"KM12-SM:人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

C-28/I2細胞類似產(chǎn)品：：C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞

Jurkat細胞類似產(chǎn)品：：Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞

MAEC細胞類似產(chǎn)品：：NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞

SMMC 7721細胞類似產(chǎn)品：：EBNA293細胞、NCIH1792細胞、H2347細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：結(jié)腸癌

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

B95-8細胞類似產(chǎn)品：：TE 32.T細胞、CoC1細胞、118MG細胞

TMD8細胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞

DMS-153細胞類似產(chǎn)品：：H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞

細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在GAO處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準(zhǔn)確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，Zui后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。GAO壓消毒：包裝HAO的器皿裝入GAO壓鍋內(nèi)蓋HAO蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。GAO壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。

ME180細胞類似產(chǎn)品：：PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞

NCI-H220細胞類似產(chǎn)品：：HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞

293c18細胞類似產(chǎn)品：：NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞

COLO394細胞類似產(chǎn)品：：373 MG細胞、BE2-M17細胞、RGM1細胞

HCe-8693細胞類似產(chǎn)品：：MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞

McG-1細胞類似產(chǎn)品：：Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞

MC26細胞類似產(chǎn)品：：Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞

CNE2細胞類似產(chǎn)品：：WEHI 3細胞、HuPT3細胞、ECV細胞

NCTC-929細胞類似產(chǎn)品：：SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞

H-87細胞類似產(chǎn)品：：Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞

LS 1034細胞類似產(chǎn)品：：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞

NCI522細胞類似產(chǎn)品：：MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞

CL1細胞類似產(chǎn)品：：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞

OSC19細胞類似產(chǎn)品：：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞

Beta-TC-6細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞

SNK1細胞類似產(chǎn)品：：H1882細胞、NCI-H847細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞

OCI-Ly 18細胞類似產(chǎn)品：：8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞

Panc10.05細胞類似產(chǎn)品：：MUGCHOR1細胞、MLE-12細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞

Hs606細胞類似產(chǎn)品：：JHH7細胞、HDMEC細胞、Panc 8.13細胞

SUSM1細胞類似產(chǎn)品：：SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞

MCF7ADR細胞類似產(chǎn)品：：SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞

SKM1細胞類似產(chǎn)品：：QBC-939細胞、KBM-5細胞、NCIH647細胞

OVCAR-8細胞類似產(chǎn)品：：578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞

HEP3B2細胞類似產(chǎn)品：：Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞

KM12-SM:人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

AN3-CA細胞類似產(chǎn)品：：UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞

2008細胞類似產(chǎn)品：：T241細胞、1301細胞、SK-Col-1細胞

C-28/I2細胞類似產(chǎn)品：：C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞

HRA-19細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞

CNE1-LUC細胞類似產(chǎn)品：：TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞

H-2030細胞類似產(chǎn)品：：OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞

LX-2細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞

MES-SA/Dx-5細胞類似產(chǎn)品：：RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞

SKES1細胞類似產(chǎn)品：：Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞

CL MC/9細胞類似產(chǎn)品：：HFL 1細胞、Walker256-TC細胞、NOR-10細胞

Jurkat77細胞類似產(chǎn)品：：HCEC細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞、H766T細胞

SUM-52細胞類似產(chǎn)品：：AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞

COLO 205細胞類似產(chǎn)品：：H4-II-E細胞、SUM 102PT細胞、COLO_320DM細胞

VAESBJ細胞類似產(chǎn)品：：ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞

HepG2/C3A細胞類似產(chǎn)品：：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞

BRL 3A細胞類似產(chǎn)品：：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞

SU86_86細胞類似產(chǎn)品：：HFL-I細胞、Melan-a細胞、L-Wnt3A細胞

NIH:OVCAR-3細胞類似產(chǎn)品：：Super Tube細胞、HDLM-2細胞、IMR32細胞

TE11細胞類似產(chǎn)品：：Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞

SW 620細胞類似產(chǎn)品：：H-650細胞、SKMEL2細胞、Hs695細胞

KNS-62細胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞

HANK細胞類似產(chǎn)品：：BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞

Chang Cells細胞類似產(chǎn)品：：Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞

Ramos 2G6 4C10細胞類似產(chǎn)品：：PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞

DU145細胞類似產(chǎn)品：：RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞

Hs-600-T細胞類似產(chǎn)品：：H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞

Tn-5細胞類似產(chǎn)品：：MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞

Panc-1-P細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞

BxPC-3細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-7666細胞、M 1細胞、H-345細胞

alpha TC1 clone 6細胞類似產(chǎn)品：：Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞

