"NCI-H157:人非小細胞肺腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HPDLF細胞類似產(chǎn)品：：HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞

BIC-1細胞類似產(chǎn)品：：BALB/c 3T3 clone A31細胞、SW-756細胞、ONS76細胞

4T1-LUC細胞類似產(chǎn)品：：HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞

GM02131A細胞類似產(chǎn)品：：B16/F10細胞、PLC-8024細胞、MDA MB 453細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-H157:人非小細胞肺腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

BDCM細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML2細胞、Plaepi 34細胞、SUIT-2細胞

Fetal Human Colon細胞類似產(chǎn)品：：GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞

K562/ADP細胞類似產(chǎn)品：：SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞

培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋HAO凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做HAO標記；６)凍存：在殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷。【復(fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

NCI-H157:人非小細胞肺腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長　

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復(fù)吹打。

hFOB 1.19細胞類似產(chǎn)品：：HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞

NCIH2029細胞類似產(chǎn)品：：16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞

PANC0403細胞類似產(chǎn)品：：L-540細胞、RGE細胞、A704細胞

KMB-17細胞類似產(chǎn)品：：TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞

PBMC細胞類似產(chǎn)品：：kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞

OCILY3細胞類似產(chǎn)品：：Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞

WM-451Lu細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞

HEC-251細胞類似產(chǎn)品：：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞

V79-4細胞類似產(chǎn)品：：LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞

NCI-H2452細胞類似產(chǎn)品：：SKMEL28細胞、L1210細胞、SCC-4細胞

H-2291細胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 4細胞、BCaP-37細胞、HeLa/DDP細胞

RCC10RGB細胞類似產(chǎn)品：：PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞

GM05887細胞類似產(chǎn)品：：RBL.2H3細胞、H-209細胞、ZR75_1細胞

Cor L51細胞類似產(chǎn)品：：NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞

P30/0HK細胞類似產(chǎn)品：：UMUC3細胞、H2107細胞、293 Ad5細胞

H-1672細胞類似產(chǎn)品：：PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞

H-1672細胞類似產(chǎn)品：：PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞

SPCA1細胞類似產(chǎn)品：：Hep-G2細胞、DHL-5細胞、CCD 966 SK細胞

Vero-E6細胞類似產(chǎn)品：：LS-513細胞、KMH-2細胞、PSN1細胞

Chinese Hamster Lung細胞類似產(chǎn)品：：H-1568細胞、PNT1-a細胞、COLO-320-DM細胞

Kit 225-K6細胞類似產(chǎn)品：：3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞

Pt K2 (NBL-5)細胞類似產(chǎn)品：：NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞

NCI-H-69細胞類似產(chǎn)品：：DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞

MHCC 97-L細胞類似產(chǎn)品：：CT-26 WT細胞、U-2OS細胞、Colon38細胞

NCI-H157:人非小細胞肺腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

COLO-320DM細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞

PIEC細胞類似產(chǎn)品：：SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞

HCT FET細胞類似產(chǎn)品：：NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞

639-V細胞類似產(chǎn)品：：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞

SKNMC細胞類似產(chǎn)品：：KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞

HN-6細胞類似產(chǎn)品：：ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞

CMT 93細胞類似產(chǎn)品：：FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞

Human Fetal Thymocyte-8810細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞

293GP細胞類似產(chǎn)品：：BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞

High5細胞類似產(chǎn)品：：C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞

BA/F3細胞類似產(chǎn)品：：DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞

T-CAM2細胞類似產(chǎn)品：：SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞

H2023細胞類似產(chǎn)品：：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞

PCI-04B細胞類似產(chǎn)品：：CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞

PLCPRF5細胞類似產(chǎn)品：：SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞

GT1-1細胞類似產(chǎn)品：：LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞

H1688細胞類似產(chǎn)品：：T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞

Wistar Institute-38細胞類似產(chǎn)品：：PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞

VM-CUB-1細胞類似產(chǎn)品：：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞

Centre Antoine Lacassagne-12T細胞類似產(chǎn)品：：MDA MB 134VI細胞、HOS細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞

SUM 190PT細胞類似產(chǎn)品：：LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞

BCaP 37細胞類似產(chǎn)品：：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞

BT 325細胞類似產(chǎn)品：：BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞

MiaPaCa-2細胞類似產(chǎn)品：：TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞

SJRH-30細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞

HEK 293-EBNA細胞類似產(chǎn)品：：HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞

Karpas-299細胞類似產(chǎn)品：：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞

SUDHL-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-119細胞、JIMT-1細胞、COS1細胞

