"RCS:大鼠軟骨肉瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

貼壁細胞傳代實驗準備事項：將15mL離心管、T25細胞培養(yǎng)瓶、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA從4℃冰箱中取出后，復溫至室溫，備用。貼壁細胞傳代實驗步驟：將準備HAO的培養(yǎng)基等物品用酒精消毒后放入安全柜中；從培養(yǎng)箱中取出待處理的細胞，在顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)；用酒精消毒培養(yǎng)瓶，放入安全柜中；輕輕吸去細胞上清；加入2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次，吸去上清；加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA)，輕輕晃勻、覆蓋所有細胞后，置于37℃培養(yǎng)箱靜置消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；按比例將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中；在顯微鏡下觀察傳代后的細胞密度及狀態(tài)；將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項：培養(yǎng)過程中需維持細胞處于對數(shù)生長期，80%左右即可傳代，傳代比例請參照說明書建議；消化時間不宜過長，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，難消化的細胞可分次消化，每次時間不超過5min；培養(yǎng)過程中需要定期換液，一般細胞建議2~3天換液一次。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Mono Mac 6細胞類似產(chǎn)品：：CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞

HT 1376細胞類似產(chǎn)品：：PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞

GM03570E細胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-2細胞、WM-239A細胞、Lu-165細胞

MGC803細胞類似產(chǎn)品：：A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：軟骨肉瘤；SD

RCS:大鼠軟骨肉瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

NCI-H82細胞類似產(chǎn)品：：VSC4.1細胞、PT67細胞、H2108細胞

HCT 8細胞類似產(chǎn)品：：KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞

RPMI6666細胞類似產(chǎn)品：：CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化HAO的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

RCS:大鼠軟骨肉瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

KYSE450細胞類似產(chǎn)品：：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞

CEM-C7細胞類似產(chǎn)品：：CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞

EoL-1細胞類似產(chǎn)品：：MEG-01細胞、U-138-MG細胞、C-Li-7細胞

210RCY3-Ag1.2.3細胞類似產(chǎn)品：：C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞

Calu-6細胞類似產(chǎn)品：：GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞

NCIH661細胞類似產(chǎn)品：：YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞

CO115細胞類似產(chǎn)品：：SK.MEL.5細胞、PECAPJ34細胞、MADB-106細胞

SupB15W細胞類似產(chǎn)品：：SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞

Renal Carcinoma細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP subline C4-2細胞、H9c2細胞、Hs 888.T細胞

NCIH1838細胞類似產(chǎn)品：：High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞

MDCK-II細胞類似產(chǎn)品：：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞

V79-1細胞類似產(chǎn)品：：MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞

U-87MG ATCC細胞類似產(chǎn)品：：BJ [Human fibroblast]細胞、SW 1222細胞、HT-1376細胞

WM115細胞類似產(chǎn)品：：NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞

CMT93細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-2細胞、HCS2/8細胞、SK.OV.3細胞

Hs 683細胞類似產(chǎn)品：：RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞

Hs 683細胞類似產(chǎn)品：：RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞

DAN-G細胞類似產(chǎn)品：：aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞

HOEC細胞類似產(chǎn)品：：HT(H9)細胞、GDM1細胞、EA. hy 926細胞

SNT-8細胞類似產(chǎn)品：：Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞

YH-13細胞類似產(chǎn)品：：HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞

FHs 74 Int細胞類似產(chǎn)品：：KPL1細胞、H-510細胞、HEC-251細胞

Hs821T細胞類似產(chǎn)品：：ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞

Monomac-1細胞類似產(chǎn)品：：H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞

RCS:大鼠軟骨肉瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Co320細胞類似產(chǎn)品：：HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞

B6Tert-1細胞類似產(chǎn)品：：CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞

MV(4;11)細胞類似產(chǎn)品：：PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞

GM03573細胞類似產(chǎn)品：：L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞

H1623細胞類似產(chǎn)品：：OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞

U2-OS細胞類似產(chǎn)品：：bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞

KP-2細胞類似產(chǎn)品：：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞

kms 11細胞類似產(chǎn)品：：Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞

LLC-PK(1)細胞類似產(chǎn)品：：Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞

PT-K75細胞類似產(chǎn)品：：KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞

OsA-CL細胞類似產(chǎn)品：：TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞

Caco-2BBe細胞類似產(chǎn)品：：SW 954細胞、SCC-9細胞、NCI-H2141細胞

CMT 93細胞類似產(chǎn)品：：FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞

CWR22-R1細胞類似產(chǎn)品：：Bat lung細胞、MCF-7B細胞、LS-411細胞

CL1.0細胞類似產(chǎn)品：：COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞

HPAF-II細胞類似產(chǎn)品：：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞

P3HR-1細胞類似產(chǎn)品：：CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞

HCC1937細胞類似產(chǎn)品：：JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞

SCC4細胞類似產(chǎn)品：：COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞

SKNBE2C細胞類似產(chǎn)品：：C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞

JC細胞類似產(chǎn)品：：NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞

SW.620細胞類似產(chǎn)品：：GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞

SNU-5細胞類似產(chǎn)品：：SKLU01細胞、HCT_116細胞、KYSE-50細胞

Centre Antoine Lacassagne-62細胞類似產(chǎn)品：：MESSA細胞、IHC-ST1細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞

KBM5細胞類似產(chǎn)品：：KMM-1細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、NW38細胞

N1S1細胞類似產(chǎn)品：：NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞

CNE2細胞類似產(chǎn)品：：WEHI 3細胞、HuPT3細胞、ECV細胞

NCTC-3960細胞類似產(chǎn)品：：JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞

RAW2647細胞類似產(chǎn)品：：P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞

MDA-1386細胞類似產(chǎn)品：：786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞

HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞類似產(chǎn)品：：QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞

ATDC5細胞類似產(chǎn)品：：L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞

JVM3細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞

SNU-354細胞類似產(chǎn)品：：SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞

Walker-256-TC細胞類似產(chǎn)品：：CWR22R細胞、EFM192細胞、MV(4;11)細胞

CATH.a細胞類似產(chǎn)品：：ECC 12細胞、H-2330細胞、Mo7e細胞

OVCAR10細胞類似產(chǎn)品：：U 937細胞、DAKIKI Clone 1細胞、AML193細胞

EoL-1細胞類似產(chǎn)品：：MEG-01細胞、HLEC-B3細胞、ROS17/2.8細胞

Hs 636 T細胞類似產(chǎn)品：：SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞

AgC11x3A細胞類似產(chǎn)品：：Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞

MDA-MB-361細胞類似產(chǎn)品：：LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞

P388-D1細胞類似產(chǎn)品：：SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞類似產(chǎn)品：：AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞

32D clone 3細胞類似產(chǎn)品：：A875細胞、MDA231-LM2細胞、N-9細胞

Hs294T細胞類似產(chǎn)品：：MDAPCa-2b細胞、DanG細胞、J-82細胞

NCI-H1819細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞

OCI-Ly19細胞類似產(chǎn)品：：T84細胞、K-1735細胞、TNC-1B12B4細胞

WC00079細胞類似產(chǎn)品：：A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞

Panc 03.27細胞類似產(chǎn)品：：Scott細胞、PANC-04-03細胞、MAVER1細胞

KYSE-510細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞

LL2細胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞

EB1細胞類似產(chǎn)品：：Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞

HFSF細胞類似產(chǎn)品：：526-mel細胞、C4-I細胞、TE15細胞

P3-X63Ag8細胞類似產(chǎn)品：：HCC 2185細胞、Reuber H35細胞、H460細胞

H1573細胞類似產(chǎn)品：：HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞

KP-4細胞類似產(chǎn)品：：ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞

HT 115細胞類似產(chǎn)品：：SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞

MES-13細胞類似產(chǎn)品：：OSK-1細胞、CTLL(2)細胞、Calu3細胞

C518細胞類似產(chǎn)品：：MES-SA/Dx-5細胞、SV40 MES 13細胞、HLE-SRA-01/04細胞

mRMEC細胞類似產(chǎn)品：：A375mel細胞、SCL-II細胞、SK-GT-2細胞

NT2D1細胞類似產(chǎn)品：：GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞

BAC1.2F5細胞類似產(chǎn)品：：LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞

ssMCF7細胞類似產(chǎn)品：：Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞

L-M[TK-]細胞類似產(chǎn)品：：FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞

U-343 MG細胞類似產(chǎn)品：：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞

HONE-1細胞類似產(chǎn)品：：PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞

QGP-1細胞類似產(chǎn)品：：BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞

3T3L1細胞類似產(chǎn)品：：CATHa細胞、RKOAS451細胞、HCC-2185細胞

Hs-578T細胞類似產(chǎn)品：：MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞

Hs 695T細胞類似產(chǎn)品：：P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞

Hs 636.T細胞類似產(chǎn)品：：EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞

A.704細胞類似產(chǎn)品：：HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞

GP2d細胞類似產(chǎn)品：：CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞

BMF細胞類似產(chǎn)品：：TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞

Astrocyte type I clone細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞

KY-270細胞類似產(chǎn)品：：B78細胞、H1688細胞、COV362細胞

BEAS2B細胞類似產(chǎn)品：：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞

Jijoye細胞類似產(chǎn)品：：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞

H-2066細胞類似產(chǎn)品：：OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞

Centre Antoine Lacassagne-27細胞類似產(chǎn)品：：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞

VSC4.1細胞類似產(chǎn)品：：UCH-1細胞、KE-37細胞、118 MG細胞

Tb 1-Lu細胞類似產(chǎn)品：：BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞

RCS:大鼠軟骨肉瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

OKAC1細胞類似產(chǎn)品：：P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞

HeLa S-3細胞類似產(chǎn)品：：HeLa 229細胞、RFL 6細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞

AN3-CA細胞類似產(chǎn)品：：UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞

ETCC007細胞類似產(chǎn)品：：VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞

aTC1-6細胞類似產(chǎn)品：：WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞

U-2OS細胞類似產(chǎn)品：：RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞

"