SCL I細胞類似產(chǎn)品：：UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞

CCFSTTG1細胞類似產(chǎn)品：：CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞

8305C_1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞

OCI AML2細胞類似產(chǎn)品：：MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞

SuDHL 2細胞類似產(chǎn)品：：DH 82細胞、Ly7細胞、H378細胞

ZR7530細胞類似產(chǎn)品：：Caco2-BBE細胞、SJSA-1細胞、SW527細胞

SKRC-52細胞類似產(chǎn)品：：VA-ES-BJ細胞、WM115mel細胞、Sp2/O-Ag14細胞

293c18細胞類似產(chǎn)品：：NCIH23細胞、AR4-IP細胞、A427細胞

TE-15細胞類似產(chǎn)品：：MV4:11細胞、CHOS細胞、NCI-H820細胞

HRPEpiC細胞類似產(chǎn)品：：HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞

MDA-175細胞類似產(chǎn)品：：Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞

PLC細胞類似產(chǎn)品：：Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞

U2932細胞類似產(chǎn)品：：RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞

hTERT-RPE1細胞類似產(chǎn)品：：Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞

SVEC4-10細胞類似產(chǎn)品：：Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞

OVCAR432細胞類似產(chǎn)品：：LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞

GBC-SD細胞類似產(chǎn)品：：Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞

OCI-AML2細胞類似產(chǎn)品：：COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞

G 292 Clone A 141B1細胞類似產(chǎn)品：：T-HEECs細胞、COV504細胞、X63-AG 8.653細胞

RPMI 7951細胞類似產(chǎn)品：：X63.Ag8.653細胞、BEAS 2B細胞、SU-DHL-4細胞

FHs74 Int細胞類似產(chǎn)品：：HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞

PC2細胞類似產(chǎn)品：：Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞

MOLM-14細胞類似產(chǎn)品：：C-643細胞、OCI-Ly07細胞、PANC0203細胞

KNS81細胞類似產(chǎn)品：：3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞

COLO-16細胞類似產(chǎn)品：：OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞

WRL-68細胞類似產(chǎn)品：：LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞

Y-79細胞類似產(chǎn)品：：MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞

ATC241細胞類似產(chǎn)品：：HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞

ATC241細胞類似產(chǎn)品：：HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞

HS0578T細胞類似產(chǎn)品：：L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞

LIXC-002細胞類似產(chǎn)品：：B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞

SK-N-BE(2)C細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB157細胞、NCI-H64細胞、J-111細胞

SK-ES-1細胞類似產(chǎn)品：：CD18/HPAF細胞、GCT細胞、N87細胞

HPDEC細胞類似產(chǎn)品：：COLO_320DM細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、HRGEC細胞

H1105細胞類似產(chǎn)品：：CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞

293c18細胞類似產(chǎn)品：：NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞

HDLM-2細胞類似產(chǎn)品：：MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞

SNU520細胞類似產(chǎn)品：：H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞

451-LU細胞類似產(chǎn)品：：U-138 MG細胞、LY-R細胞、HOP92細胞

U87細胞類似產(chǎn)品：：PANC1005細胞、ECC10細胞、RCM1細胞

H-1623細胞類似產(chǎn)品：：HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞

MC9細胞類似產(chǎn)品：：CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞

GC-2spd(ts)細胞類似產(chǎn)品：：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞

DAN-G細胞類似產(chǎn)品：：aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞

SF 767細胞類似產(chǎn)品：：TSUpr1細胞、ESC細胞、PE/CA-PJ-34細胞

CHO-Lec1細胞類似產(chǎn)品：：H1963細胞、H4-II-EC3細胞、A2780CP細胞

HConEpic細胞類似產(chǎn)品：：Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞

WM35細胞類似產(chǎn)品：：A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞

NALM6細胞類似產(chǎn)品：：Ramos (RA)細胞、IPEC-J2細胞、CTV1細胞

HSC-3細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞

MOLT-4細胞類似產(chǎn)品：：HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞

HDLM-2細胞類似產(chǎn)品：：MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞

KM12-SM:人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

U-138MG細胞類似產(chǎn)品：：NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞

PLB985細胞類似產(chǎn)品：：Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞

NTERA-2 cl.D1細胞類似產(chǎn)品：：GM02219細胞、HMC3細胞、B16/F1細胞

3T3-F442A細胞類似產(chǎn)品：：rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞

DMS-153細胞類似產(chǎn)品：：H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞

HUC-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞

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