Hs 27細胞類似產(chǎn)品：：TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞

MDA-MB-231-luc細胞類似產(chǎn)品：：211H細胞、Co320細胞、HFF1細胞

RMC細胞類似產(chǎn)品：：NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞

LNCaP-Clone-FGC細胞類似產(chǎn)品：：H1954細胞、3T6 Swiss Albino細胞、Tj-905細胞

MDA-415細胞類似產(chǎn)品：：HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞

Turbot Embryonic Cell line細胞類似產(chǎn)品：：RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞

HT-144細胞類似產(chǎn)品：：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞

NS-I/1細胞類似產(chǎn)品：：3T3J2細胞、Hs-611-T細胞、GM16136細胞

H1836細胞類似產(chǎn)品：：H-1581細胞、FRH-0201細胞、NHLF細胞

PANC0403細胞類似產(chǎn)品：：L-540細胞、Hs27細胞、SupB15W細胞

SJSA細胞類似產(chǎn)品：：CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞

IMR 90細胞類似產(chǎn)品：：SNU-398細胞、SCLC-21H細胞、Sp2/mIL-6細胞

SK-Hep1細胞類似產(chǎn)品：：Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞

HepG2/C3A細胞類似產(chǎn)品：：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞

Ly7細胞類似產(chǎn)品：：CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞

SNGM細胞類似產(chǎn)品：：H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞

Line 207細胞類似產(chǎn)品：：HCC1806細胞、BC-022細胞、U251-MG細胞

SRA01/04 (HLE)細胞類似產(chǎn)品：：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞

PANC0403細胞類似產(chǎn)品：：L-540細胞、RGE細胞、A704細胞

VA-ES-BJ細胞類似產(chǎn)品：：SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞

NR8383細胞類似產(chǎn)品：：HAPI細胞、WM 451-Lu細胞、HEK293細胞

AZ-521細胞類似產(chǎn)品：：MADISON LUNG TA-109細胞、MOLT.4細胞、T98-G細胞

CMT.64細胞類似產(chǎn)品：：Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞

RBL 2H3細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞

KOSC-2 cl3-43細胞類似產(chǎn)品：：Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞

HCC-1419細胞類似產(chǎn)品：：Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞

2T細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞

RT-BM-1細胞類似產(chǎn)品：：HUC-1細胞、HCC1806細胞、GM 2132細胞

UCLA-RO 81細胞類似產(chǎn)品：：M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞

HCC1187細胞類似產(chǎn)品：：ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞

HCC1187細胞類似產(chǎn)品：：ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞

H1155細胞類似產(chǎn)品：：HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞

H-1703細胞類似產(chǎn)品：：Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞

CHL-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞

T173細胞類似產(chǎn)品：：Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞

L-02細胞類似產(chǎn)品：：H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞

6-10B細胞類似產(chǎn)品：：SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞

OUMS-27細胞類似產(chǎn)品：：KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞

CAL 85-1細胞類似產(chǎn)品：：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞

SNU-354細胞類似產(chǎn)品：：SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞

HREC細胞類似產(chǎn)品：：H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞

451Lu細胞類似產(chǎn)品：：NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞

HEK AD293細胞類似產(chǎn)品：：P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞

M20 [Human melanoma]細胞類似產(chǎn)品：：WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞

MeT 5A細胞類似產(chǎn)品：：SW1783細胞、IPI-2I細胞、Panc 02.03細胞

MV-4-11細胞類似產(chǎn)品：：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞

U138細胞類似產(chǎn)品：：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞

RPTEC/TERT 1細胞類似產(chǎn)品：：RFL6細胞、NCIH1568細胞、Psi2 DAP細胞

RMS1598細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞

U87MG細胞類似產(chǎn)品：：OE-19細胞、EFM-192C細胞、BHK 21細胞

COLO 320HSR細胞類似產(chǎn)品：：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞

DiFi細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞

ECC-1細胞類似產(chǎn)品：：3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞

NCI-SNU-182細胞類似產(chǎn)品：：HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞

NCI-H157:人非小細胞肺腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

MFE-296細胞類似產(chǎn)品：：PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞

HRMC細胞類似產(chǎn)品：：Institute for Medical Research-90細胞、3T3-Swiss細胞、Hs852T細胞

N1S1細胞類似產(chǎn)品：：NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞

IALM細胞類似產(chǎn)品：：DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞

Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞類似產(chǎn)品：：SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞

SW579細胞類似產(chǎn)品：：Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞

"