"MIN6:小鼠胰島β復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MDAMB468細胞類似產(chǎn)品：：HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞

ARO81-1細胞類似產(chǎn)品：：IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞

KM12SM細胞類似產(chǎn)品：：OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞

H2081細胞類似產(chǎn)品：：hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

3T3(A31)細胞類似產(chǎn)品：：MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞

SNU119細胞類似產(chǎn)品：：MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞

GM03320D細胞類似產(chǎn)品：：TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞

培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】１)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋HAO凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做HAO標記；６)凍存：在殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

細胞培養(yǎng)中常用設(shè)施及設(shè)備：實驗室設(shè)計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù)，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設(shè)計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設(shè)計原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設(shè)施及設(shè)備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。

3T3 L1細胞類似產(chǎn)品：：NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞

Hs 940.T細胞類似產(chǎn)品：：CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞

NCI-SNU-216細胞類似產(chǎn)品：：KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞

GM02219C細胞類似產(chǎn)品：：MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞

SK-MEL-MeWo細胞類似產(chǎn)品：：SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞

H-4細胞類似產(chǎn)品：：MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞

TE-671細胞類似產(chǎn)品：：LM8細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞、ROS 17/28細胞

ES-2細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞

PA-1細胞類似產(chǎn)品：：Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞

ARIP細胞類似產(chǎn)品：：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞

OVCAR8細胞類似產(chǎn)品：：RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞

GM03573細胞類似產(chǎn)品：：L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞

Mel-624細胞類似產(chǎn)品：：CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞

Hs-578-T細胞類似產(chǎn)品：：H2196細胞、OKa-C-1細胞、H-2228細胞

VMRCRCZ細胞類似產(chǎn)品：：BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞

OVCAR 432細胞類似產(chǎn)品：：ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞

OVCAR 432細胞類似產(chǎn)品：：ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞

H-2023細胞類似產(chǎn)品：：Kelly細胞、NCI-H102細胞、Reh細胞

SW480細胞類似產(chǎn)品：：HPAEpiC細胞、SK-LMS-1細胞、TK-1細胞

VM-CUB1細胞類似產(chǎn)品：：HSC4細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞、SW-948細胞

TOV-21G細胞類似產(chǎn)品：：H22-H8D8細胞、H865細胞、SNU-251細胞

OCI-Ly 18細胞類似產(chǎn)品：：8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞

HITT15細胞類似產(chǎn)品：：CNE-1細胞、Lu-65細胞、HR-1細胞

NS20Y細胞類似產(chǎn)品：：MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞

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ACC2細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞

RPMI-7666細胞類似產(chǎn)品：：T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞

SNU-668細胞類似產(chǎn)品：：Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞

624 MEL細胞類似產(chǎn)品：：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞

U-343-MG細胞類似產(chǎn)品：：OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞

Strain KB細胞類似產(chǎn)品：：6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞

IMR90細胞類似產(chǎn)品：：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞

BNCL2細胞類似產(chǎn)品：：H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞

WiDr-TC細胞類似產(chǎn)品：：Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞

NBL-2細胞類似產(chǎn)品：：NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞

MV4:11細胞類似產(chǎn)品：：P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞

KMS18細胞類似產(chǎn)品：：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞

FDCP-1細胞類似產(chǎn)品：：M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞

BMF細胞類似產(chǎn)品：：TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞

Rin-M-5F細胞類似產(chǎn)品：：HuP-T3細胞、HCC-1806細胞、EOC-20細胞

P19細胞類似產(chǎn)品：：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞

H-1341細胞類似產(chǎn)品：：A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞

MDA1386細胞類似產(chǎn)品：：BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞

SKNMC細胞類似產(chǎn)品：：KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞

THP1細胞類似產(chǎn)品：：HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞

LNCaP.FGC細胞類似產(chǎn)品：：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞

LNCaP.FGC細胞類似產(chǎn)品：：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞

HCC-1954細胞類似產(chǎn)品：：CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞

Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞類似產(chǎn)品：：NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞

OCI/AML-2細胞類似產(chǎn)品：：HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞

QGY細胞類似產(chǎn)品：：CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞類似產(chǎn)品：：Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞

RH-35細胞類似產(chǎn)品：：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞

NCIH1694細胞類似產(chǎn)品：：GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞

SNU-869細胞類似產(chǎn)品：：P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞

RBE細胞類似產(chǎn)品：：IGROV-1細胞、HEK 293 c18細胞、NS1-Ag4/1細胞

130 T細胞類似產(chǎn)品：：H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞

HCC1500細胞類似產(chǎn)品：：OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞

SW900細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞

NCI-H838細胞類似產(chǎn)品：：hTERT-RPE-1細胞、R1610細胞、Okayama University Medical School-23細胞

SW1222細胞類似產(chǎn)品：：HRA 19細胞、Ketr3細胞、Vero E-6細胞

V79-GalK1細胞類似產(chǎn)品：：GM05372E細胞、Hs 695T細胞、L cells細胞

NCI-SNU-216細胞類似產(chǎn)品：：KPL4細胞、NCI-SNU-216細胞、SNU520細胞

DMS-114細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞

FAK+/+細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞

RPMI6666細胞類似產(chǎn)品：：CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞

University of Arizona Cell Culture-893細胞類似產(chǎn)品：：GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞

HLMVEC細胞類似產(chǎn)品：：MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞

LAN-6細胞類似產(chǎn)品：：H82sclc細胞、207細胞、CFPAC細胞

Vero 76細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞

GLRK 13細胞類似產(chǎn)品：：IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞

Cates 1B細胞類似產(chǎn)品：：KP2細胞、67NR細胞、A549細胞

SN12C-PM6細胞類似產(chǎn)品：：NBL-5細胞、SK-N-FI細胞、Strain KB細胞

Madin-Darby Bovine Kidney細胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞

SUDHL16細胞類似產(chǎn)品：：NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞

ZR751細胞類似產(chǎn)品：：PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞

SUDHL-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-119細胞、JIMT-1細胞、COS1細胞

LS-1034細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2107細胞、OsACL細胞、A 549細胞

Panc_08_13細胞類似產(chǎn)品：：CCD-112CoN細胞、Jurkat 77細胞、PCI-4M細胞

H2029細胞類似產(chǎn)品：：CAL27細胞、Panc08.13細胞、Hs 274細胞

HCC-4006細胞類似產(chǎn)品：：SNU869細胞、H-841細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞

U-343 MG細胞類似產(chǎn)品：：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞

SV-HUC-1細胞類似產(chǎn)品：：Neuro 2a細胞、NCI-UMC-11細胞、NCI-SNU-475細胞

SV-HUC-1細胞類似產(chǎn)品：：Neuro 2a細胞、NCI-UMC-11細胞、NCI-SNU-475細胞

J-774A.1細胞類似產(chǎn)品：：CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞

NCI-SNU-620細胞類似產(chǎn)品：：NCI-441細胞、MKN 28細胞、MHCC97-L細胞

NCIH1105細胞類似產(chǎn)品：：ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞

SKMEL28細胞類似產(chǎn)品：：Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞

MCF10A細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞

BrCL18細胞類似產(chǎn)品：：MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞

CCD-966SK細胞類似產(chǎn)品：：P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞

HuH-1細胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞

DMS-79細胞類似產(chǎn)品：：U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞

Panc02.03細胞類似產(chǎn)品：：H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞

LWnt-3A細胞類似產(chǎn)品：：A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞

COLO-829細胞類似產(chǎn)品：：A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞

COLO 320細胞類似產(chǎn)品：：THLE-2細胞、UM-UC-3細胞、NCI-H1876細胞

293-EBNA細胞類似產(chǎn)品：：Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞

Hs-27細胞類似產(chǎn)品：：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞

BALL1細胞類似產(chǎn)品：：Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞

PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞類似產(chǎn)品：：SHSY5Y細胞、QBI-293A細胞、NCIH1623細胞

MC3T3-E1 Subclone 14細胞類似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞

NCIADR.RES細胞類似產(chǎn)品：：SUNE 1細胞、SU-DHL-5細胞、3LL細胞

Hs742T細胞類似產(chǎn)品：：Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞

HEK293S細胞類似產(chǎn)品：：Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞

Kit225-K6細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞

MCF-7細胞類似產(chǎn)品：：MONO-MAC 6細胞、NCIH1436細胞、LS 513細胞

MIN6:小鼠胰島β復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

NCI-H-82細胞類似產(chǎn)品：：BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞類似產(chǎn)品：：EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞

Capan-2細胞類似產(chǎn)品：：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞

KLM1細胞類似產(chǎn)品：：EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞

LOUNH91細胞類似產(chǎn)品：：CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞

SNU761細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞

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