"NCI-H1341:人小細胞肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

A375-S2細胞類似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞

HCT-GEO細胞類似產(chǎn)品：：SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞

SUM-102細胞類似產(chǎn)品：：H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞

EHEB細胞類似產(chǎn)品：：KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-H1341:人小細胞肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

NCIH1693細胞類似產(chǎn)品：：C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞

M-G63細胞類似產(chǎn)品：：SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞

Hs839T細胞類似產(chǎn)品：：U-87MG ATCC細胞、PANC0203細胞、SK-Hep1細胞

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺臺面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風(fēng)機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化HAO的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。

細胞傳代方法：３-４天換液１次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

NCI-H1341:人小細胞肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：懸浮生長

細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻，或者放入時搖勻，但在細胞貼壁前，又移動了培養(yǎng)瓶，頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少，培養(yǎng)箱擱板表面不平整，這些因素會導(dǎo)致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?，F(xiàn)象，大部分懸浮細胞在細胞密度很GAO的情況下，很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制HAO細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團，可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團，也可以嘗試一下方法：將細胞懸液收集到15ml離心管中，靜置20min左右，小心取上層細胞上清培養(yǎng)（該方法只能去除部分較大的細胞團）。部分細胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等），這個是正常現(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡，則很可能是細胞狀態(tài)不佳，可以通過調(diào)整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài)；如果大部分細胞出現(xiàn)空泡，且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多，則可能細胞代次較GAO，細胞老化所致，需更換代次較早的細胞。

CFSC-8B細胞類似產(chǎn)品：：L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞

769-P細胞類似產(chǎn)品：：143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞

NCI-H322T細胞類似產(chǎn)品：：Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞

FRTL 5細胞類似產(chǎn)品：：RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞

SCL I細胞類似產(chǎn)品：：UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞

H-2141細胞類似產(chǎn)品：：67NR細胞、TK10細胞、bEND.3細胞

PFSK-1細胞類似產(chǎn)品：：GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞

GC-2細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞

U118MG細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞

DC2.4細胞類似產(chǎn)品：：Psi-2-DAP細胞、PK136細胞、HNSC細胞

MC3T3細胞類似產(chǎn)品：：P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞

OCI-LY-1細胞類似產(chǎn)品：：Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞

OV90細胞類似產(chǎn)品：：McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞

SHG 44細胞類似產(chǎn)品：：HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞

alphaTC1 Clone 6細胞類似產(chǎn)品：：CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞

McG-1細胞類似產(chǎn)品：：Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞

NCIH2066細胞類似產(chǎn)品：：CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞

NCIH1755細胞類似產(chǎn)品：：FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞

VeroC1008細胞類似產(chǎn)品：：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞

A 2058細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞

MRASMC細胞類似產(chǎn)品：：Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、EC9706細胞、CCD-18Co細胞

174xCEM.T2細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H446細胞、GA10細胞、H-460細胞

RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞類似產(chǎn)品：：HPDE細胞、TOV-21G細胞、H-2107細胞

