"SSP-25:人肝膽管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

有一些細胞是數(shù)量多一點比較HAO生長，生長狀態(tài)也比較HAO。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較HAO，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較HAO。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不HAO的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不HAO，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得HAO的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Human Foreskin Fibroblast細胞類似產(chǎn)品：：STC-1細胞、LoMeT-ccRcc細胞、H-1882細胞

H-1694細胞類似產(chǎn)品：：HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞

H23細胞類似產(chǎn)品：：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞

Be-Wo細胞類似產(chǎn)品：：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：肝內(nèi)膽管癌；女性

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

SK-N-BE-2c細胞類似產(chǎn)品：：H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞

MCF7-GFP細胞類似產(chǎn)品：：P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞

HME1細胞類似產(chǎn)品：：MC 116細胞、LNCaP clone FGC細胞、NCIH1666細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴模@種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復(fù)吹打。

H-1930細胞類似產(chǎn)品：：PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞

PANC403細胞類似產(chǎn)品：：MFM223細胞、Hs294T細胞、H-929細胞

LWnt-3A細胞類似產(chǎn)品：：A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞

U-118 MG細胞類似產(chǎn)品：：DH82細胞、NTHY-ORI3.1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞

DoHH2細胞類似產(chǎn)品：：VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞

SN12CPM6細胞類似產(chǎn)品：：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞

NTERA2細胞類似產(chǎn)品：：NBL-4細胞、NK-92 MI細胞、SW 1353細胞

Pa017C細胞類似產(chǎn)品：：PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞

NuTu 19細胞類似產(chǎn)品：：RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞

VM-CUB-1細胞類似產(chǎn)品：：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞

COLO 684細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-620細胞、AtT-20細胞、SKMEL2細胞

A375-SM細胞類似產(chǎn)品：：RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞

Fortner's melanotic melanoma #3細胞類似產(chǎn)品：：C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞

CHG-5細胞類似產(chǎn)品：：SW1573細胞、A375.S2細胞、CL 1-5細胞

MT-3 [Human leukocytes]細胞類似產(chǎn)品：：PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞

LS-411細胞類似產(chǎn)品：：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞

LS-411細胞類似產(chǎn)品：：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞

SUM-190PT細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-F1細胞、Calu-1細胞、CWR22-R1細胞

G519細胞類似產(chǎn)品：：NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞

UPCI-SCC-90細胞類似產(chǎn)品：：OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞

M-NFS-60細胞類似產(chǎn)品：：ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞

C3H/10T1/2細胞類似產(chǎn)品：：JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞

K1細胞類似產(chǎn)品：：McCoy B細胞、PLA-802細胞、PNEC30細胞

Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞類似產(chǎn)品：：THP 1細胞、IGR-OV1細胞、BHK-21細胞

SSP-25:人肝膽管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

HPAF II細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞

NCI-SNU-668細胞類似產(chǎn)品：：B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞

NIH-3T3-L1細胞類似產(chǎn)品：：Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞

NB-19細胞類似產(chǎn)品：：HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞

Vero C1008細胞類似產(chǎn)品：：COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞

ACHN細胞類似產(chǎn)品：：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞

SW-756細胞類似產(chǎn)品：：CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞

G 401細胞類似產(chǎn)品：：PC-9細胞、HO8910細胞、HEB細胞

HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞類似產(chǎn)品：：QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞

HOC1細胞類似產(chǎn)品：：LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞

W256細胞類似產(chǎn)品：：HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞

Panc-02細胞類似產(chǎn)品：：UM-UC3細胞、LC-2 ad細胞、MARC-145細胞

PL 5細胞類似產(chǎn)品：：U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞

KPL-1細胞類似產(chǎn)品：：GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞

HEH2細胞類似產(chǎn)品：：Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞

Hs 606細胞類似產(chǎn)品：：L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞

1.1B4細胞類似產(chǎn)品：：LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞

CCD-841CoN細胞類似產(chǎn)品：：HPF細胞、Tsup-1細胞、hTERT-RPE細胞

HUCCT1細胞類似產(chǎn)品：：Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞

NuTu 19細胞類似產(chǎn)品：：RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞

MDA 435細胞類似產(chǎn)品：：SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞

SW1990細胞類似產(chǎn)品：：SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞

High-5細胞類似產(chǎn)品：：NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞

Mel624細胞類似產(chǎn)品：：NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞

HT-1080細胞類似產(chǎn)品：：AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞

CCC-HSF-1細胞類似產(chǎn)品：：McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞

MOLP-8細胞類似產(chǎn)品：：Hs 742.T細胞、HSC-4細胞、SNU475細胞

DMS273細胞類似產(chǎn)品：：CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞

SK Hep1細胞類似產(chǎn)品：：D-324MED細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞、CCD841CoTr細胞

