"HCEC-B4G12:人角膜內皮復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

A549/ATCC細胞類似產品：：DU-4475細胞、ReNcell CX細胞、CCD-841CoTr細胞

SUPB-15細胞類似產品：：CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞

University of Arizona Cell Culture-812細胞類似產品：：WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞

T-24細胞類似產品：：SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：角膜；內皮細胞；SV４０轉化；女性

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

HCC-1954細胞類似產品：：CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞

D-283細胞類似產品：：NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞

CAL12T細胞類似產品：：L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞

公司主營ATCC、DSMZ、RIKEN、ScienCell、INCELL、Promocell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外著名大學來源細胞系及原代細胞，全程提供細胞系背景、生長性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、系、疾病、組織、凍存條件、傳代方法等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術支持，讓您實驗再無煩擾！公司由在國外工作和學習多年的留學人員創(chuàng)辦，由國內中國科學院上海生物化學與細胞生物學研究所，復旦大學，同濟大學等多名工作在線的細胞培養(yǎng)專家，提供細胞培養(yǎng)技術支持。公司依靠自身一些的技術和理念，以世界YiLiu的技術支撐陣容，提供一系列細胞相關的技術服務。為中國的生命科學事業(yè)趕超歐美，提供了重要的基石；公司將依靠自主研究開發(fā)的GAO技術GAO質量和有絕對的價格競爭力的產品，立足國內，面向世界。力爭打破國外大公司在細胞培養(yǎng)科學領域接近壟斷的地位，為中國在生命科學的這一領域一席之地。公司籌劃未來三年內，在沈陽、濟南、北京、西安、寧夏、武漢、等國內代表城市建立細胞培養(yǎng)分實驗室，以便更HAO的服務國內廣大醫(yī)院、大學、制藥企業(yè)等，你們的每一份關心和支持，都是我們前進的動力！

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻，或者放入時搖勻，但在細胞貼壁前，又移動了培養(yǎng)瓶，頻繁開關培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少，培養(yǎng)箱擱板表面不平整，這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?，F象，大部分懸浮細胞在細胞密度很GAO的情況下，很可能會出現部分細胞抱團生長的現象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制HAO細胞密度。如果出現了細胞團，可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團，也可以嘗試一下方法：將細胞懸液收集到15ml離心管中，靜置20min左右，小心取上層細胞上清培養(yǎng)（該方法只能去除部分較大的細胞團）。部分細胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等），這個是正?，F象。如果只有少數細胞有內出現極少空泡，則很可能是細胞狀態(tài)不佳，可以通過調整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時間等方法來調整細胞狀態(tài)；如果大部分細胞出現空泡，且單個細胞內空泡數目偏多，則可能細胞代次較GAO，細胞老化所致，需更換代次較早的細胞。

H-650細胞類似產品：：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞

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DAKIKI Clone 1細胞類似產品：：A-431細胞、766T細胞、LLC-MK-2細胞

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PL12細胞類似產品：：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞

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NCI-H1373細胞類似產品：：HLMVEC細胞、Colon 38細胞、RIN Cl-5F細胞

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bEnd3細胞類似產品：：OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞

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Hs68細胞類似產品：：DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞

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NS-1細胞類似產品：：MADB 106細胞、MLOY4細胞、KYSE-140細胞

MT-2細胞類似產品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞

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