"Detroit 562:人咽頭癌胸水轉移復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長:貼壁
可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據實際情況把握)。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
COLO 699細胞類似產品::TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞
HFT-8810細胞類似產品::NCI-H1155細胞、TJ905細胞、Capan2細胞
NCI-H1944細胞類似產品::RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞
GES-1細胞類似產品::HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞背景資料:器官:咽頭 疾病:癌 取材轉移灶:胸水
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細胞形態(tài):上皮細胞樣
MDA-MB 468細胞類似產品::U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞
Panc02.03細胞類似產品::H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
JROECL33細胞類似產品::LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
細胞培養(yǎng)無菌操作的演示:凡是帶入超凈工作臺內的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面;靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌,繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在GAO處,使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈,動作要輕、準確,不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管,防止交叉污染。玻璃器械洗消:一、新的玻璃器皿的洗消:自來水刷洗,除去灰塵。烘干、泡:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀中12小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干:12小時后立即用自來水沖洗,再用洗滌劑刷洗,自來水沖干凈后用烤箱烘干;泡酸、清洗:用清潔液浸泡12小時,然后從酸缸內撈出器皿用自來水沖洗15次,Zui后蒸餾水沖洗3-5次和用雙蒸水過3次。烘干、包裝:洗干凈后先烘干,然后用牛皮紙(油光紙)包裝。GAO壓消毒:包裝HAO的器皿裝入GAO壓鍋內蓋HAO蓋子,打開開關和安全閥,當蒸氣成直線上升時,關閉安全閥,當指針指向15磅時,維持20-30分鐘。GAO壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消:刷洗、烘干:使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中,泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈,然后烘干。泡酸、清洗:烘干后泡入清潔液(酸液),12小時后從酸缸內撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質干涸后粘附于玻璃上難以清洗),再用蒸餾水沖洗3次。烘干、包裝:洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,2-3天換液1次。
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁生長
細胞培養(yǎng)技術也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術。不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養(yǎng)都是一個必不可少的過程,細胞培養(yǎng)本身就是細胞的大規(guī)??寺?。細胞培養(yǎng)技術可以由一個細胞經過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術必不可少的環(huán)節(jié),而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。通過細胞培養(yǎng)得到大量的細胞或其代謝產物。因為生物產品都是從細胞得來,所以可以說細胞培養(yǎng)技術是生物技術中Zui核心、Zui基礎的技術。公司是國內Zui大的細胞庫之一,迄今為止,細胞收錄背景資料清晰,活力狀態(tài)良HAO的細胞系達1356株,其中大部分是1999年以來從美國ATCC、德國DSMZ和日本RIKEN等分批次引進的細胞系,是全國Zui權威的細胞庫,為您實驗提供Zui可信賴的細胞。公司立足上海,輻射全國,面向世界,為國內科研細胞實驗做綿薄之力。
H-1048細胞類似產品::3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞
HCC38細胞類似產品::NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
JIMT細胞類似產品::HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
HN13細胞類似產品::16-HBEo細胞、B16 F10細胞、R 1610細胞
B16 melanoma細胞類似產品::As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
RAW 264.7細胞類似產品::NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞
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22Rv-1細胞類似產品::SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞
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IOSE80細胞類似產品::NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞
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關鍵字: Detroit 562:人咽頭癌胸水轉移;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。