"MDBK:牛腎復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細胞（潤洗方法5min還不能消化），這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化HAO了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常HAO，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個性。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化HAO導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不HAO。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Hs706T細胞類似產(chǎn)品：：SR786細胞、JC細胞、Panc02細胞

PG-BE1細胞類似產(chǎn)品：：H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞

KAT5細胞類似產(chǎn)品：：HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞

Colo320細胞類似產(chǎn)品：：PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

NTERA2D1細胞類似產(chǎn)品：：MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞

EB-3細胞類似產(chǎn)品：：SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞

PIEC細胞類似產(chǎn)品：：SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞

培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋HAO凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做HAO標記；６)凍存：在殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長　

一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過GAO時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過GAO超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關(guān)。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄Zui佳消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。

251 MG細胞類似產(chǎn)品：：2BS細胞、NCIH1618細胞、Hep G2/C3A細胞

Rainbow Trout Embryo細胞類似產(chǎn)品：：SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞

SUD-4細胞類似產(chǎn)品：：CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞

MMVECs細胞類似產(chǎn)品：：MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞

NCIH1581細胞類似產(chǎn)品：：H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞

NCI.H522細胞類似產(chǎn)品：：PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞

PC-3M 2B4細胞類似產(chǎn)品：：KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞

EAC細胞類似產(chǎn)品：：U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞

KYSE 450細胞類似產(chǎn)品：：Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞

HSC1細胞類似產(chǎn)品：：PC 61 5.3細胞、HLMVEC細胞、HT1376細胞

Hs 636.T細胞類似產(chǎn)品：：EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞

SNUC2A細胞類似產(chǎn)品：：A 549細胞、Panc_02_03細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞

PK (15)細胞類似產(chǎn)品：：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞

EFM-192A細胞類似產(chǎn)品：：H524細胞、Anip 973細胞、Mv1Lu細胞

SK RC 52細胞類似產(chǎn)品：：RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞

PL-11細胞類似產(chǎn)品：：PA1細胞、RINm-5F細胞、B 95.8細胞

PL-11細胞類似產(chǎn)品：：PA1細胞、RINm-5F細胞、B 95.8細胞

Be-Wo細胞類似產(chǎn)品：：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞

HEL細胞類似產(chǎn)品：：OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞

SKNDZ細胞類似產(chǎn)品：：751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞

MC-116細胞類似產(chǎn)品：：SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞

HIT clone T15細胞類似產(chǎn)品：：NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞

UACC812細胞類似產(chǎn)品：：SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞

WEHI-3B細胞類似產(chǎn)品：：Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞

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639-V細胞類似產(chǎn)品：：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞

MOLP8細胞類似產(chǎn)品：：D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞

HBMEC細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞

HCC-1500細胞類似產(chǎn)品：：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞

MDA468細胞類似產(chǎn)品：：QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞

KPNRTBM1細胞類似產(chǎn)品：：32D clone3細胞、H 9細胞、CP-70細胞

CAL39細胞類似產(chǎn)品：：SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞

T.T細胞類似產(chǎn)品：：SNU5細胞、H1838細胞、KNS81細胞

HMCB細胞類似產(chǎn)品：：Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞

ME180細胞類似產(chǎn)品：：PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞

UWB1.289+BRCA1細胞類似產(chǎn)品：：Capan 1細胞、MDA-MB-435細胞、SUM149細胞

RIN m5F細胞類似產(chǎn)品：：H-2141細胞、ROS-17/2.8細胞、SF 295細胞

U-118MG細胞類似產(chǎn)品：：PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞類似產(chǎn)品：：A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞

Hs 888Lu細胞類似產(chǎn)品：：Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞

L-5178-Y細胞類似產(chǎn)品：：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞

EBTr (NBL-4)細胞類似產(chǎn)品：：Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞

RPMI 1788細胞類似產(chǎn)品：：Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞

X63Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞

Human Corneal Endothelial Cells-12細胞類似產(chǎn)品：：SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞

no.11細胞類似產(chǎn)品：：HCE-2 [50.B1]細胞、THC-8307細胞、HCA-7細胞

PF382細胞類似產(chǎn)品：：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞

GM0637細胞類似產(chǎn)品：：SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞

SPC-A-1細胞類似產(chǎn)品：：CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞

Ketr-3細胞類似產(chǎn)品：：C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞

FDC-P1細胞類似產(chǎn)品：：CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞

H345細胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW039細胞、UMR106細胞、P3-X63-Ag8細胞

