"SVG p12:人星形膠質(zhì)復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SEG1細胞類似產(chǎn)品：：NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞

CHL1細胞類似產(chǎn)品：：MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞

U251n細胞類似產(chǎn)品：：IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞

H524細胞類似產(chǎn)品：：MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：星形膠質(zhì)細胞；SV４０轉(zhuǎn)化；男性

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

BCaP 37細胞類似產(chǎn)品：：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞

GM04680細胞類似產(chǎn)品：：PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞

SUM159PT細胞類似產(chǎn)品：：DMS153細胞、KMH2細胞、BJA-B-1細胞

細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次ZuiHAO只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握HAO細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性HAO，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應立即采取措施，一般應棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的點，要做HAO建系的維持必須記錄HAO細胞檔案,換液傳代和做HAO細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

細胞培養(yǎng)中常用設施及設備：實驗室設計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設施及設備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。

DLM8細胞類似產(chǎn)品：：TFH細胞、U-343細胞、CC-LP-1細胞

SW1417細胞類似產(chǎn)品：：B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞

SKML-28細胞類似產(chǎn)品：：CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞

LMTK-細胞類似產(chǎn)品：：ECV細胞、MUM2B細胞、MOLM-13細胞

RPMI-8402細胞類似產(chǎn)品：：SuperTube細胞、ABE-8.1/2細胞、HDMEC細胞

Madison細胞類似產(chǎn)品：：RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞

Farage細胞類似產(chǎn)品：：NRK clone 52E細胞、NTera2/D1細胞、H-1522細胞

EFO 27細胞類似產(chǎn)品：：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞

28SC細胞類似產(chǎn)品：：CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞

NALM 6細胞類似產(chǎn)品：：MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞

BHK細胞類似產(chǎn)品：：TEC細胞、I90細胞、H2085細胞

Nittby-Salford 1細胞類似產(chǎn)品：：FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞

U-251細胞類似產(chǎn)品：：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞

RD-ES細胞類似產(chǎn)品：：BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞

801-D細胞類似產(chǎn)品：：IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞

T_T_細胞類似產(chǎn)品：：BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞

T_T_細胞類似產(chǎn)品：：BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞

OVCAR 5細胞類似產(chǎn)品：：Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞

ZR75-1細胞類似產(chǎn)品：：MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞

HO8910/PM細胞類似產(chǎn)品：：Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞

RPMI #8226細胞類似產(chǎn)品：：He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞

CORL279細胞類似產(chǎn)品：：MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞

SVG(P12)細胞類似產(chǎn)品：：BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞

LTEP a2細胞類似產(chǎn)品：：P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞

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NCIH1563細胞類似產(chǎn)品：：GM03570E細胞、COLO-738細胞、TOV112D細胞

C127細胞類似產(chǎn)品：：M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞

H-322細胞類似產(chǎn)品：：LOU-NH91細胞、NCI-H125細胞、KLM1細胞

AG06814-N細胞類似產(chǎn)品：：H-838細胞、SKNO1細胞、TE8細胞

Tu 177細胞類似產(chǎn)品：：KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞

BMSC/hBMSCs細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞

NCIH1770細胞類似產(chǎn)品：：J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞

CALU 1細胞類似產(chǎn)品：：GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞

COLO 320DM細胞類似產(chǎn)品：：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞

COV434細胞類似產(chǎn)品：：SRS-82細胞、NWA細胞、FL83B細胞

KOPN8細胞類似產(chǎn)品：：HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞

H-295細胞類似產(chǎn)品：：RDES-1細胞、LOU-NH91細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞

LAN-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞

OVCA-432細胞類似產(chǎn)品：：MRC-5細胞、NCI-H209細胞、SCC90細胞

MBMEC細胞類似產(chǎn)品：：CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞

H-929細胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞

BTT739細胞類似產(chǎn)品：：U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞

BT-20細胞類似產(chǎn)品：：Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞

MHCC-97細胞類似產(chǎn)品：：U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞

H.Ep.-2細胞類似產(chǎn)品：：SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞

Institute for Medical Research-32細胞類似產(chǎn)品：：MDA-415細胞、HCC1187細胞、COLO357細胞

SK-RC-42細胞類似產(chǎn)品：：LoMeT-ccRcc細胞、U87細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞

Colon-38細胞類似產(chǎn)品：：CEM/0細胞、786-0WT細胞、LTEP-s細胞

NCI-H358細胞類似產(chǎn)品：：OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞

HCT/Taxo1細胞類似產(chǎn)品：：NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞

SNU-119細胞類似產(chǎn)品：：HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞

CEF細胞類似產(chǎn)品：：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞

4T1-A細胞類似產(chǎn)品：：KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞

JC細胞類似產(chǎn)品：：NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞

B958細胞類似產(chǎn)品：：J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞

A549/DDP細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞

C28/I2細胞類似產(chǎn)品：：CHO/dhFr-細胞、Hos TE-85細胞、526 mel細胞

HG2855細胞類似產(chǎn)品：：P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞

WM-239細胞類似產(chǎn)品：：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞

Y 1細胞類似產(chǎn)品：：MESSA/Dx5細胞、U-251-MG細胞、P3J HR-1細胞

SAOS 2細胞類似產(chǎn)品：：EO771細胞、LWnt-3A細胞、HCC-95細胞

RDES細胞類似產(chǎn)品：：RC-4B/C細胞、HEK293F細胞、87 MG細胞

SK-ML2細胞類似產(chǎn)品：：COR L279細胞、CCRF-CEM C7細胞、NCI-H69C細胞

Spodoptera frugiperda clone 9細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞

PASMCS細胞類似產(chǎn)品：：138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞

HCT/Taxo1細胞類似產(chǎn)品：：NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞

NCIH2023細胞類似產(chǎn)品：：CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞

UPCI-SCC090細胞類似產(chǎn)品：：L M (TK-)細胞、Panc 1細胞、NCI.H460細胞

SUD4細胞類似產(chǎn)品：：HNTEC細胞、T HEECs細胞、Hs688(A)T細胞

PK 15細胞類似產(chǎn)品：：MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞

GOS3細胞類似產(chǎn)品：：NCIH660細胞、H-28細胞、LAN-1細胞

TGW-I-nu細胞類似產(chǎn)品：：NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞

Sarcoma OSteogenic-2細胞類似產(chǎn)品：：8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞

EOMA細胞類似產(chǎn)品：：P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞

TK 10細胞類似產(chǎn)品：：MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞

HCT8細胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞

CL 1-5細胞類似產(chǎn)品：：PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞

CEM-T4細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞

LO2細胞類似產(chǎn)品：：IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞類似產(chǎn)品：：AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞

ETCC007細胞類似產(chǎn)品：：VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞

KP-N-RT-BM-1細胞類似產(chǎn)品：：OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞

C3H10T1/2 clone8細胞類似產(chǎn)品：：COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞

NHDF細胞類似產(chǎn)品：：CAL 33細胞、UCLA-SO-M21細胞、D341 Med細胞

NCI-H2141細胞類似產(chǎn)品：：KTA-7細胞、Ca9-22細胞、BIC-1細胞

TOV-21G細胞類似產(chǎn)品：：H22-H8D8細胞、H865細胞、SNU-251細胞

LNCaP-ATCC細胞類似產(chǎn)品：：MLA 144細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞、P3HRI細胞

T-47-D細胞類似產(chǎn)品：：BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞

NCl-H157細胞類似產(chǎn)品：：BC-027細胞、HITT15細胞、MDA-134細胞

UCH1細胞類似產(chǎn)品：：HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞類似產(chǎn)品：：H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞

RT4細胞類似產(chǎn)品：：U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞

PE CA PJ34細胞類似產(chǎn)品：：H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞

BNL 1MEA.7R.1細胞類似產(chǎn)品：：CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞

NCI-H2052細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞

SHG44細胞類似產(chǎn)品：：HEK293S細胞、SGC-7901/DDP細胞、T24(ECV304)細胞

Hut292細胞類似產(chǎn)品：：H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞

MC3T3-E1 Subclone 14細胞類似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞

CCRF SB細胞類似產(chǎn)品：：H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞

Th17細胞類似產(chǎn)品：：MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞

LM-TK-細胞類似產(chǎn)品：：RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞

HCC-1187細胞類似產(chǎn)品：：High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞

BT.549細胞類似產(chǎn)品：：H1755細胞、KU19-19細胞、DV90細胞

SNU638細胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞

LS 180細胞類似產(chǎn)品：：HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞

H2052細胞類似產(chǎn)品：：K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞

IOSE29細胞類似產(chǎn)品：：C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞

SVG p12:人星形膠質(zhì)復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

BNL-HCC細胞類似產(chǎn)品：：Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞

HCE細胞類似產(chǎn)品：：HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞

SVG(P12)細胞類似產(chǎn)品：：BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞

Hs 695.T細胞類似產(chǎn)品：：HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞

Colo699細胞類似產(chǎn)品：：H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞

CaSki細胞類似產(chǎn)品：：HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞

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