"HCC1954:人乳腺導(dǎo)管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升GAO，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當(dāng)溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當(dāng)溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

CHP 212細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1806細胞、H-1155細胞、KMS-11細胞

KNS62細胞類似產(chǎn)品：：LLC-MK-2細胞、AML12細胞、SKNEP-1細胞

FF-WT-BJ細胞類似產(chǎn)品：：hTERT-HPNE細胞、R 2 C細胞、H-4細胞

JB6 clone 30, subclone 7b細胞類似產(chǎn)品：：JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HCC1954:人乳腺導(dǎo)管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

B16/BL6細胞類似產(chǎn)品：：ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞

P3X63Ag8細胞類似產(chǎn)品：：HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞

U266BL細胞類似產(chǎn)品：：HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：１：４-１：８傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

HCC1954:人乳腺導(dǎo)管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：偶爾上皮細胞空泡

細胞培養(yǎng)中常用設(shè)施及設(shè)備：實驗室設(shè)計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù)，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設(shè)計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設(shè)計原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設(shè)施及設(shè)備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。

M3 Clone M-3細胞類似產(chǎn)品：：HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞

C3H/10T1/2細胞類似產(chǎn)品：：JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞

KNS42細胞類似產(chǎn)品：：MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞

PG-4(S+L-)細胞類似產(chǎn)品：：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞

CT26.CL25細胞類似產(chǎn)品：：MDA-435細胞、H-64細胞、H2122細胞

H-810細胞類似產(chǎn)品：：SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞

HCC1395細胞類似產(chǎn)品：：COLO-829細胞、3T6細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞

Hs 636.T細胞類似產(chǎn)品：：EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞

AHH-1細胞類似產(chǎn)品：：Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞

IPLB-Sf21AE細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞

BE(2)-M17細胞類似產(chǎn)品：：H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞

HNE1細胞類似產(chǎn)品：：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞

MOLT 16細胞類似產(chǎn)品：：R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞

MDA-MB468細胞類似產(chǎn)品：：MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞

SW 1463細胞類似產(chǎn)品：：HCC202細胞、H-345細胞、GT38細胞

MV(4;11)細胞類似產(chǎn)品：：PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞

MV(4;11)細胞類似產(chǎn)品：：PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞

P1-Raji細胞類似產(chǎn)品：：RCC-10RGB細胞、MG-HU-3細胞、OCI-AML-5細胞

OK-WT細胞類似產(chǎn)品：：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞

JROECL21細胞類似產(chǎn)品：：OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞

FRTL 5細胞類似產(chǎn)品：：RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞

COLO 357細胞類似產(chǎn)品：：MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞

MADISON LUNG TA-109細胞類似產(chǎn)品：：PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞

TE-14細胞類似產(chǎn)品：：A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞

HCC1954:人乳腺導(dǎo)管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞類似產(chǎn)品：：MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞

MDA-MB-175-VII細胞類似產(chǎn)品：：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞

BEND細胞類似產(chǎn)品：：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞

PC.3細胞類似產(chǎn)品：：SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞

BALB/c 3T3 clone A31細胞類似產(chǎn)品：：SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞

H-358細胞類似產(chǎn)品：：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞

TE-671細胞類似產(chǎn)品：：LM8細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞、ROS 17/28細胞

OCI-AML5細胞類似產(chǎn)品：：JURKAT E-6.1細胞、HCe-8693細胞、GM07404A細胞

SKNO-1細胞類似產(chǎn)品：：HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞

IMR-32細胞類似產(chǎn)品：：BpRcl細胞、SKNF1細胞、Hs729T細胞

PANC0327細胞類似產(chǎn)品：：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞類似產(chǎn)品：：MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞

NB9細胞類似產(chǎn)品：：WM451細胞、A-9細胞、MPC11細胞

HCT/Taxo1細胞類似產(chǎn)品：：NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞

RIN Cl-5F細胞類似產(chǎn)品：：SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞

BxPC-3細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-7666細胞、M 1細胞、H-345細胞

HRA 19細胞類似產(chǎn)品：：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞

KOPN-8細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞

Detroit 562細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞

H1435細胞類似產(chǎn)品：：Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞

F442-A細胞類似產(chǎn)品：：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞

VMCUB-1細胞類似產(chǎn)品：：Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞

2T細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞

MUM2B細胞類似產(chǎn)品：：EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞

EVSA/T細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞

NCI-H1838細胞類似產(chǎn)品：：A3細胞、Strain V細胞、B16細胞

SP2/0 Ag-14細胞類似產(chǎn)品：：Cloudman S91 melanoma細胞、KTA7細胞、Psi-2-DAP細胞

526mel細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1(C4)細胞、RPMI7951細胞、HD11細胞

