"RPMI-1788 Cells(贈送Str鑒定報告)|人外周血B淋巴細胞

細胞背景資料：B淋巴細胞；EBV轉化

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(Zui主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用，如細胞密度GAO于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。

細胞生長：懸浮

P3/NS1/1-Ag4.1細胞類似產品：：H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞

LPC-H12細胞類似產品：：SK-RC 42細胞、MCF7/WT細胞、Kuramochi細胞

F-36P細胞類似產品：：Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞

BC-028細胞類似產品：：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞

JKT-1細胞類似產品：：HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞

RPMI-1788 Cells(贈送Str鑒定報告)|人外周血B淋巴細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

U-138 MG細胞類似產品：：NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞

GM05862細胞類似產品：：H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞

NCI-SNU-668細胞類似產品：：B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞

NBLAN5T細胞類似產品：：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞

TE11細胞類似產品：：Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：懸浮

HCC0366細胞類似產品：：MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞

MCF7-GFP細胞類似產品：：P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞

HUVSMC細胞類似產品：：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞

GTL16細胞類似產品：：NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞

OCI-LY-7細胞類似產品：：HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞

Hs 739.T細胞類似產品：：U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞

培養(yǎng)細胞真的不難，Zui關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越HAO。另外，要掌握HAO胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，Zui近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做HAO支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候ZuiHAO給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。

細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加GAO濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液HAO不HAO，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕Zui后換課題，這個見得太多了，別不當會事。

HCA7細胞類似產品：：CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞

QGY-7703細胞類似產品：：FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞

Hi-five細胞類似產品：：HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞

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Caco-2/ATCC細胞類似產品：：NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞

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Hs 343.T細胞類似產品：：TN5B14細胞、HKC細胞、V79-1細胞

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mousepodocyte細胞類似產品：：HH [Human lymphoma]細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、MCA-38細胞

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Super Tube細胞類似產品：：SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞

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Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞類似產品：：NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞

N87細胞類似產品：：HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞

WPMY-1細胞類似產品：：8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞

TE 32.T細胞類似產品：：SF 767細胞、WEHI-3B細胞、C1498細胞

NCIH1618細胞類似產品：：CFSC-2G細胞、LAN1細胞、KP-N-YN細胞

P3-X63-Ag8-6-5-3細胞類似產品：：JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞

NCI-H2405細胞類似產品：：MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞

PAI細胞類似產品：：UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞

AG 9細胞類似產品：：Ramos-RA1細胞、IAR20細胞、NCIH345細胞

NCI-H1793細胞類似產品：：Sol8細胞、Colo-678細胞、H-2135細胞

INS1E細胞類似產品：：HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞

G-292細胞類似產品：：U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞

Bac1 2F5細胞類似產品：：X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞

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NCI-H322T細胞類似產品：：Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞

HL-1細胞類似產品：：HK-2 [Human kidney]細胞、H1792細胞、OCI-Ly7細胞

PK-15細胞類似產品：：PIGI細胞、SK Mel28細胞、GB1細胞

NCI-H1703細胞類似產品：：LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞

NCI-H2591細胞類似產品：：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞

MDA415細胞類似產品：：H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞

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A375.S2細胞類似產品：：DMS-153細胞、NH6細胞、NOZAWA細胞

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HT-115細胞類似產品：：32D.3細胞、A-375SM細胞、NCI-H1355細胞

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HL 60細胞類似產品：：SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞

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