"5637:人膀胱癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Bac 1.2F5細胞類似產品：：130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞

IB-RS-2細胞類似產品：：CNE細胞、RIMEC細胞、MDA-MB-435-S細胞

HEC-1-B細胞類似產品：：QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞

DU145細胞類似產品：：RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：該細胞源于一位６８歲的患有膀胱癌的白人男性患者。據(jù)報道，該細胞能產生SCF、IL-１、IL-３、IL-６、G-CSF、GM-CSF等。

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

Vx2細胞類似產品：：697細胞、NCIH2196細胞、Psi-2 DAP細胞

HCC 38細胞類似產品：：NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞

HCCC9810細胞類似產品：：Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞

培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內水分在凍結前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋HAO凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做HAO標記；６)凍存：在殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷。【復蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。

細胞傳代方法：１：４-１：８傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

MIMVEC細胞類似產品：：A2780細胞、CCLP1細胞、SW-780細胞

HT3細胞類似產品：：FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞

SK LU 1細胞類似產品：：EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞

Hs 822.T細胞類似產品：：SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞

LS123細胞類似產品：：HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞

NCI-747細胞類似產品：：Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞

HCC1937細胞類似產品：：JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞

KYSE 450細胞類似產品：：Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞

L5178Y TK+/-3.7.2c細胞類似產品：：293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞

HBdSMC細胞類似產品：：SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞

Det 562細胞類似產品：：Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞

BSC40細胞類似產品：：J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞

H-2066細胞類似產品：：OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞

KLN205細胞類似產品：：HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞

DV90細胞類似產品：：SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞

8226/S細胞類似產品：：LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞

8226/S細胞類似產品：：LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞

Hs832T細胞類似產品：：PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞

MB157細胞類似產品：：SNU-1細胞、18G3.cl 1細胞、SK-ChA-1細胞

THLE-3細胞類似產品：：Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞

NCI-H841細胞類似產品：：BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞

YAC細胞類似產品：：NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞

CEF細胞類似產品：：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞

RCC-10RGB細胞類似產品：：Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞

5637:人膀胱癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

WERI細胞類似產品：：OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞

SK-MEL-5細胞類似產品：：H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞

H35 Reuber細胞類似產品：：CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞

H 9細胞類似產品：：Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞

RAT2細胞類似產品：：Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞

Ly18細胞類似產品：：NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞

REC細胞類似產品：：JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞

Tissue Culture-1細胞類似產品：：CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞

IPI-2I細胞類似產品：：KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞

HEK293-F細胞類似產品：：P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞

ZR75-1細胞類似產品：：MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞

CCD-112CoN細胞類似產品：：PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞

K562細胞類似產品：：SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞

NCI747細胞類似產品：：N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞

NT2細胞類似產品：：T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞

H-510A細胞類似產品：：HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞

HEEpiC細胞類似產品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞

WRL 68細胞類似產品：：RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞

Centre Antoine Lacassagne-39細胞類似產品：：Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞

NCIH2170細胞類似產品：：Karpas-422細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、OCILY7細胞

MDBK細胞類似產品：：ECC10細胞、U-hth74細胞、HBZY1細胞

H-647細胞類似產品：：Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞

KP-2細胞類似產品：：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞

HPDE6c7細胞類似產品：：B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞

ISHI細胞類似產品：：SF17細胞、MC-26細胞、NCI-SNU-387細胞

H-2228細胞類似產品：：VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞

C-127細胞類似產品：：McARH7777細胞、TOV112細胞、BPH-1細胞

Human Corneal Endothelial Cells-12細胞類似產品：：SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞類似產品：：MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞

HMEL細胞類似產品：：Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞

NCI-BL2141細胞類似產品：：UO31細胞、H3255_DA細胞、HO8910/PM細胞

MSTO-211細胞類似產品：：HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞

HS 683T細胞類似產品：：NCI-H522細胞、U266細胞、3T3-Swiss細胞

M07e細胞類似產品：：BS-C-1細胞、SW 1271細胞、LTEPsm細胞

MCF-7/AdrR細胞類似產品：：RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞

H1092細胞類似產品：：MM134細胞、S91細胞、MHCC 97細胞

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SK LU 1細胞類似產品：：EMT6細胞、C2A細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞

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Evsa-T細胞類似產品：：PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞

NCI-SNU-668細胞類似產品：：B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞

OE-21細胞類似產品：：Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞

SB細胞類似產品：：SU8686細胞、KG-1細胞、Tu 177細胞

KB細胞類似產品：：T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞

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HTh-74細胞類似產品：：Mel-MeWo細胞、HSC-I細胞、YD-15細胞

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MHCC 97細胞類似產品：：LL2細胞、EL-4細胞、MDA-kb2細胞

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MyLa2059細胞類似產品：：SKMEL-24細胞、PC 61 5.3細胞、NCI-H1781細胞

brain-derived Endothelial cells.3細胞類似產品：：NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞

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22Rv1細胞類似產品：：MDA.MB.231細胞、GM04680細胞、UT-7細胞

GM-3573細胞類似產品：：CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞

DSL-6A-C1細胞類似產品：：HTh 74細胞、SW-1271細胞、HMEC細胞

P-2003細胞類似產品：：SCC 15細胞、TYK-nu細胞、HSAS4細胞

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NCIH1105細胞類似產品：：ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞

Uhth-74細胞類似產品：：HOS (TE85, Clone F5)細胞、P30-OHK細胞、OSKM-1細胞

293c18細胞類似產品：：NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞

PE/CA-PJ34細胞類似產品：：HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞

SHG44細胞類似產品：：HEK293S細胞、SGC-7901/DDP細胞、T24(ECV304)細胞

NCIH2170細胞類似產品：：Karpas-422細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、OCILY7細胞

HO1-N-1細胞類似產品：：143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞

SKOV-3細胞類似產品：：MOLT 3細胞、MADB-106細胞、G-292細胞

ARIP細胞類似產品：：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞

5637:人膀胱癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

MCF 10A細胞類似產品：：OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞

AZ-521細胞類似產品：：MADISON LUNG TA-109細胞、MOLT.4細胞、T98-G細胞

GM05887A細胞類似產品：：MDCK Type II細胞、H2196細胞、CORL51細胞

HNE2細胞類似產品：：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞

SK-ML2細胞類似產品：：COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞

LS180細胞類似產品：：SW982細胞、MDA-MB453細胞、Hs 294T細胞

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