SiHa細胞類似產(chǎn)品：：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞

HCC-202細胞類似產(chǎn)品：：RT4細胞、NB1-RGB細胞、ND7/23細胞

YAC-1細胞類似產(chǎn)品：：THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞

H-1793細胞類似產(chǎn)品：：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞

OUMS27細胞類似產(chǎn)品：：Tu-177細胞、SK-GT-2細胞、Panc_02_03細胞

HT(H9)細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞

KMBC細胞類似產(chǎn)品：：MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞

H8細胞類似產(chǎn)品：：SNU-354細胞、WM239細胞、MLE12細胞

U87細胞類似產(chǎn)品：：PANC1005細胞、NSC34細胞、NCIH2347細胞

KMY1022細胞類似產(chǎn)品：：OCILY-19細胞、118MG細胞、RT-112細胞

NCI-SNU-182細胞類似產(chǎn)品：：HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞

CV-1.K細胞類似產(chǎn)品：：OVMANA細胞、Ku812F細胞、RH8994細胞

RS1細胞類似產(chǎn)品：：HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞

TE-7細胞類似產(chǎn)品：：Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞

BPH-1細胞類似產(chǎn)品：：H711細胞、HEK;293細胞、Hs-746T細胞

NCTC 1469細胞類似產(chǎn)品：：WiDrTC細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞、HCC-1171細胞

HRVEC細胞類似產(chǎn)品：：CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞

Helacyton gartleri細胞類似產(chǎn)品：：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞

MDA-MB-157細胞類似產(chǎn)品：：A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞

GA-10-Clone-4細胞類似產(chǎn)品：：MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞

MDA MB 436細胞類似產(chǎn)品：：U266-B1細胞、EAC-E2G8細胞、KM12-SM細胞

COR-L23/P細胞類似產(chǎn)品：：RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞

MZ-CRC-1細胞類似產(chǎn)品：：H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞

Panc_03_27細胞類似產(chǎn)品：：A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞

BHP-10細胞類似產(chǎn)品：：SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞

P3/X63-Ag8細胞類似產(chǎn)品：：MHCC 97細胞、MOVAS細胞、HCC-366細胞

EVSAT細胞類似產(chǎn)品：：MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞

Oka-C1細胞類似產(chǎn)品：：H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞

751細胞類似產(chǎn)品：：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞

3T3 J2細胞類似產(chǎn)品：：Henrietta Lacks cells細胞、RPMI 8402細胞、G-401細胞

3T3 J2細胞類似產(chǎn)品：：Henrietta Lacks cells細胞、RPMI 8402細胞、G-401細胞

KALS1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH209細胞、2BS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞

RCC_7860細胞類似產(chǎn)品：：U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞

H676細胞類似產(chǎn)品：：HCC38細胞、SKMES-1細胞、BC-025細胞

H847細胞類似產(chǎn)品：：FRO細胞、Huh 7.5.1細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞

Tokyo Medical and Dental university 8細胞類似產(chǎn)品：：CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞

COLO-680N細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞

YAC-1細胞類似產(chǎn)品：：THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞

MDA175細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL28細胞、HN6細胞、MDA-MB-435細胞

OCI-AML-5細胞類似產(chǎn)品：：SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞

HCC1419細胞類似產(chǎn)品：：Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞

SUDHL-16細胞類似產(chǎn)品：：F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞

M20 [Human melanoma]細胞類似產(chǎn)品：：WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞

CCD-19Lu細胞類似產(chǎn)品：：HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞

SUM-190細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1355細胞、FL62891細胞、Oka-C1細胞

M-20細胞類似產(chǎn)品：：HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞

MDAMB175VII細胞類似產(chǎn)品：：HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞

HCV29細胞類似產(chǎn)品：：GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞

MPC-83細胞類似產(chǎn)品：：PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞

COV 434細胞類似產(chǎn)品：：HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞

NIH 3T6細胞類似產(chǎn)品：：CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞

RBL.2H3細胞類似產(chǎn)品：：BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞

HCE細胞類似產(chǎn)品：：HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞

EFM192細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL8細胞、Hs 578.Bst細胞、G-292, clone A141B1細胞

HCC1954:人乳腺導(dǎo)管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

OP9細胞類似產(chǎn)品：：SNU354細胞、P3X63 Ag8細胞、HCC-1187細胞

IOSE 29細胞類似產(chǎn)品：：293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞

NIH:OVCAR-8細胞類似產(chǎn)品：：X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞

28SC細胞類似產(chǎn)品：：CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞

SW 839細胞類似產(chǎn)品：：EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞

NS1細胞類似產(chǎn)品：：H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞

"