"MGC-803:人胃癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

PSN-1細胞類似產品：：BJ1細胞、NB-19細胞、293E細胞

RH30SJ細胞類似產品：：End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞

KU-812F細胞類似產品：：E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞

U266B1細胞類似產品：：OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：１９８０年建系，人胃癌低分化黏液腺癌組織小塊用RPMI-１６４０培養(yǎng)液培養(yǎng)４天細胞開始生長，首次傳代８日。免疫抑制的Wistar雄幼大鼠皮下移植成功。

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

WIL2-S細胞類似產品：：COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞

MDAMB157細胞類似產品：：MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞

M 1細胞類似產品：：32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內的培養(yǎng)液成分如蛋白質等燒焦后會產生有害物質，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理HAO工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，Zui大的YOU點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。

細胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

細胞培養(yǎng)中常用設施及設備：實驗室設計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內較少走動的內側，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設施及設備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞類似產品：：H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞

M059J細胞類似產品：：Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞

UMC11細胞類似產品：：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞

VeroC1008細胞類似產品：：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞

Immortal Pig Intestinal-2I細胞類似產品：：CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞

SKml2細胞類似產品：：P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞

RASMC細胞類似產品：：OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞

NRK clone 52E細胞類似產品：：PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞

HPAF-II細胞類似產品：：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞

DF-1細胞類似產品：：H1184細胞、UPCI:SCC090細胞、NCIH727細胞

Kit 225-K6細胞類似產品：：3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞

H-2452細胞類似產品：：S-16細胞、hOMF細胞、BCaP 37細胞

KLM-1細胞類似產品：：RPE1細胞、KALS1細胞、MEL細胞

SPDC-CCL141細胞類似產品：：CCC-HEH-2細胞、CHP-126細胞、LTEP a2細胞

NCI-H82細胞類似產品：：VSC4.1細胞、PT67細胞、H2108細胞

H4-II-E細胞類似產品：：Hmy.2 CIR細胞、PANC 203細胞、624細胞

H4-II-E細胞類似產品：：Hmy.2 CIR細胞、PANC 203細胞、624細胞

HOS細胞類似產品：：S16細胞、COLO680N細胞、MIA-PaCa-2細胞

JROECL 21細胞類似產品：：KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞

CEF細胞類似產品：：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞

NCI-H2087細胞類似產品：：SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞

MV-4-11細胞類似產品：：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞

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BEND細胞類似產品：：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞

MGC-803:人胃癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

NTHY-ORI3.1細胞類似產品：：hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞

ONS-76細胞類似產品：：3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞

NCIH2009細胞類似產品：：FD-LSC-1細胞、CCD1095Sk細胞、CT26.WT細胞

YES-2細胞類似產品：：NCI-H889細胞、OCI-LY-18細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞

Eca109細胞類似產品：：H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞

NPC-TW039細胞類似產品：：Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞

COS7細胞類似產品：：BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞

RPMI7951細胞類似產品：：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞

Hs-729-T細胞類似產品：：RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞

BE2-C細胞類似產品：：HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞

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WC00044細胞類似產品：：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞

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SK-MEL-31細胞類似產品：：CHO cell clone K1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞、PC 61.5.3細胞

SU-DHL-2細胞類似產品：：KTA7細胞、KOSC-2 cl3-43細胞、Rainbow Trout Embryo細胞

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GM346細胞類似產品：：LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞

NTERA2-cloneD1細胞類似產品：：GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞

U87細胞類似產品：：PANC1005細胞、ECC10細胞、RCM1細胞

253JBV細胞類似產品：：BT549細胞、Hs 578.T細胞、BJ [Human fibroblast]細胞

LC-2/ad細胞類似產品：：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞

VMCUB1細胞類似產品：：H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞

OVCAR-3細胞類似產品：：TE10細胞、SW1417細胞、LN-382細胞

Normal Rat, August 3, 1983細胞類似產品：：HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞

H-446細胞類似產品：：U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞

GB1細胞類似產品：：COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞

HEL9217細胞類似產品：：Kato-III細胞、H1836細胞、TE 85.T細胞

OCILY-3細胞類似產品：：Hs 888Lu細胞、Walker/LLC-WRC256細胞、P3X63 Ag8.653細胞

TE3細胞類似產品：：HT 1376細胞、Y3細胞、343MG細胞

T/GHA-VSMC細胞類似產品：：SGC-7901細胞、OUMS23細胞、MCM細胞

UMC11細胞類似產品：：U-373-MG細胞、Mono Mac 1細胞、A498細胞

Medical Research Council cell strain-9細胞類似產品：：NCIH441細胞、T24(ECV304)細胞、H4-II-E-C3細胞

PFSK-1細胞類似產品：：GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞

TE15細胞類似產品：：N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞

NU-GC-3細胞類似產品：：MGC803細胞、ACCM細胞、MC 116細胞

LICCF細胞類似產品：：Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞

JB6 [Mouse]細胞類似產品：：NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞

M059J細胞類似產品：：Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞

PANC0327細胞類似產品：：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞

SUD6細胞類似產品：：NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞

SKG3A細胞類似產品：：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞

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MV 4;11細胞類似產品：：KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞

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HEK/EBNA細胞類似產品：：K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞

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CEMC7細胞類似產品：：HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞

Nb2細胞類似產品：：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞

SW-1353細胞類似產品：：AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞

TW-039細胞類似產品：：RT-4細胞、102PT細胞、GalK 1細胞

NFHIOSE-80細胞類似產品：：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞

HTh-74細胞類似產品：：Mel-MeWo細胞、HSC-I細胞、YD-15細胞

H1648細胞類似產品：：HFSF細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、HBE細胞

BL2141細胞類似產品：：CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞

Lu-65細胞類似產品：：LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞

TE-5細胞類似產品：：Leydig細胞、KU1919細胞、T.T細胞

COV-434細胞類似產品：：HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞

16HBE14o-細胞類似產品：：Panc 3.27細胞、SGC7901細胞、HeLa/S3細胞

MGC-803:人胃癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

OVCAR-5細胞類似產品：：R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞

NCI-H1105細胞類似產品：：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞

TCC Sup細胞類似產品：：Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞

P3-X63-Ag8細胞類似產品：：Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞

FHL-124細胞類似產品：：SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞

ZR75_1細胞類似產品：：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞

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