Malme3M細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞

NCI-H1341:人小細胞肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

SKMEL24細胞類似產(chǎn)品：：32D clone 3細胞、UMNSAH/DF-1細胞、RGC6細胞

KYSE70細胞類似產(chǎn)品：：TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞

Co320細胞類似產(chǎn)品：：HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞

OCILY-19細胞類似產(chǎn)品：：HLEB3細胞、SUM149細胞、CV-1細胞

JJN3細胞類似產(chǎn)品：：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞

NCIH2073細胞類似產(chǎn)品：：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞

NPA細胞類似產(chǎn)品：：Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞

SUM190PT細胞類似產(chǎn)品：：PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞

MDA-468細胞類似產(chǎn)品：：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞

H-2330細胞類似產(chǎn)品：：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞

RKOAS451細胞類似產(chǎn)品：：T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞

PNT1-a細胞類似產(chǎn)品：：DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞

TGW細胞類似產(chǎn)品：：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞

MDAMB231細胞類似產(chǎn)品：：MUTZ-1細胞、PANC-08-13細胞、H128細胞

NCI-H1385細胞類似產(chǎn)品：：TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞

Hs934T細胞類似產(chǎn)品：：Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞

SNU-5細胞類似產(chǎn)品：：SKLU01細胞、HCT_116細胞、KYSE-50細胞

OCI-LY-10細胞類似產(chǎn)品：：Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞

Hs819.T細胞類似產(chǎn)品：：SKO-007細胞、H-524細胞、NCIH2073細胞

KP-N-RT-BM細胞類似產(chǎn)品：：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞

SKRC20細胞類似產(chǎn)品：：C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞

BHK21細胞類似產(chǎn)品：：MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞

MHCC97L細胞類似產(chǎn)品：：MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞

SN4741細胞類似產(chǎn)品：：Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞

32Dcl3細胞類似產(chǎn)品：：NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞

NCI H82細胞類似產(chǎn)品：：SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞

JROECL33細胞類似產(chǎn)品：：LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞

3T3-L1 ad細胞類似產(chǎn)品：：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞

LS513細胞類似產(chǎn)品：：OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞

G361細胞類似產(chǎn)品：：EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞

CEF細胞類似產(chǎn)品：：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞

H-865細胞類似產(chǎn)品：：Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞

KLM1細胞類似產(chǎn)品：：EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞

HCC2218細胞類似產(chǎn)品：：Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞

UK Pan-1細胞類似產(chǎn)品：：HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞

SUM-102細胞類似產(chǎn)品：：H-1651細胞、IPAM-WT細胞、ACC-2細胞

OVCAR-10細胞類似產(chǎn)品：：IAR20細胞、H446細胞、A253細胞

NCI-H322T細胞類似產(chǎn)品：：Rh30細胞、3AO細胞、NCIH187細胞

OCI/AML-3細胞類似產(chǎn)品：：MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞

PCI-4.2細胞類似產(chǎn)品：：CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞

H1819細胞類似產(chǎn)品：：HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞

SU-DHL1細胞類似產(chǎn)品：：Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞

SK.MEL.5細胞類似產(chǎn)品：：Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞

NCIH2052細胞類似產(chǎn)品：：G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞

MV3細胞類似產(chǎn)品：：TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞

TE-4細胞類似產(chǎn)品：：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞

PE CA PJ34細胞類似產(chǎn)品：：H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞

CG4細胞類似產(chǎn)品：：PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞

Capan 1細胞類似產(chǎn)品：：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞

HITT15細胞類似產(chǎn)品：：CNE-1細胞、Lu-65細胞、HR-1細胞

MV4;11細胞類似產(chǎn)品：：Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、LICR-HN6細胞、PA1細胞

Colon26細胞類似產(chǎn)品：：ABE-8.1/2細胞、TE 85.T細胞、BCECs細胞

SKNBE(2c)細胞類似產(chǎn)品：：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞

HHL5細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H322細胞、HTori3細胞、DOK細胞

KE 37細胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞

MFE 296細胞類似產(chǎn)品：：SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞

NCI-SNU-387細胞類似產(chǎn)品：：Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞

NCIH1373細胞類似產(chǎn)品：：H774細胞、BAR-T細胞、OVTOKO細胞

NCIH1373細胞類似產(chǎn)品：：H774細胞、BAR-T細胞、OVTOKO細胞

P-19細胞類似產(chǎn)品：：HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞

CCRF-CEM C7細胞類似產(chǎn)品：：1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞

MFE 296細胞類似產(chǎn)品：：SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞

CAL851細胞類似產(chǎn)品：：CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞

Madison lung細胞類似產(chǎn)品：：WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞

H2081細胞類似產(chǎn)品：：hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞

SUDHL1細胞類似產(chǎn)品：：GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞

H-1563細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2023細胞、MIN6細胞、NCIH1568細胞

HME1細胞類似產(chǎn)品：：MC 116細胞、LNCaP clone FGC細胞、NCIH1666細胞

NCI-SNU-668細胞類似產(chǎn)品：：B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞

COLO320HSR細胞類似產(chǎn)品：：H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞

J774A.1細胞類似產(chǎn)品：：32D:cl3細胞、UCLA-SO-14細胞、U-138-MG細胞

RH30SJ細胞類似產(chǎn)品：：End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞

PLC/PRF/5細胞類似產(chǎn)品：：Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞

HC-11細胞類似產(chǎn)品：：Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞

SK Mel 24細胞類似產(chǎn)品：：Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞

NCTC-929細胞類似產(chǎn)品：：SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞

SKMEL24細胞類似產(chǎn)品：：32D clone 3細胞、UMNSAH/DF-1細胞、RGC6細胞

HCC941122細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1963細胞、Blotchy fibroblast-11細胞、H-1793細胞

C643細胞類似產(chǎn)品：：VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞

Hs445細胞類似產(chǎn)品：：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞

LWnt3A細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞

LS1034細胞類似產(chǎn)品：：NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞

NCI-H1341:人小細胞肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

OCI-LY-7細胞類似產(chǎn)品：：HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞

Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞類似產(chǎn)品：：PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞

ECC-1細胞類似產(chǎn)品：：3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞

MC/9細胞類似產(chǎn)品：：A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞

G401細胞類似產(chǎn)品：：PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞

CPA47細胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞

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