NB-9細胞類似產(chǎn)品：：LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞

MONO-MAC 6細胞類似產(chǎn)品：：H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞

SNU1040細胞類似產(chǎn)品：：16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞

OVCAR8細胞類似產(chǎn)品：：RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞

3396細胞類似產(chǎn)品：：MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞

BNL.CL2細胞類似產(chǎn)品：：TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞

SCC090細胞類似產(chǎn)品：：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞

NCIH1770細胞類似產(chǎn)品：：J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞

H-2170細胞類似產(chǎn)品：：WILL-2細胞、HEK 293-H細胞、NCIH1993細胞

NUGC3細胞類似產(chǎn)品：：VMRC-RCZ細胞、A549/DDP細胞、2008細胞

SUD-4細胞類似產(chǎn)品：：CHOK1細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞

J 82細胞類似產(chǎn)品：：RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞

CCD 966SK細胞類似產(chǎn)品：：MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞

MN-60細胞類似產(chǎn)品：：Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞

KYSE-510細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞

MEG-01細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞

Panc02-H0細胞類似產(chǎn)品：：PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞

SW 839細胞類似產(chǎn)品：：EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞

RD細胞類似產(chǎn)品：：MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞

NCI-H1792細胞類似產(chǎn)品：：MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞

KYSE 410細胞類似產(chǎn)品：：ZR7530細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、786.O細胞

SW982細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞

H-250細胞類似產(chǎn)品：：H520細胞、Functional Liver Cell-7細胞、OUMS-27細胞

NIH-OVCAR-3細胞類似產(chǎn)品：：251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞

HLEB-3細胞類似產(chǎn)品：：MM1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞、U266B1細胞

BetaTC6細胞類似產(chǎn)品：：NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞

RMG-1細胞類似產(chǎn)品：：V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞

RMa-bm細胞類似產(chǎn)品：：CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞

C 6細胞類似產(chǎn)品：：3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞

MBdSMC細胞類似產(chǎn)品：：NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞

CL1細胞類似產(chǎn)品：：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞

CL1細胞類似產(chǎn)品：：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞

MCCAR細胞類似產(chǎn)品：：TGHAVSMC細胞、U266 B1細胞、H1437細胞

HSF2細胞類似產(chǎn)品：：ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞

SCL2細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、4175細胞、TFK-1細胞

HEK/EBNA細胞類似產(chǎn)品：：K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞

Mel-MeWo細胞類似產(chǎn)品：：UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞

B95-8細胞類似產(chǎn)品：：TE 32.T細胞、CoC1細胞、118MG細胞

K-562細胞類似產(chǎn)品：：GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞

MPASMC細胞類似產(chǎn)品：：Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞

Pa18C細胞類似產(chǎn)品：：HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞

Rat podocyte細胞類似產(chǎn)品：：WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞

UM-UC-14細胞類似產(chǎn)品：：CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞

Rca-B細胞類似產(chǎn)品：：GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞

HEK (AD293)細胞類似產(chǎn)品：：WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞

NCIH2085細胞類似產(chǎn)品：：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞

H2.35細胞類似產(chǎn)品：：LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞

IOSE-Mar細胞類似產(chǎn)品：：4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞

NCI-HUT-125細胞類似產(chǎn)品：：Ramos.2G6.4C10細胞、Jurkat E6細胞、C33細胞

Panc05.04細胞類似產(chǎn)品：：HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞

LNCaP細胞類似產(chǎn)品：：Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞

L-1210細胞類似產(chǎn)品：：Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞

Lung cancer-1/squamous細胞類似產(chǎn)品：：UM-UC-3細胞、QBC-939細胞、H220細胞

EOC 20細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(1)n細胞、HRMC細胞、CORL23細胞

H661細胞類似產(chǎn)品：：ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞

MDBK:牛腎復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

SCC 9細胞類似產(chǎn)品：：MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞

253JBV細胞類似產(chǎn)品：：BT549細胞、Hs 578.T細胞、BJ [Human fibroblast]細胞

MIHA細胞類似產(chǎn)品：：HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞

16-HBE細胞類似產(chǎn)品：：MN60細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、IPLB-Sf21-AE細胞

H-187細胞類似產(chǎn)品：：Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞

KCL22S細胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞

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