"Kuramochi:人卵巢癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升GAO，并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內不致產生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

T1-73細胞類似產品：：PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞

NCIH2122細胞類似產品：：LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞

MAntle cell VERona-1細胞類似產品：：CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞

Mouse Forestomach Carcinoma細胞類似產品：：MCA 205細胞、GM00346B細胞、Capan-1細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

Kuramochi:人卵巢癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

MC38細胞類似產品：：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞

SNU216細胞類似產品：：MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞

HTR8細胞類似產品：：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：１：１０傳代；每周換液２-３次

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

U87細胞類似產品：：PANC1005細胞、ECC10細胞、RCM1細胞

CFPAC1細胞類似產品：：PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞

NCL-H548細胞類似產品：：MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞

S-16細胞類似產品：：Hs578Bst細胞、Vero 76 clone E-6細胞、QGY 7701細胞

BALB/3T3細胞類似產品：：GM03573細胞、HEL 92.1.7細胞、T9細胞

Hs 852.T細胞類似產品：：IR 983F細胞、HS852.T細胞、NTC-200細胞

SUDHL-16細胞類似產品：：F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞

ChaGo-K1細胞類似產品：：U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞

H-82細胞類似產品：：NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞

RASMC細胞類似產品：：OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞

NCIH322細胞類似產品：：SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞

CF-1 MEF細胞類似產品：：Centre Antoine Lacassagne-62細胞、RM1細胞、NCI-H-82細胞

H69/P細胞類似產品：：Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞

HuH1細胞類似產品：：NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞

KP-N-RT細胞類似產品：：NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞

Hs281T細胞類似產品：：HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞

Hs281T細胞類似產品：：HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞

LS174細胞類似產品：：HIBEC細胞、33604細胞、H1838細胞

CBRH7919細胞類似產品：：CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞

HCC-1419細胞類似產品：：Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞

ME 180細胞類似產品：：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞

NCIH295R細胞類似產品：：TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞

ABC-1細胞類似產品：：NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞

EU-3細胞類似產品：：PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞

Kuramochi:人卵巢癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

LAN-6細胞類似產品：：H82sclc細胞、207細胞、CFPAC細胞

SKES1細胞類似產品：：Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞

MDA-MB-415細胞類似產品：：NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞

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RGM1細胞類似產品：：C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞

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TE-14細胞類似產品：：A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞

CMT-64細胞類似產品：：GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞

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CAL39細胞類似產品：：SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞

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U 266細胞類似產品：：SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞

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WM115F細胞類似產品：：WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞

Epithelioma Papulosum Cyprini細胞類似產品：：EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞

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C8166-CD4細胞類似產品：：KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞

SKUT-1細胞類似產品：：H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞

ATC241細胞類似產品：：HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞

RT 112細胞類似產品：：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞

SK.OV.3細胞類似產品：：HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞

P3.times.63 Ag8.653細胞類似產品：：KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞

HCC-1500細胞類似產品：：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞

Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞類似產品：：Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞

SupT1細胞類似產品：：HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞

OCI-LY-8細胞類似產品：：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞

BEND細胞類似產品：：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞

OCI/AML3細胞類似產品：：hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞

H719細胞類似產品：：CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞

AG06814-J細胞類似產品：：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞

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NCL-H548細胞類似產品：：MOLM13細胞、MDA-MB-435S細胞、GH 3細胞

MGC-803細胞類似產品：：NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞

373 MG細胞類似產品：：OEC19細胞、MAVER1細胞、NCIH295R細胞

B16/F1細胞類似產品：：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞

HCCLM6細胞類似產品：：LM3細胞、639 V細胞、Capan 2細胞

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CHO K1細胞類似產品：：CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞

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NCIH2170細胞類似產品：：Karpas-422細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、OCILY7細胞

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CAL85-1細胞類似產品：：COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞

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CHP-212細胞類似產品：：RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞

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SJ-Rh 30細胞類似產品：：LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞

NCI-H196細胞類似產品：：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞

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QGY-7703細胞類似產品：：FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞

PL 5細胞類似產品：：U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞

PC14細胞類似產品：：LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞

Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞類似產品：：NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞

NCI-157細胞類似產品：：KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞

Loucy細胞類似產品：：Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞

NCI-H378細胞類似產品：：WRL-68細胞、RC-4B細胞、KHYG細胞

Nb-2細胞類似產品：：C666-1細胞、SK MEL 5細胞、CL40細胞

TM3細胞類似產品：：HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞

P3-NS1/1Ag 4.1細胞類似產品：：SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞

P3-NS1/1Ag 4.1細胞類似產品：：SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞

HCV29細胞類似產品：：GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞

Panc_08_13細胞類似產品：：CCD-112CoN細胞、Jurkat 77細胞、PCI-4M細胞

Kuramochi:人卵巢癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

KYSE520細胞類似產品：：TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞

NCIH2591細胞類似產品：：KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞

GM3570細胞類似產品：：HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞

HCC1954-BL細胞類似產品：：HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞

SK-OV-3細胞類似產品：：WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞

786.O細胞類似產品：：NCIH2347細胞、Caov-3細胞、NCIH1838細胞

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