"LTEP-sm:人小細(xì)胞肺癌復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
細(xì)胞生長:貼壁
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較HAO生長,生長狀態(tài)也比較HAO。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長的比較HAO,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較HAO。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不HAO的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不HAO,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺(tái),底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長得HAO的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
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NCI-H1341細(xì)胞類似產(chǎn)品::SNU-407細(xì)胞、Case 3細(xì)胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞
253J細(xì)胞類似產(chǎn)品::GM3569細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、RT4P細(xì)胞
[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞背景資料:小細(xì)胞肺癌;男性
LTEP-sm:人小細(xì)胞肺癌復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
NCI-H929細(xì)胞類似產(chǎn)品::S3-HeLa細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞
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C3H10T1/2CL8細(xì)胞類似產(chǎn)品::SKNFI細(xì)胞、TE-15細(xì)胞、H-2073細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn):無菌意識(shí)要強(qiáng):實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺(tái)以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置,其它個(gè)人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻(xiàn)可能對(duì)相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞,有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴模@種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時(shí),我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升GAO到56℃后計(jì)時(shí),一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多,且會(huì)影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對(duì)細(xì)胞的影響。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫
LTEP-sm:人小細(xì)胞肺癌復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
細(xì)胞生長特性:貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)中常用設(shè)施及設(shè)備:實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì):細(xì)胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù),要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室和設(shè)計(jì)原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)計(jì)原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動(dòng)的內(nèi)側(cè),常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室。常用設(shè)施及設(shè)備:1)超凈工作臺(tái):也稱凈化工作臺(tái),分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間:一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺(tái)及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機(jī)、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間:普通培養(yǎng)箱、離心機(jī)、水浴鍋、定時(shí)鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間:烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室:顯微鏡、計(jì)算機(jī)及打印機(jī)等。
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PC 12細(xì)胞類似產(chǎn)品::RPMI-2650細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞
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SHEE細(xì)胞類似產(chǎn)品::COLO320/DM細(xì)胞、SBC5細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞
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HCE細(xì)胞類似產(chǎn)品::HEC-1-A細(xì)胞、SMA560細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞
SW1271細(xì)胞類似產(chǎn)品::BT325細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞
HCC-1588細(xì)胞類似產(chǎn)品::H-2087細(xì)胞、ARH77細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞
NR8383細(xì)胞類似產(chǎn)品::HAPI細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞、HEK293細(xì)胞
KPNRTBM1細(xì)胞類似產(chǎn)品::32D clone3細(xì)胞、H 9細(xì)胞、CP-70細(xì)胞
Panc 2.03細(xì)胞類似產(chǎn)品::CC-LP-1細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞
Panc_05_04細(xì)胞類似產(chǎn)品::JIMT1細(xì)胞、H2172細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞
SKMEL-1細(xì)胞類似產(chǎn)品::Walker256細(xì)胞、ST 486細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞
H-2081細(xì)胞類似產(chǎn)品::PK 15細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞
HMEC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品::LICCF細(xì)胞、5637細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞
LS 174T細(xì)胞類似產(chǎn)品::HS 445T細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L 540細(xì)胞
Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞類似產(chǎn)品::STC-1細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞、H-1882細(xì)胞
H8細(xì)胞類似產(chǎn)品::SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞
HLEB3細(xì)胞類似產(chǎn)品::McA-RH 7777細(xì)胞、2780CP細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞
HT 1376.T細(xì)胞類似產(chǎn)品::U138細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞
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TE-11細(xì)胞類似產(chǎn)品::HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞
SMA-560細(xì)胞類似產(chǎn)品::MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、801-D細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞
HOPC細(xì)胞類似產(chǎn)品::UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞
SKLU1細(xì)胞類似產(chǎn)品::BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、H2085細(xì)胞、CNE2細(xì)胞
OCIAML4細(xì)胞類似產(chǎn)品::NG10815細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞
RIN14B細(xì)胞類似產(chǎn)品::CFSC-8B細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞
SHEP1細(xì)胞類似產(chǎn)品::SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞
NCIH2106細(xì)胞類似產(chǎn)品::GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞類似產(chǎn)品::JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞類似產(chǎn)品::NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
CHO-Lec1細(xì)胞類似產(chǎn)品::H1963細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞
NS1細(xì)胞類似產(chǎn)品::H-889細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞、AN3細(xì)胞
MCF12A細(xì)胞類似產(chǎn)品::EST50細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞、GC-2細(xì)胞
MEG01細(xì)胞類似產(chǎn)品::OVCAR4細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞
CCC-HSF-1細(xì)胞類似產(chǎn)品::McArdle RH-7777細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞、2780細(xì)胞
RMG1細(xì)胞類似產(chǎn)品::MFE-280細(xì)胞、NCI-H2110細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞
CAKI 2細(xì)胞類似產(chǎn)品::RPMI-6666細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞
NCI-HUT-520細(xì)胞類似產(chǎn)品::P3J HR-1細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞、MF2059細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞類似產(chǎn)品::Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
LTEP-sm:人小細(xì)胞肺癌復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
NCIH1688細(xì)胞類似產(chǎn)品::NCI-H23細(xì)胞、AGS細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞
REC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品::NCI-H-82細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞
SNU-5細(xì)胞類似產(chǎn)品::SKLU01細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞
U138細(xì)胞類似產(chǎn)品::EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞
ECV細(xì)胞類似產(chǎn)品::S91細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞、H1954細(xì)胞
Mel-624細(xì)胞類似產(chǎn)品::CCK81細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞
"
關(guān)鍵字: LTEP-sm:人小細(xì)胞肺癌復(fù)蘇細(xì)胞(提;
上海冠導(dǎo)生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內(nèi)外細(xì)胞庫引進(jìn)細(xì)胞2000余株。以此為契機(jī),公司組建了冠導(dǎo)細(xì)胞庫,我司細(xì)胞均由資深細(xì)胞培養(yǎng)工程師進(jìn)行培養(yǎng)。我司可以提供的細(xì)胞有:①細(xì)胞系②原代細(xì)胞③穩(wěn)轉(zhuǎn)株④耐藥株⑤標(biāo)記細(xì)胞⑥細(xì)胞配套試劑等。