FU-OV-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH526細胞、MDA-MB-231-GFP細胞、U-CH1細胞

H1437細胞類似產(chǎn)品：：C918細胞、THP1細胞、HGC27細胞

HS0578T細胞類似產(chǎn)品：：L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞

NCIH1417細胞類似產(chǎn)品：：SUP-T1細胞、E.L.4細胞、Panc 2.03細胞

BC-022細胞類似產(chǎn)品：：EL-4細胞、COLO 206F細胞、RPMI-7666細胞

CNE-2細胞類似產(chǎn)品：：HCT15細胞、RMC-1細胞、MDA-330細胞

675T細胞類似產(chǎn)品：：L-428細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞、LY細胞

MC3T3-E1(C4)細胞類似產(chǎn)品：：FHCRC subclone 11細胞、MRC 5細胞、NRK 49F細胞

LWnt-3A細胞類似產(chǎn)品：：A549 ATCC細胞、RGCs細胞、UWB1.289+BRCA1細胞

Scott and White No. 13細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞

H-1672細胞類似產(chǎn)品：：PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞

SGC996細胞類似產(chǎn)品：：HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞

T-47D細胞類似產(chǎn)品：：149 PT細胞、HT115細胞、BCaP-37細胞

Hs 729.T細胞類似產(chǎn)品：：H-820細胞、KYSE-50細胞、WM115mel細胞

OCI-LY-3細胞類似產(chǎn)品：：MEC-1細胞、SKml2細胞、HIT細胞

LC-1Sq細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞

CBRH7919細胞類似產(chǎn)品：：CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞

HK-2 [Human kidney]細胞類似產(chǎn)品：：University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞

L-5178-Y細胞類似產(chǎn)品：：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞

RT4-D6-P2T細胞類似產(chǎn)品：：CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞

MC3T3-E1 Subclone 14細胞類似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞

Hs-600-T細胞類似產(chǎn)品：：H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞

ETCC007細胞類似產(chǎn)品：：VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞

T HEECs細胞類似產(chǎn)品：：N1E-115細胞、NALM 6細胞、SHG-44細胞

HEK-293FT細胞類似產(chǎn)品：：B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞

SKRC20細胞類似產(chǎn)品：：C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞

67NR細胞類似產(chǎn)品：：Hs839T細胞、H2195細胞、LLCMK2細胞

huH 1細胞類似產(chǎn)品：：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞

MAVER細胞類似產(chǎn)品：：HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞

MAVER細胞類似產(chǎn)品：：HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞

VA-ES-BJ細胞類似產(chǎn)品：：SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞

EL4細胞類似產(chǎn)品：：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞

U-343MG細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞

COLO320HSR細胞類似產(chǎn)品：：H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞

ZYM-DIEC02細胞類似產(chǎn)品：：HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞

Line 870 Emory University-4細胞類似產(chǎn)品：：CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞

MMAc.SF細胞類似產(chǎn)品：：PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞

DMS 79細胞類似產(chǎn)品：：SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞

MOLT 4細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H676B細胞、NBLAN5T細胞、TMK-1細胞

SKNBE(2c)細胞類似產(chǎn)品：：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞

CALU1細胞類似產(chǎn)品：：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞

QGP 1細胞類似產(chǎn)品：：H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞

COLO 357細胞類似產(chǎn)品：：MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞

HT22細胞類似產(chǎn)品：：Ramos細胞、Kato-III細胞、MDA-MB453細胞

Eca109細胞類似產(chǎn)品：：H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞

WM 239A細胞類似產(chǎn)品：：WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞

SKNEP細胞類似產(chǎn)品：：U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞

IGROV細胞類似產(chǎn)品：：HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞

CAL-12T細胞類似產(chǎn)品：：BEL-7404細胞、RF/6A細胞、NCI-HUT-292細胞

1301細胞類似產(chǎn)品：：L cell line細胞、CoCL2細胞、PSN-1細胞

NCI-A549細胞類似產(chǎn)品：：M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞

CHO-Lec1細胞類似產(chǎn)品：：H1963細胞、H4-II-EC3細胞、A2780CP細胞

A.704細胞類似產(chǎn)品：：HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞

SSP-25:人肝膽管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Institute for Medical Research-32細胞類似產(chǎn)品：：MDA-415細胞、HCC1187細胞、COLO357細胞

HIEC細胞類似產(chǎn)品：：Hs 600.T細胞、DoHH-2細胞、CCRF.CEM細胞

Hs863T細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1836細胞、LC-1細胞、RDES-1細胞

OCI AML4細胞類似產(chǎn)品：：CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞

EVSA/T細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞

H1341細胞類似產(chǎn)品：：T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞

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