh-7.5.1細胞類似產(chǎn)品：：L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞

MES23.5細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞

HO-8910細胞類似產(chǎn)品：：H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞

PJ34細胞類似產(chǎn)品：：P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞

C33-A細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞

DMS 79細胞類似產(chǎn)品：：SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞

OCM1A細胞類似產(chǎn)品：：686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞

SW948細胞類似產(chǎn)品：：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞

HCC-2108細胞類似產(chǎn)品：：Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞

CCD18Co細胞類似產(chǎn)品：：HLE B-3細胞、NCI-H1385細胞、HBL 100細胞

MDA 1386細胞類似產(chǎn)品：：LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞

CAL 39細胞類似產(chǎn)品：：MM1S細胞、NCI-H1522細胞、MMAc.SF細胞

HCASMC細胞類似產(chǎn)品：：NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞

CV-1 in Origin Simian-1細胞類似產(chǎn)品：：H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞

A-2780細胞類似產(chǎn)品：：H9c2細胞、SCL-2細胞、BALL1細胞

KYSE 520細胞類似產(chǎn)品：：H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞

CAMA1細胞類似產(chǎn)品：：HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞

DHL-2細胞類似產(chǎn)品：：Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞

SW900細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞

HUC細胞類似產(chǎn)品：：FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞

LU-65M細胞類似產(chǎn)品：：OE19細胞、LL/2細胞、NCIH1436細胞

H-1770細胞類似產(chǎn)品：：RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞

Centre Antoine Lacassagne-33細胞類似產(chǎn)品：：Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞

NCI-H87細胞類似產(chǎn)品：：7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞

MCF12A細胞類似產(chǎn)品：：EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞

MEG01細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞

HCE-2 [50.B1]細胞類似產(chǎn)品：：G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞

SNU-407細胞類似產(chǎn)品：：HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞

ME 180細胞類似產(chǎn)品：：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞

EFM192B細胞類似產(chǎn)品：：COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞

EAC-E2G8:小鼠腹水瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

COLO 679細胞類似產(chǎn)品：：CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞

Toledo細胞類似產(chǎn)品：：G-361細胞、H-295細胞、KP4細胞

BALB/3T3 (clone A31)細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR5細胞、MUTZ3細胞、BNL CL2細胞

Mv 1 Lu (NBL-7)細胞類似產(chǎn)品：：BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞

MC26細胞類似產(chǎn)品：：Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞類似產(chǎn)品：：HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞

"