"NCI-H2227:人小細(xì)胞肺癌復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較HAO生長(zhǎng),生長(zhǎng)狀態(tài)也比較HAO。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較HAO,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長(zhǎng)速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較HAO。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng),而堆與堆之間是有空間的。如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不HAO的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問(wèn)題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不HAO,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無(wú)血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過(guò)一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開(kāi)始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來(lái)的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺(tái),底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得HAO的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
MC9細(xì)胞類似產(chǎn)品::CCD1112Sk細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞
OVISE細(xì)胞類似產(chǎn)品::HCC1954BL細(xì)胞、H2087細(xì)胞、HM細(xì)胞
NCI-H2227細(xì)胞類似產(chǎn)品::H-2286細(xì)胞、HC11細(xì)胞、FAT細(xì)胞
HHUA細(xì)胞類似產(chǎn)品::U266BL細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞
[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
NCI-H2227:人小細(xì)胞肺癌復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
LNCaP C4-2細(xì)胞類似產(chǎn)品::SW480E細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞、NK92細(xì)胞
H-865細(xì)胞類似產(chǎn)品::Huh-7.5細(xì)胞、A20細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞
AML 12細(xì)胞類似產(chǎn)品::Kit225 K6細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞,可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用消化法傳代,部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實(shí)驗(yàn)步驟:①入無(wú)菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開(kāi)超凈工作臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開(kāi)風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧;⑤點(diǎn)燃酒精燈;取出無(wú)菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過(guò)酒精燈火焰略燒后插在無(wú)菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過(guò)酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化HAO的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)
NCI-H2227:人小細(xì)胞肺癌復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:該細(xì)胞既有懸浮生長(zhǎng),又有貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞培養(yǎng)中常用設(shè)施及設(shè)備:實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì):細(xì)胞培養(yǎng)是一種無(wú)菌操作技術(shù),要求工作環(huán)境和條件必須保證無(wú)微生物污染和不受其它有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室和設(shè)計(jì)原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔、空氣清新,干燥和無(wú)煙塵。細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)計(jì)原則一般是無(wú)菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動(dòng)的內(nèi)側(cè),常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室。常用設(shè)施及設(shè)備:1)超凈工作臺(tái):也稱凈化工作臺(tái),分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。2)無(wú)菌操作間:一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺(tái)及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機(jī)、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無(wú)菌物品等。3)操作間:普通培養(yǎng)箱、離心機(jī)、水浴鍋、定時(shí)鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間:烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室:顯微鏡、計(jì)算機(jī)及打印機(jī)等。
WIL2 S細(xì)胞類似產(chǎn)品::OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞
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RL95-2細(xì)胞類似產(chǎn)品::Clone 166細(xì)胞、GM03570細(xì)胞、Molm 13細(xì)胞
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WM266mel細(xì)胞類似產(chǎn)品::Hepatoma-22細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞
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MDBK細(xì)胞類似產(chǎn)品::ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞
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SW1116細(xì)胞類似產(chǎn)品::KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞
BALB 3T3 clone A31細(xì)胞類似產(chǎn)品::MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞
Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞類似產(chǎn)品::XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞
HCC2279細(xì)胞類似產(chǎn)品::HuCC-T1細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞
HPAF-2細(xì)胞類似產(chǎn)品::L Wnt-3A細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞、HMC3細(xì)胞
NCTC clone 929細(xì)胞類似產(chǎn)品::MDAMB157細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞
KMB-17細(xì)胞類似產(chǎn)品::TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞
NCI-H838細(xì)胞類似產(chǎn)品::hTERT-RPE-1細(xì)胞、R1610細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞
U2-OS細(xì)胞類似產(chǎn)品::bEnd3細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞
293c18細(xì)胞類似產(chǎn)品::NCIH23細(xì)胞、UO31細(xì)胞、BC-023細(xì)胞
RPMI No. 1846細(xì)胞類似產(chǎn)品::NCI-H2081細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞
TFK1細(xì)胞類似產(chǎn)品::ID8細(xì)胞、H520細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞
2B4細(xì)胞類似產(chǎn)品::MOPC細(xì)胞、PK 15細(xì)胞、KY180細(xì)胞
SGC7901/DDP細(xì)胞類似產(chǎn)品::MHCC 97-H細(xì)胞、SUM190PT細(xì)胞、Co-115細(xì)胞
NCI-HUT-292細(xì)胞類似產(chǎn)品::NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞
TCCPAN2細(xì)胞類似產(chǎn)品::HLEC細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞、OP9細(xì)胞
JROECL19細(xì)胞類似產(chǎn)品::LC1/Sq細(xì)胞、U118細(xì)胞、BT483細(xì)胞
SKCO-1細(xì)胞類似產(chǎn)品::FAT細(xì)胞、EU-3細(xì)胞、293GP細(xì)胞
LICR-HN-6細(xì)胞類似產(chǎn)品::MB468細(xì)胞、38C-13細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞
YAC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品::THLE-3細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞、THP 1細(xì)胞
HuT 102細(xì)胞類似產(chǎn)品::CAKI 1細(xì)胞、GM15452細(xì)胞、SW954細(xì)胞
MES-13細(xì)胞類似產(chǎn)品::OSK-1細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞、Calu3細(xì)胞
NCI-H2227:人小細(xì)胞肺癌復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
OACP4C細(xì)胞類似產(chǎn)品::B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞
PCI-SG231細(xì)胞類似產(chǎn)品::HT1376細(xì)胞、DU-145細(xì)胞、DF1細(xì)胞
AR4IP細(xì)胞類似產(chǎn)品::D341 Med細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞
SUIT-2細(xì)胞類似產(chǎn)品::K1735細(xì)胞、GalK 1細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞
KY-50細(xì)胞類似產(chǎn)品::CL MC/9細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞
HOP-62細(xì)胞類似產(chǎn)品::LK2細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞、T24細(xì)胞
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關(guān)鍵字: NCI-H2227:人小細(xì)胞肺癌復(fù)蘇細(xì)胞;
上海冠導(dǎo)生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國(guó)內(nèi)外細(xì)胞庫(kù)引進(jìn)細(xì)胞2000余株。以此為契機(jī),公司組建了冠導(dǎo)細(xì)胞庫(kù),我司細(xì)胞均由資深細(xì)胞培養(yǎng)工程師進(jìn)行培養(yǎng)。我司可以提供的細(xì)胞有:①細(xì)胞系②原代細(xì)胞③穩(wěn)轉(zhuǎn)株④耐藥株⑤標(biāo)記細(xì)胞⑥細(xì)胞配套試劑等。