"AN3-CA:人子宮內(nèi)膜腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NCIH2228細胞類似產(chǎn)品：：KCL-22細胞、FHL-124細胞、ZYM-SVEC01細胞

MIA-Pa-Ca-2細胞類似產(chǎn)品：：451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞

HCC1359細胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞

JM細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：AN３CA細胞建系于１９６４年。它衍生于子宮內(nèi)膜癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織，具有癌細胞的基本特性，能在體外長期傳代培養(yǎng)，接種實驗動物產(chǎn)生明顯腫瘤。但細胞的生物學特性及超微結(jié)構(gòu)尚未深入研究，僅發(fā)現(xiàn)該細胞系促黑激素合成為陰性。細胞常用于人子宮內(nèi)膜癌細胞生物學及其相關(guān)特性研究。

AN3-CA:人子宮內(nèi)膜腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

UM2細胞類似產(chǎn)品：：Pt K1 (NBL-3)細胞、MDA-MB-435S細胞、Molm 14細胞

SNU-354細胞類似產(chǎn)品：：SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞

HCC1599細胞類似產(chǎn)品：：ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

HM細胞類似產(chǎn)品：：HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞

SCCVII/St細胞類似產(chǎn)品：：Panc-327細胞、LNCaP-ATCC細胞、LS 180細胞

NCIH208細胞類似產(chǎn)品：：L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞

SKNSH細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 432細胞、Pfeiffer細胞、AR41P細胞

H146細胞類似產(chǎn)品：：NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞

P31/FUJ細胞類似產(chǎn)品：：SNUC2A細胞、NFS-60細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞

MHH-CALL-2細胞類似產(chǎn)品：：HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞

MDCK2細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞

ACC-3細胞類似產(chǎn)品：：4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞

HEL-299細胞類似產(chǎn)品：：EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞

2E8細胞類似產(chǎn)品：：HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞

HIMEC細胞類似產(chǎn)品：：NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞

Roswell Park Memorial Institute 2650細胞類似產(chǎn)品：：LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞

TEV-1細胞類似產(chǎn)品：：4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞

RAMOS2G64C10細胞類似產(chǎn)品：：McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞

PC-9S1細胞類似產(chǎn)品：：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞

PC-9S1細胞類似產(chǎn)品：：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞

SK Mel28細胞類似產(chǎn)品：：USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞

DKMG細胞類似產(chǎn)品：：NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞

CEMx721.174.T2細胞類似產(chǎn)品：：Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞

SW982細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞

Line 207細胞類似產(chǎn)品：：HCC1806細胞、BC-022細胞、U251-MG細胞

BE(2)M17細胞類似產(chǎn)品：：Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞

WIL2 S細胞類似產(chǎn)品：：OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞

AN3-CA:人子宮內(nèi)膜腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

95D細胞類似產(chǎn)品：：OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞

CCRF-CEM C7細胞類似產(chǎn)品：：1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞

MDA361細胞類似產(chǎn)品：：HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞

HECV細胞類似產(chǎn)品：：CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞

HSC（Human Schwann）細胞類似產(chǎn)品：：CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞

LC1細胞類似產(chǎn)品：：PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞

BT-325細胞類似產(chǎn)品：：SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞

DH-82細胞類似產(chǎn)品：：PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞

HepG2細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-148細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、JKT1細胞

SW839細胞類似產(chǎn)品：：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞

SRS-82細胞類似產(chǎn)品：：BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞

FaDu細胞類似產(chǎn)品：：Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞

OVCAR5細胞類似產(chǎn)品：：SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞

AD-293細胞類似產(chǎn)品：：C4-2 Bone metastatic細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞、Hs 888Lu細胞

McA-RH 8994細胞類似產(chǎn)品：：A-375細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞、SCL II細胞

Colo205細胞類似產(chǎn)品：：KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞

CAL 148細胞類似產(chǎn)品：：TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞

VMRC-LCD細胞類似產(chǎn)品：：M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞

P30/Ohkubo細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞

P3HR1細胞類似產(chǎn)品：：SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞

MCCAR細胞類似產(chǎn)品：：TGHAVSMC細胞、U266 B1細胞、H1437細胞

HTori3細胞類似產(chǎn)品：：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞

V-79細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞

Kit225-K6細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞

L 428細胞類似產(chǎn)品：：SNU475細胞、HCC-1833細胞、QGP1細胞

CaSki細胞類似產(chǎn)品：：HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞

HCC-1428細胞類似產(chǎn)品：：BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞

AMO1細胞類似產(chǎn)品：：RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞

IPLB-SF 21AE細胞類似產(chǎn)品：：SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞

DHL-4細胞類似產(chǎn)品：：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞

CPA47細胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞

P3J-HR-1細胞類似產(chǎn)品：：HFF1細胞、HIEC6細胞、MCF7-GFP細胞

SKMEL5細胞類似產(chǎn)品：：C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞

HEK293A細胞類似產(chǎn)品：：NK62a細胞、Panc 4.03細胞、L-540細胞

T-47D細胞類似產(chǎn)品：：149 PT細胞、HT115細胞、BCaP-37細胞

HcaF細胞類似產(chǎn)品：：H8細胞、H-2081細胞、L-1210細胞

KYSE 50細胞類似產(chǎn)品：：HeLa S3細胞、SUDHL8細胞、Fox/NY細胞

NCIH208細胞類似產(chǎn)品：：L6565細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、C666-1細胞

MEC1細胞類似產(chǎn)品：：J 111細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、SK Col 1細胞

IB-RS-2細胞類似產(chǎn)品：：CNE細胞、RIMEC細胞、MDA-MB-435-S細胞

H-2170細胞類似產(chǎn)品：：WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞

MDCC-MSB1細胞類似產(chǎn)品：：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞

HSC2細胞類似產(chǎn)品：：HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞

HIC細胞類似產(chǎn)品：：hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞

MF2059細胞類似產(chǎn)品：：WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞

P-388細胞類似產(chǎn)品：：ACC-3細胞、SKNBE2細胞、HLF細胞

SUM-159PT細胞類似產(chǎn)品：：Hs683細胞、OCI-LY-3細胞、LC2/Ad細胞

NS-1細胞類似產(chǎn)品：：MADB 106細胞、MLOY4細胞、KYSE-140細胞

KPL-4細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1417細胞、SW626細胞、BMDC細胞

HD11細胞類似產(chǎn)品：：GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞

Ramos(RA1)細胞類似產(chǎn)品：：IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞

B 95.8細胞類似產(chǎn)品：：NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞

SF126細胞類似產(chǎn)品：：KMH-2細胞、MCA 205細胞、MKN 7細胞

U-373MG細胞類似產(chǎn)品：：Astrocyte type I clone細胞、FU-97細胞、DoTc2 4510細胞

Ly1細胞類似產(chǎn)品：：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、Sp2/0細胞、NCIH847細胞

WEHI-231細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞

B16BL6細胞類似產(chǎn)品：：HEI193細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞、MSF細胞

H1954細胞類似產(chǎn)品：：Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞

BNL.CL2細胞類似產(chǎn)品：：TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞

NOR-10細胞類似產(chǎn)品：：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞

NUGC-2細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞

NCI-H1522細胞類似產(chǎn)品：：H441細胞、GM03671細胞、SK-HEP-1細胞

Rat 1細胞類似產(chǎn)品：：HMrSV5細胞、NCI-H1792細胞、ACT-1細胞

EOC20細胞類似產(chǎn)品：：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞

TOV112細胞類似產(chǎn)品：：SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞

TN5B14細胞類似產(chǎn)品：：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞

BCP1細胞類似產(chǎn)品：：M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞

DLD1細胞類似產(chǎn)品：：AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞

MM6細胞類似產(chǎn)品：：Kit225細胞、Rabbit Kidney 13細胞、C3A細胞

Mel-MeWo細胞類似產(chǎn)品：：UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞

HEK293-EBNA1細胞類似產(chǎn)品：：16HBE細胞、M21細胞、IPECJ2細胞

HKBML細胞類似產(chǎn)品：：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞

NCI-H2196細胞類似產(chǎn)品：：MA-104細胞、6-10B細胞、H-1915細胞

SW13細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞

TB-1 Lu細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞

MDCKII細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞

Huh-7細胞類似產(chǎn)品：：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞

CCRF-CEM C7細胞類似產(chǎn)品：：1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞

LOU-NH-91細胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞

OKa-C-1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞

GM03570E細胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-2細胞、WM-239A細胞、Lu-165細胞

TE 354.T細胞類似產(chǎn)品：：NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞

AN3-CA:人子宮內(nèi)膜腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Human Embryo Kidney-2細胞類似產(chǎn)品：：U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞

AML-12細胞類似產(chǎn)品：：HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞

DLD 1細胞類似產(chǎn)品：：PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞

Panc-03.27細胞類似產(chǎn)品：：COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞

HPAF II細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞

UT7細胞類似產(chǎn)品：：MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞

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